表达绿色荧光蛋白的MVA重组毒株的构建及筛选

为了构建及筛选表达绿色荧光蛋白（GFP）的改良型痘苗病毒安卡拉（MVA）重组毒株,并对其进行鉴定,本研究基于同源重组原理设计引物,通过PCR扩增获取含有MVA两侧同源臂的外源基因GFP片段,将GFP基因片段转染到感染了MVA的CEF细胞中使之同源重组到MVA ORF086-087位点（基因组中70303-70304 bp之间）,利用倒置荧光显微镜观察并标记表达GFP的单个噬斑,筛选获取重组毒株,应用倒置荧光技术、PCR及Western blotting对该重组毒株进行鉴定。结果显示,经过3轮噬斑筛选,在倒置荧光显微镜下可观察到大量表达GFP的单个噬斑,PCR扩增检测结果表明目的基因已成功整合到重组毒株MVA-GFP中。Western blotting结果表明,GFP在感染的细胞内成功表达。本研究利用基因工程技术成功获得表达GFP的重组毒株MVA-GFP,可为进一步将其他抗原基因插入GFP位点中筛选无标记的重组毒株及疫苗研究提供材料。     

“红宝玉”树莓引种试验

‘红宝玉’是1981年从美国引入的一个抗寒品种,它比东北地区原有栽培品种红树莓生长强旺,果实大,产量高,加工品质好,在长春试栽连年丰产,可以在气候相似地区推广。     

原核耐辐射微生物资源研究及其应用前景

耐辐射微生物因特殊的生命现象、生理机制成为科学界关注研究的热点,其中原核耐辐射微生物是研究最多的一类耐辐射微生物。本文从原核耐辐射微生物资源等方面对耐辐射微生物的研究进行综述,并讨论了其在环境工程、人类健康、生物技术乃至军事、地外空间等方面的潜在应用发展前景。     

黑穗醋栗‘寒丰’离体快繁影响因素研究

以黑穗醋栗‘寒丰’植株不同组织部位为外植体,研究分析了离体快繁过程中的一些影响因素.结果表明:‘寒丰’茎尖消毒时间以0.1％升汞(HgCl2)消毒7min,带腋芽的茎段9min 为宜,嫩茎以手摇消毒效果较好,其它辅助材料以0.1％升汞+2滴吐温消毒8 min效果较佳;‘寒丰’组培苗在MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.1mg/L+GA31.0～2.0 mg/L培养基上能分化出大量丛生芽,且长势较好.     

基于Biolog FF技术解析辐射对产黑色素短梗霉代谢活性的影响

【目的】分析辐射对短梗霉代谢活性的影响,研究真菌耐辐射机理机制。【方法】分离鉴定一株产黑色素短梗霉,并进行菌株的⁶⁰Co γ射线照射试验。根据菌株的耐辐射能力,设置⁶⁰Co γ射线0、2 500、5 000和10 000 Gy 4个辐射剂量,采用Biolog FF技术检测不同辐射下菌株对FF微平板中碳源的利用程度,分析辐射对产黑色素短梗霉代谢碳源活性的影响。【结果】不同辐射剂量下菌株AWCD值存在明显差异。随着辐射剂量的升高,细胞代谢活性明显下降,羧酸类和氨基酸的利用呈下降趋势,而碳水化合物的利用率呈上升趋势。随着辐射剂量增加,菌株对碳源的利用率发生了变化。在Biolog FF微平板95种碳源中,共有46个碳源被利用,其中7种碳源利用率随辐射剂量上升而增加。其中,D-核糖,蔗糖,D-阿拉伯糖,L-阿拉伯糖的利用率增加最为明显。【结论】辐射能明显降低产黑色素短梗霉的代谢活性,其在高剂量辐射下碳源利用类型会发生明显的改变,可能是该菌辐射应激和适应的一种有效机制。     

越橘VcANS基因的克隆及表达分析

【目的】从越橘果实中克隆花色素合成酶（ANS）基因cDNA,为研究越橘花色素苷合成的分子机制奠定基础。【方法】以越橘（Vaccinium spp.）品种“北陆”（V.corymbosum L.）为试材,并以Illumina测序文库（NCBI登录号：SRA046311）中差异表达的Unigene 38125片段为基础,利用cDNA末端快速扩增（RACE）技术获得花色素合成酶基因全长cDNA,利用DNAMAN和MEGA软件进行多序列比对和系统进化分析,探讨ANS基因在不同组织和器官中的相对表达量及其与对应花色素苷含量的关系。【结果】成功克隆了越橘花色素合成酶基因序列,命名为VcANS,GenBank登录号为JN654701。序列分析结果表明,VcANS全长1 424 bp,包含93 bp的5′非编码区、248 bp的3′非编码区和1个长度为1 083 bp编码360个氨基酸的开放阅读框,该基因编码的蛋白具有ANS家族普遍存在的2酮戊二酸和Fe²⁺依赖的氧化酶超家族的保守结构域。序列比对和系统进化分析表明,VcANS与杜鹃花科植物亲缘关系最近。在越橘果实发育的不同阶段,VcANS相对表达量的变化与花色素苷含量的变化趋势具有一致性。【结论】获得了越橘花色素合成酶基因全长,推测其对越橘花色素苷的形成起调控作用。     

黑穗醋栗新品种‘甜蜜’

 ‘甜蜜’是从波兰引进的黑穗醋栗试材中筛选出来的晚熟品种, 生长势强, 果穗长, 单果质量1.47 g, 可溶性固形物14% , 维生素C 1.6 g/kg FM。果实出汁率70%。风味酸甜, 鲜食口味佳。丰产性好。在长春地区7月中下旬成熟。     

醋栗优良品种——坠玉

 ‘坠玉’醋栗品种是从美国引进品种中筛选出的优良品种。该品种果实大, 品质好, 果梗较长, 采摘容易, 生长势强, 抗白粉病能力强, 对醋栗叶斑病感病极轻, 丰产稳产, 可在东北地区推广。