坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达

以牛源坏死梭杆菌FNn株为试材,根据GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出1 131 bp的坏死梭杆菌白细胞毒素BSBSE基因。将PCR产物插入pGEM-T Easy vector中,经双酶切鉴定正确后进行序列测定。分析表明该BSBSE序列与GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列的核苷酸同源性为99%,推导出的氨基酸序列同源性为98%。为研究BSBSE的免疫原性,构建了原核表达载体pMAL-p2X-BSBSE,用IPTG诱导在大肠杆菌中表达。结果表明,BSBSE基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为84.5×103,其中41.5×103为BS-BSE基因表达的蛋白质,43.0×103为MBP融合标签,Western-blotting检测表明该表达产物有免疫原性。     

电感耦合等离子体原子发射光谱法测定山药中人体必需元素含量

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)同时测定山药中的钾、镁、钙、钠、铜、锰、锌和铁等金属元素的含量。以硝酸-高氯酸为溶样试剂,采用传统湿法消解方法。结果表明:山药中金属元素含量丰富,金属元素在中药中可能起到一定的药理作用,用ICP-AES测定山药中微量元素以评价其药用价值具有重要的意义。     

SCM系统下的农业专家咨询系统设计

介绍了一种单片机农业种植专家咨询系统，它以配方施肥、盐碱地改良和微量元素与农作物生长关系等为设计基础，由知识库、数据库、推理机和接口组成，可以根据土壤养分的测试结果模拟农业专家的推理过程，实现对农作物施肥、盐碱地改良和种植作物种类等方面的咨询。     

氟啶菌酯、唤醒防治花生白绢病、根腐病等的田间效果试验

为验证氟啶菌酯悬浮剂、唤醒乳剂对花生白绢病、根腐病、叶斑病及果腐病的防治效果,特进行了田间防治试验.结果表明,氟啶菌酯对花生白绢病、根腐病、叶斑病、果腐病的平均防效分别为91.75％、83.22％、81.55％、94.84％,平均增产率16.45％;唤醒对花生白绢病、根腐病、叶斑病、果腐病的平均防效分别为91.75％、81.82％、80.25％、94.58％,平均增产率15.87％.说明2种药剂均表现出了显著的防病增产效果.     

坏死梭杆菌检测方法研究进展

坏死梭杆菌是一种严格厌氧的革兰阴性(G-)杆菌,可以依据坏死梭杆菌的菌体形态、菌落特征、生化试验、耐药性试验、酶特性试验等进行检测。根据坏死梭杆菌的16 S rRNA基因序列、16 S～23 SrRNA基因间序列以及rpoB基因序列,可以对其进行菌种水平上的鉴定;根据坏死梭杆菌的gyrB基因序列和白细胞毒素操纵子启动子区序列,可以对坏死梭杆菌进行亚种水平的鉴别。环介导的等温扩增(LAMP)技术的发展也为坏死杆菌病的快速诊断提供了检测方法。     

貉缺硒病的防治

貉缺硒病是由于饲喂缺硒的配合饲料或土壤含硒量少的地区所生产的饲料而引起的以骨骼肌及心肌组织发生变性和坏死、运动障碍和急性心脏机能紊乱为特征的一种代谢病,发病率和死亡率均很高,直接影响养貉户的经济效益,给养貉业的发展带来了很大的威胁.     

节瘤拟杆菌K-凝集试验方法的建立

根据节瘤拟杆菌(D.nodosus)特异的表面抗原———K抗原具有凝集反应的特性,建立了检测抗节瘤拟杆菌抗体的方法———K-凝集试验方法。节瘤拟杆菌液体培养物接种兔,制备节瘤拟杆菌阳性血清;福尔马林灭活肉汤培养物制备抗原,结果表明,该方法使用方便、特异性强。     

栽培小麦Brock中抗白粉病相关基因TaRPP13-1B的克隆及功能分析

白粉病是小麦生产中的主要病害之一,发掘抗病基因并实现抗病基因转育是提高作物抗病性的最经济有效的方法。本研究克隆了一个位于小麦染色体1B上、具有典型CC、NBS和LRR结构域的基因TaRPP13-1B。接种白粉菌后, TaRPP13-1B基因在抗病小麦Brock和BJ-1中表达量虽然出现上下调波动,但平均表达水平一直高于感病小麦品种京411。采用病毒诱导的基因沉默和转基因过表达技术进行功能分析,发现抑制目标基因表达,抗病小麦品种Brock对白粉菌的抗性显著降低;过表达TaRPP13-1B的转基因小麦津强5号对白粉菌抗性明显提高。说明TaRPP13-1B基因参与小麦抗白粉病的防御反应过程。该研究为小麦抗病品种的选育提供了有价值的备选基因。