黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附及肠道定植规律的研究

[目的]研究黏红酵母(Rhodotorula glutinis)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus casei)对牙鲆肠黏液的黏附能力,探讨黏红酵母在牙鲆肠道中的定植规律及对牙鲆抗病能力的影响。[方法]采用体外黏液黏附模型测定上述4株益生菌的黏液黏附能力,平板菌落计数法测定黏红酵母在肠道的数量。[结果]黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附能力最强,其次是鼠李糖乳杆菌,纳豆芽孢杆菌黏附能力最弱。投喂含黏红酵母饲料的牙鲆肠道其酵母数量达到了103～104cfu/g内含物。鳗弧菌攻毒后,对照组牙鲆死亡率显著高于黏红酵母组。[结论]黏红酵母在牙鲆肠道具有较好定植潜能并能降低牙鲆因弧菌引起的死亡率,因此具有较好的应用前景。     

饲料添加剂半胱胺对牙鲆毒性作用的初步研究

[目的]研究饲料添加剂半胱胺对牙鲆的毒性作用。[方法]采用腹腔注射和口腔灌服2种方式按等对数浓度梯度进行半胱胺对牙鲆的急性毒性试验,同时采用一次腹腔注射方式以100 mg/kg BW的半胱胺剂量对牙鲆进行亚急性毒性试验。[结果]急性毒性试验表明,腹腔注射组半胱胺96 h的LD50为263.6 mg/kg BW,95%可信区间为237.40~292.80 mg/kg BW,其安全剂量为26.36 mg/kg BW。口腔灌服组半胱胺96 h的LD50为1754.70 mg/kg BW,95%可信区间为1534.60~2006.30 mg/kg BW,其安全剂量为175.47 mg/kg BW。亚急性毒性试验表明:在注射100 mg/kg BW半胱胺后2 h,与对照相比,牙鲆血浆葡萄糖含量显著升高,尿素氮含量显著降低;血浆谷草转氨酶活性随注射时间有所升高,谷丙转氨酶活性随注射时间有所降低。[结论]半胱胺对牙鲆的毒性属于低等毒性。     

牙鲆单倍体、三倍体、雌核发育二倍体和普通二倍体胚胎发育的比较

在水温为(16.0±0.5)℃、pH为8.0～8.3、盐度为30.2的条件下,对牙鲆Paralichthys olivaceus单倍体、三倍体和雌核发育二倍体胚胎发育的过程与普通二倍体牙鲆的发育进行了比较.结果表明:单倍体胚胎脊柱弯曲,器官分化不全,受精率低,畸形率高,出膜率低;三倍体和雌核发育二倍体胚胎与普通二倍体牙鲆的发育时序基本相同,受精卵经过卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、卵黄栓胚、克氏囊胚、尾芽胚、心跳胚、出膜期等阶段孵化出膜,各阶段除发育时间不同外,发育特征与发育分期没有明显差别;普通二倍体胚胎约61 h孵化出膜,而三倍体和雌核发育二倍体分别经66 h 30 min和67 h 50 min孵化出膜,孵化时间比普通二倍体牙鲆长约10%.其中,卵裂期三倍体和雌核发育二倍体在细胞分裂阶段发育特别缓慢,发育时间比普通二倍体长约25%.单倍体出膜率为(16.5±2.2)%,畸形率为(97.2±1.6)%;雌核发育二倍体出膜率为(85.6±3.0)%,畸形率为(13.2±2.3)%;三倍体出膜率为(82.3±3.1)%,畸形率为(16.3±2.5)%.与普通二倍体牙鲆相比,三倍体和雌核发育二倍体胚胎出膜率低,仔鱼畸形率高.     

不同饵料对舟山牙鲆仔稚鱼生长发育及存活的影响

采用野生桡足类、经营养强化的卤虫无节幼体、未经营养强化的卤虫无节幼体以及人工配合饲料投喂15日龄牙鲆仔鱼,经30d培育,测定其生长、白化率、变态率和存活率。结果表明：野生桡足类和人工配合饲料试验组的牙鲆仔鱼牛长率、变态率和存活率均最高,白化率最低;营养强化试验组的牙鲆仔鱼生长及成活率等各项指标均较高,白化率较低;未强化试验组的牙鲆仔鱼生长及成活率等各项指标均最低,白化率最高。据此可认为：桡足类和经营养强化的卤虫无节幼体是牙鲆仔鱼的优质活饵料。     

