蓝靛果组培快繁技术研究

以蓝靛果(Lonicera caeruleaL.var.edulis Jurcz et Herd)带芽茎段为外植体进行组培快繁,考察了激素种类和浓度对外植体增殖及不定芽生根的影响.结果表明,适合外植体增殖的培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数达3.3,适合不定芽生根的培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA,生根率达72％.     

双去甲氧基姜黄素及其N-甲基吡唑衍生物对朱砂叶螨 生物活性和多种酶活性的影响

【目的】明确双去甲氧基姜黄素（bisdemethoxycurcumin,BDMC）及其N-甲基吡唑衍生物（N-methylpyrazolebisdemethoxycurcumin,N-MPBDMC）对朱砂叶螨（Tetranychus cinnabarinus Boisduval）的生物活性及其体内多种酶活性的影响,为进一步证实其作用机理提供依据。【方法】采用玻片浸渍法测定BDMC及N-MPBDMC对朱砂叶螨雌成螨的触杀毒力,观察两者对朱砂叶螨的致毒症状,并测定其对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶（AchE）、Ca2+-ATP酶（Ca2+-ATPase）、单胺氧化酶（MAO）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）和羧酸酯酶（CarE）活性的影响。【结果】N-MPBDMC对朱砂叶螨雌成螨的触杀活性优于先导化合物BDMC,其中处理72 h后,N-MPBDMC对朱砂叶螨的LC50为21.77 mg•L-1,其毒力是BDMC的10.03倍,与95%哒螨灵原药的毒力相当。BDMC和N-MPBDMC分别处理朱砂叶螨雌成螨后,中毒试螨表现出类似神经毒剂的致毒症状,螨体内GSTs和CarE活性均有不同程度上升,AchE、Ca2+-ATPase和MAO活性均有不同程度下降,其中AchE活性平均分别下降了16.77%和36.57%,Ca2+-ATPase活性平均分别下降了17.55%和17.45%,MAO活性平均分别下降了8.04%和14.19%,GSTs活性平均分别上升了17.13%和18.93%,CarE活性平均分别上升了26.78%和25.98%。【结论】BDMC和N-MPBDMC对朱砂叶螨的致死作用可能与其显著降低螨体内神经系统相关酶活性有关,具体的作用靶标还有待进一步确证。     

姜黄素异噁唑和吡唑衍生物的合成及杀螨活性

为了寻求和开发新的基于天然产物的杀螨剂,在明确姜黄素具有杀螨活性,且其结构中的双羰基并非杀螨活性关键基团的基础上,设计并合成了15个姜黄素异噁唑和吡唑衍生物,其结构均经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱分析确认。生物活性测定结果表明:几乎所有的目标化合物对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus和柑橘全爪螨Panonychus citri均表现出了比先导化合物姜黄素更优异的触杀活性,其中化合物 4和11 的活性最为突出。处理48 h后,化合物 4 对朱砂叶螨和柑橘全爪螨的LC50值分别为333.0和156.0 mg/L,其毒力是姜黄素的6.35和4.56倍, 11 的LC50值分别为478.4和144.7 mg/L,毒力是姜黄素的4.42和4.92倍;相应地处理72 h后, 4 的LC50值分别为115.0和84.9 mg/L,其毒力是姜黄素的5.02和1.43倍, 11 的LC50值分别为91.0和68.7 mg/L,毒力是姜黄素的6.35和1.77倍。化合物 4和11 可作为进一步开发研究的具有杀螨活性的候选化合物。     

鲤鱼白细胞介素10基因组DNA克隆及序列分析

为获得鲤鱼白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)全长基因组序列,本研究利用鲤鱼IL-10全长cDNA序列(GenBank登录号:JX524550),通过在两端非编码区设计引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组为模板,使用PCR方法成功获得鲤鱼IL-10全长基因组序列。鲤鱼IL-10基因组全长2176 bp,GenBank登录号为JX524551。将所获得的序列与其他物种IL-10基因组序列相比,结果发现都含有5个外显子,4个内含子,外显子在进化上相对保守,剪切位点都符合"gt......ag"规则;序列包含540 bp的开放阅读框,编码179个氨基酸,有2段典型的IL-10氨基酸信号基序。     

