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旨在分别构建NA蛋白和M2蛋白的重组质粒,并进行表达鉴定。采用PCR扩增了H9N2分离株A/chicken/Shandong/LY1/2017毒株的NA基因和M2基因。同源性分析证实,这2个基因序列与目前流行毒株的基因同源性很高。将NA基因克隆至pcold1原核表达载体,将M2基因克隆至pET28a原核表达载体,成功构建了pcold1-NA和pET28a-M2重组质粒,并成功表达出相应的融合蛋白。然后对表达的融合蛋白进行纯化,并采用免疫印迹验证其免疫反应性。本试验为进一步研究H9N2亚型禽流感病毒致病机制及检测技术奠定了基础。 相似文献
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为研究波形蛋白(vimentin)对H9N2亚型禽流感病毒(AIV)复制的影响,构建了真核表达载体FLAG-vimentin,并采用Western blot技术验证FLAG-vimentin重组载体和病毒NP蛋白的表达情况,用荧光定量PCR技术检测病毒HA基因水平。同时,设计合成siRNA,敲低内源性vimentin,检测其对病毒HA基因表达水平的影响。构建原核表达载pCold I-vimentin,蛋白纯化后孵育细胞,采用Western blot、荧光定量PCR技术检测病毒的蛋白表达和基因水平的变化。结果证实,H9N2亚型AIV感染FLAG-vimentin重组载体转染的Hela细胞12 h时,病毒NP蛋白表达减少;而在感染24和36 h时,病毒NP蛋白表达上升。荧光定量PCR结果亦显示,在AIV感染后12 h时,HA基因表达水平明显降低。siRNA敲低Hela细胞内源性vimentin后,H9N2亚型AIV的HA基因表达水平在病毒感染12 h时明显升高,24 h时差异较小,36 h时有所升高。纯化后的vimentin重组蛋白孵育细胞,在病毒感染36 h时,H9N2亚型AIV的NP蛋... 相似文献
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近年来,设施园艺在我国北方高寒地区得到了大面积的推广。但由于北方地区冬季极限温度过低,造成温室利用时间短,加温费用高,产品的质量、产量低。为解决高寒地区温室生产中存在的问题,辽宁省农科院花卉所根据北方地区理想晴天条件下温室内的太阳直射、散射、反射辐射理论,利用光学、材料学、环境与结构工程学、热力 相似文献
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冯秀丽 《农业科研经济管理》1996,(1):12-13
管理的起源、特征和发展辽宁省铁岭市农业科学研究所冯秀丽管理是一个过程,是让别人与自己一道去实践既定目标,是一切有组织的集体活动所不可缺少的要素。它有五个基本职能即计划、组织、人员配备、领导与指导、控制。一、管理的起源与发展管理活动自古有之,公元前两千... 相似文献