牙鲆5个养殖群体的遗传多样性分析

利用16对微卫星分子标记对牙鲆（Paralichthys olivaceus）的5个养殖群体进行遗传多样性分析。结果表明，等位基因数为2-9个，平均等位基因数为6．0625；有效等位基因数1．2596-5．5161，平均有效等位基因数3．692；各位点的杂合度观测值（Ho）0．2200-0．8000；杂合度期望值（He）0．2061-0．8187。各群体之间无偏倚杂合度期望值从小到大依次为丹东、北戴河、威海、青岛、荣成。Kruskal-Wallis检验结果（H=0．672，df=4，P=0．955）则说明，5个群体遗传多样性差异不显著。群体间基因分化系数（Gs，）为0．0991，各群体之间存在中度遗传分化。采用UPGMA法对5个群体进行聚类，可分3类：丹东和北戴河各为一类，威海、荣成、青岛为一类，其中威海与荣成群体的分化最小。结合Hardy-Weinberg平衡，拟合度检验和遗传偏离指数（动的分析结果表明，各群体的遗传平衡状况存在很大差别。遗传变异的分析结果说明5群体遗传多样性比较丰富。     

“漠斑牙鲆子二代苗种繁育与养殖技术研究”通过鉴定

日前，由莱州市大华水产有限公司进行的“漠斑牙鲆子二代苗种繁育与养殖技术研究”通过了省科技厅组织的专家鉴定。该公司在2002年以来进行漠斑牙鲆引进与苗种规模化生产研究和漠斑牙鲆养殖研究的基础上，于2004年以来开展漠斑牙鲆子二代苗种繁育与养殖技术研究，通过4年多的试验研究和生产实践，建立了漠斑牙鲆子二代苗种人工繁育、养殖工艺技术和养殖模式，实现了亲鱼自然产卵，验证了漠斑牙鲆适合于池塘养殖、工厂化养殖和网箱养殖。共培育出性状优良的漠斑牙鲆子一代亲鱼200尾，繁育子二代苗种94．3万尾，延续了子一代鱼的优良性状。试验养殖，池塘养殖成活率达到90％，每667m^2产量达到276．8kg；工厂化养殖成活率达到95％，单产达到每平方米11．7kg；网箱养殖成活率达到86．9％，单产达到每平方米10．4kg。养殖效益显著。     

盐碱地低盐水池塘网箱套养漠斑牙鲆技术

2004-2005年,利用盐碱地低盐水虾池设置网箱套养漠斑牙鲆349.5m2,产鱼3.749t,产虾55.065t,其中2005年虾池设置网箱套养漠斑牙鲆306m2,产鱼3.245t,平均10.6kg/m2,平均全长34.0cm体重527.4g,养殖成活率为90.5%,产虾49.003t,平均408.4kg/667m2,平均规格11.9cm养殖成活率为71.23%。     

漠斑牙鲆室内水泥池苗种淡化驯养技术

2006～2007年杭州市水产技术推广总站在省市有关部门的支持下,在余杭区、江干区等地开展了海水漠斑牙鲆苗种淡化驯育与养殖试验,获得成功,并取得了良好的生产和经济效益。现将试验情况小结如下:一、试验条件及方法     

鳗弧菌L-18株的限铁条件和铁调节外膜蛋白的免疫效果研究

利用Western-blot技术，对鳗弧菌L-18株的OMPs和IROMPs的免疫反应性进行了分析，并通过免疫牙鲆比较二者免疫保护力的差异，以期从IROMPs方向探索开发鳗弧菌新型鱼用疫苗，并为研究其免疫原理提供重要的科学依据。结果表明，培养基中加入不同浓度的联铁剂，鳗弧菌L-18株的生长和铁载体的表达出现规律性变化，其中加入100~130μmol·L-1 2,2’-联吡啶为最适合限铁条件，此时铁载体的表达量最高且生长受抑制程度较小。在此条件下，菌株表达出74.3ku和77.4ku的IROMPs，其中77.4ku蛋白具有免疫反应性，为重要抗原。用全菌灭活疫苗、OMPs、IROMPs分别腹腔注射免疫牙鲆7周后攻毒， IROMPs疫苗的相对免疫保护力达到75.9%，远高于OMPs疫苗的51.8%。相对于OMPs，IROMPs的抗体效价显著提高，接近全菌疫苗组的水平，而血清杀菌活力没有显著变化。 关键词：鳗弧菌；铁调节外膜蛋白；牙鲆     

牙鲆、大菱鲆噬纤维细菌病的诊断与防治

牙鲆、大菱鲆是深受养殖户和消费者喜爱的海水鱼类，也是形成“第四次海水养殖浪潮”的主要品种，其养殖面积和产量不断增长。但是由于水质污染、养殖技术、管理等原因，养殖病害逐年加重，特别是近几年来，牙鲆、大菱鲆受市场变动的影响，许多养殖户在养殖过程中盲目降低成本，养殖模式粗糙，养殖工艺混乱，造成养殖中鱼体质下降，鱼病泛滥，给海水养殖业造成严重损失。