维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA的克隆及原核表达

本试验旨在利用大肠杆菌BL21（DE3）表达维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性。根据GenBank公布的序列设计1对引物,经PCR扩增获得flaA基因的完整开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-30a,转入大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导、表达和纯化。SDS-PAGE结果显示重组目的蛋白在大肠杆菌成功表达,约在38 ku处可见清晰的表达产物,诱导产物大小与理论值相符。经Western blotting检测,结果显示表达的重组蛋白可与特异性血清抗体和His-tag抗体发生免疫反应。因此,本试验成功表达了维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA,为进一步研究其生物学功能及免疫佐剂作用奠定了基础。     

8种杀虫剂对朱砂叶螨毒力及家蚕的急性毒性比较

采用叶碟喷雾法测定鱼藤酮、印栋素、苦参碱、苦皮藤素、藜芦碱、乙基多杀菌素、四氯虫酰胺、吡丙醚等8种常用杀虫剂对桑园朱砂叶螨成螨和螨卵的室内毒力,并以食下毒叶法检测对家蚕3龄起蚕的急性毒性。结果表明:印栋素、苦参碱、鱼藤酮、苦皮藤素、藜芦碱对朱砂叶螨成螨毒杀活性较高,半致死浓度(LC₅₀)分别为0.213、0.659、1.621、13.014、16.548 mg·L^-1;苦皮藤素、印栋素、藜芦碱、鱼藤酮和苦参碱对朱砂叶螨螨卵毒杀活性较高,LC₅₀值分别为0.254、3.497、13.564、21.936、35.030 mg·L^-1。3龄起蚕取食添加8种杀虫剂的桑叶48 h后,均出现吐液、拒食、体缩等中毒症状,除吡丙醚属于中等毒性外,其余杀虫剂对家蚕为高毒或剧毒。印栋素、苦参碱、鱼藤酮、苦皮藤素、藜芦碱等杀虫剂可以有效防控桑园朱砂叶螨成螨及螨卵,但在使用中应注意其对家蚕的安全性。     

蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用

摘要：本实验研究蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。采用药理免疫学方法制造免疫低下的动物模型,测定脾脏重量并计算脾脏指数;ELISA方法检测IgG,IgG1,IgG2b抗体水平;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应;ELISA方法检测细胞因子（IFN-γ、IL-4、IL-10）水平。测定结果表明,蟾酥注射液能够增强免疫低下小鼠脾脏指数,提高抗体水平;在ConA或者LPS刺激下提高脾细胞增殖率,促进淋巴细胞分泌细胞因子,说明蟾酥注射液在一定剂量下能够缓解氟苯尼考引起的免疫抑制。     

酸樱桃组织培养中试管苗玻璃化的发生与防止

通过在MS培养基中加入不同浓度的蔗糖、琼脂、细胞分裂素(BA和KT)及不同温度下对酸樱桃进行组培研究,发现酸樱桃玻璃苗的数量随着糖分及琼脂浓度增加而减少．BA会提高玻璃化率,KT对玻璃化现象无影响,适当降低温度能有效降低试管苗玻璃化现象发生的频率。     

淡水鱼类主要细菌性传染病快速诊断的研究Ⅰ.SPA-CoA检测6株运动型气单胞菌

用富含Ａ蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准株（ＣｏｗａｎⅠ），分别标记６株淡水鱼病原性运动型气单胞菌高免血清，制备ＳＰＡ诊断液，建立了检测运动型气单胞菌的ＳＰＡ－ＣｏＡ。将待检病料经分离培养１６～１８ｈ后进行检测，３ｍｉｎ内可判定结果，比玻片凝集试验的敏感性高２５～５０倍；交叉和重复性试验表明，其特异性强，重复性好。ＳＰＡ－ＣｏＡ操作简便、快速，无需特殊仪器，适用于基层鱼场对淡水鱼类主要病原菌的快速鉴定和流行病学调查     

加强产业结构调整是治危兴林的有效途径

调整产业结构,是治理危机,振兴林业的根本出路。由于过量采伐,使资源锐减,导致林业企业陷于“两危”困境。产业结构调整,应注意以下几个问题:(1)森林是林业企业赖以生存和发展的基础,因此,应注意培育后备森林资源,(2)发挥科技优势,生产出更多的适合生产和生活需要的高质量产品,增加经济效益;(3)以林为主,多种经营并举,(4)治危兴林,需要政策扶持。