比格犬SLAM基因的克隆与序列分析

对比格犬的犬瘟热病毒细胞受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)基因进行克隆及测序分析,并与其他物种的SLAM受体进行比较,以期发现其关键结构部分.用RT-PCR从Con A刺激后的犬外周血淋巴细胞中扩增SLAM基因,将目的片段连接到PMD18-T载体上,转化感受态细胞,筛选阳性克隆,测序.结果显示,克隆的比格犬SLA...     

抗犬瘟热病毒荧光标记单抗的制备和初步鉴定

[目的]建立利用单克隆抗体检测犬瘟热病毒的直接免疫荧光诊断方法。[方法]通过搅拌法,用异硫氰酸荧光素标记G蛋白纯化的抗犬瘟热病毒单抗CE3,对荧光抗体进行纯化、鉴定,并确定其最适工作浓度。对61份临床可疑犬瘟热病料进行直接免疫荧光检测。[结果]吸收试验、阻断试验和特异性试验结果显示,标记抗体具有高度的敏感性和特异性,与犬细小病毒（CPV）、犬副流感病毒（CPIV）、犬腺病毒（CAV）、狂犬病毒（RV）无交叉反应,其最优化工作浓度为1：80。对临床可疑犬瘟热病料的阳性检出率是48％。[结论]该研究建立的直接免疫荧光方法具有快速、特异和简便的优点,对犬瘟热疾病的早期诊断具有重要意义。     

中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响

[目的]为体外研制人参皂苷及其衍生物的抗MDV作用机制提供理论依据。[方法]采用中性红染料吸收法,检测了人参皂苷及其衍生物对鸡胚成纤维细胞（CEF）体外培养中增殖活性的影响。[结果]各药物的促增殖作用不完全相同,低毒性的药物促增殖作用更明显。从药物对CEF细胞的不同作用时间点来看,以72h的OD值和正常对照的差异最大,在24h和正常对照组差异不显著。[结论]人参皂苷及其衍生物在中、低浓度能够促进CEF细胞的增殖,且药物作用具有时间依赖性。     

细胞病变观察法检测人参皂苷及其衍生物抗马立克氏病病毒的作用

为探讨人参皂苷及其衍生物体外抗马立克氏病病毒的作用机理,采用体外细胞培养法,在药物安全浓度范围内,测定人参皂苷及其衍生物对马立克氏病病毒(MDV)感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的保护效果。结果显示,修饰前的人参皂苷和修饰后的衍生物7具有较好的抗病毒效果。表明人参皂苷和衍生物7可以减轻病毒对CEF细胞的损伤程度。     

12味中药对鸡血清型O_(78)大肠杆菌的抗菌活性观察

本研究旨在观察乌梅、芦荟等12味中药的水煎液对鸡致病性大肠杆菌O78的抗菌活性。选取乌梅、芦荟等12味中药加水煎煮以获得中药水提取物,测定其对鸡致病性大肠杆菌O78的最低抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并对体外抑菌效果较好的单味中药进行体内试验。乌梅、芦荟、白头翁抗菌活性较好,桔梗、连翘、大黄、白芍、白术几乎无抗菌活性,其中乌梅、白头翁与芦荟水提取物对鸡致病性大肠杆菌O78的MIC分别为2.57、2.06和2.31mg/mL。乌梅、芦荟、白头翁具有一定的抗鸡致病性大肠杆菌O78的作用,将为开发新的抗鸡致病性大肠杆菌的药物奠定理论基础。     

天然低共熔溶剂在植物提取物中的应用研究进展

植物提取物是畜禽饲料添加剂的重要组成部分,在畜禽养殖中起到抗氧化、抗炎、抗应激和提高生产性能的作用。目前植物提取物的制备多采用常规的有机溶剂（乙醇、氯仿和乙酸乙酯）提取,有机溶剂的易燃、易挥发和毒性会对提取人员造成伤害,提取后的废液会造成环境的污染。天然低共熔溶剂（natural deep eutectic solvents, NADESs）是一种以初级代谢产物等天然成分为原料的新型绿色提取溶剂,具有制备简单、低毒或无毒、价廉易得、可生物降解、可回收利用等优点,是未来替代传统有机提取溶剂的新型溶剂,已广泛应用到化工、食品、中药提取等技术领域。文章综述了天然低共熔溶剂在植物提取物中的最新应用进展,旨在为天然低共熔溶剂的推广和应用提供指导。     

TaqMan探针实时荧光定量PCR诊断犬瘟热病毒方法的建立

根据犬瘟热病毒核蛋白基因的保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针建立荧光定量PCR。构建FQ-PCR绝对定量的标准品,并对反应体系进行优化, 建立绝对定量的标准曲线。利用十倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT-PCR法进行比较;特异性检验后进行临床标本的检验。结果显示：实验成功构建了绝对定量的参照质粒,标准曲线相关系数为0.994。犬瘟热病毒FQ-PCR检测反应的灵敏度为10 TCID50;5种非犬瘟热病毒病原体检测均为阴性;说明本实验建立的FQ-PCR具有快速、灵敏和稳定的特点,适用于临床样品的检验。     

植物多糖免疫调节功能研究进展

对植物多糖的免疫调节功能进行了综述,归纳总结了植物多糖对免疫器官、细胞、细胞因子和免疫信号通道的免疫调节作用及在黏膜免疫方面的最新研究进展。     

益母康颗粒亚慢性毒性试验研究

为了评价益母康颗粒的安全性,采用SD大鼠进行了亚慢性毒性试验,将80只大鼠随机分为8组,雌雄各4组,每组10只。按给药剂量不同将雌、雄各组又分为高、中、低剂量组,分别按体重给药15.0,7.5,1.5 g/(kg·d),对照组用纯化水替代药物,每天灌胃给药,连续给药30 d。观察大鼠生活状态等行为,测量体重,计算器官指数,测定血液生理和生化指标,进行组织病理学观察。结果表明:在给药期间大鼠表现均正常,处死后器官指数和血清学、组织病理学检查结果均无异常。说明益母康颗粒无亚慢性毒性,在临床应用上是安全的。     

基于DPPH自由基清除效果研究白头翁的提取工艺

为了优化白头翁的提取工艺,以白头翁提取液对DPPH自由基的清除率作为评价指标,考查料水比、提取时间、提取次数、提取温度等不同单因素对白头翁提取液清除DPPH自由基效果的影响,并通过正交试验对单因素结果进行优化。结果表明,当料水比为1∶40、提取时间为45min、提取次数为2次、提取温度为60℃时白头翁提取液对DPPH自由基的清除率最大,可达到54.9%。由该结果可以得出,提取方法对白头翁提取液清除DPPH自由基效果具有影响,高温和长时间提取可能对白头翁提取液清除DPPH自由基的有效成分具有破坏作用。