埃及伊蚊免疫应答相关基因mapk-like的dsRNA原核表达及其饲喂后表达水平的变化

mapk-like是一种信号转导相关促有丝分裂激活蛋白激酶家族基因,与线虫(Caenorhabditis elegans)中参与抵御Cry毒素的p38 MAPK含有类似的模序,其是否参与埃及伊蚊(Aedes aegypti)抵御苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)过程有待验证。为简便并大量获得RNAi验证所需的dsRNA,本研究利用RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌(Escherichia coli) HT115高效和廉价的优点,根据已测序的促有丝分裂激活蛋白激酶家族基因mapk-like基因序列,设计特异性引物,PCR扩增大小为361 bp的目的片段mapk-like (GenBank登录号：AAEL003728-RA),将其连接到克隆载体pMD18-T上,利用限制性内切酶XbaⅠ和XhoⅠ将其插入到原核表达载体pLitmus28i的2个T7启动子之间,成功构建可诱导形成目的双链RNA (dsRNA)的原核表达重组载体pLitmus28i-mapk-like,并转化大肠杆菌HT115,经IPTG诱导,1 mL菌液的dsRNA产量可达1.18μg,电泳检测条带清晰,质量良好。此外,利用壳聚糖包裹dsRNA形成纳米微粒,上清经电泳检测表明,壳聚糖的聚沉效率良好,纳米微球可有效防止dsRNA从饲料琼脂块中游离出来,提高dsRNA的稳定性。埃及伊蚊幼虫摄取mapk-like基因的dsRNA后,相对转录表达水平为65.55%,表达量明显下调,饲喂效果良好。研究结果将有利于进一步筛选获得相关抵御基因,为建立一个基于RNA沉默防治蚊媒病的研究体系提供了基础资料。     

铅锌矿尾矿坝分离节杆菌12-1对Pb~(2+)的耐受和吸附性能研究

当前铅资源的粗放式开采和使用对环境造成了严重的污染。利用微生物修复铅污染具有费用低、易操作、环境友好等优点,在水体和土壤铅污染治理中具有很好的应用前景。为了了解微生物对铅的吸附特性,本研究从铅锌矿尾矿坝分离到的一株耐铅节杆菌(Arthrobacter sp.)12-1(Gen Bank登录号:KM362724),并研究其对铅的吸附过程和作用机制。研究耐铅节杆菌12-1在含不同Pb2+浓度LB培养基中的生长情况表明,其最高可耐受800 mg/L Pb2+。在水溶液中,经24 h吸附,耐铅节杆菌12-1可将Pb2+浓度从105 mg/L降至2.17 mg/L,吸附率为97.93%。显微成像(原子力显微镜,扫描电镜)观察和能谱分析表明,耐铅节杆菌12-1吸附铅后在细胞表面形成含铅的矿物。傅立叶变换红外光谱(FT-IR)分析表明,耐铅节杆菌12-1细胞上的羧基、酰胺和磷酸基团可能参与了铅的吸附和固定过程。以上结果表明,从铅锌矿尾矿坝分离到的耐铅节杆菌12-1对铅具有较好的耐受和吸附能力,显示其在铅污染环境修复中具有潜在的应用前景。本研究为细菌修复铅污染环境的实践提供了理论基础。     

金线莲根部内生菌多样性宏基因组的分析

金线莲(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl)是中国传统中药,具有重要的药用价值,现代医学用来治疗糖尿病和癌症。金线莲作为兰科植物,与内生菌在长期的生长过程中建立起和谐的共生关系,内生菌产生多种次生代谢产物,帮助宿主植物抗菌防虫。现有实验条件下,环境中绝大多数的微生物不能培养,而宏基因组学是认识环境中不可培养微生物的重要手段。本研究对福建金线莲根部内生菌富集进行探索,提取混合内生菌样品宏基因组DNA,并对宏基因组DNA纯化,PCR扩增微生物16S r DNA片段,克隆至大肠杆菌(Escherichia coli)并测序。根据16S r DNA信息初步对富集的内生菌群落分析,内生菌主要是不可培养细菌(uncultured bacterium)、不可培养堆肥细菌(uncultured compost bacterium)、肠杆菌科(enterobacteriaceae)、类芽胞杆菌属(Paenibacillus sp.)、芽胞杆菌属(Bacillus sp.)和短芽胞杆菌属(Brevibacillus sp.)的微生物。本研究为挖掘金线莲内生菌资源提供基础资料。     

廉价培养细菌及其在含Cr(Ⅵ)和Ni(Ⅱ)电镀废水治理中的应用(英文)

为了降低细菌在处理重金属中的成本以及增加实际应用的可能性,本实验使用豆腐废水作为微生物的廉价培养基,并将培养好的微生物应用于实际电镀废水中铬、镍等重金属的去除。研究发现蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)和人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)在稀释的豆腐废水中就能很好的生长,表明豆腐水能够提供细菌生长的必需营养物质。此外,在添加了糖渣浸出液的豆腐废水且pH值为7.5时为细菌的最适宜生长条件。进一步的研究则表明在最佳条件下分别生长的蜡状芽胞杆菌和人苍白杆菌,对初始浓度分别为214和367 mg/L的含铬、镍的电镀废水均具有较好的去除效率,并且细菌的菌量越大去除效率越高,去除效率可以达到80%以上。对处理前后的蜡状芽胞杆菌进行显微成像观察(原子力显微镜、扫描电镜和透射电镜),结果发现电镀废水对细菌的形貌破坏较为严重,同时X-射线能谱分析(EDS)表明胞内和胞外都参与了铬和镍的固定。此外,傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared,FT-IR)的数据暗示着细菌的N-H和C=O等官能团在重金属的固定过程中发挥了重要的作用。本研究通过使用豆腐废水用于廉价培养细菌,为细菌治理含铬和含镍的废水提供了一种新的思路。     

甜菜夜蛾人工饲料研究

在室温26±1℃,相对湿度75％～80％的条件下,分别以3种人工饲料和天然饲料(空心菜叶)对甜菜夜蛾幼虫不同龄期进行饲养比较。结果表明,除1龄幼虫成活率偏低外,3种人工饲料对甜菜夜蛾的发育历期和发育状况与天然饲料基本相似。以黄豆粉为主成分配制的人工饲料饲喂甜菜夜蛾,其化蛹率、蛹重、产卵量和雌雄性比等均优于天然饲料,而且具有配制简便、成本低、不易霉变的特点。通过3代的继代繁殖表明,无论是人工饲料,还是天然饲料,其继代的幼虫成活率和产卵量等均明显下降。     

苏云金杆菌新菌株WB9 cry1基因型的PCR-RFLP分析

利用 PCR- RFLP技术对 Bt新菌株 WB9的 cry1基因型进行分析 ,结果表明该菌株含有 cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和 cry1Ga 5种 cry1基因型 ,且 cry1Ab的酶切产物不同于正常的 cry1Ab.采用特异引物对 G1/ G2扩增 ,也证明 WB9含有 cry1Ab基因 .在此基础上 ,再利用引物对 G1/ K3un2进行扩增 ,其产物经回收纯化后用 Eco R / Xba 双酶切分析 ,结果也表明 WB9所含的 cry1Ab与众不同 ,无大片段出现且有一条 4 0 0 - 5 0 0 bp的特异片段     

新型高效价苏云金芽胞杆菌制剂的研制

通过对苏云金芽胞杆菌发酵后处理工艺的改进，运用超滤及喷雾干燥技术获得新型高效价粉剂．室内生物测定结果表明，该粉剂的杀虫效果为目前工厂常规产品的１０倍左右．同时，以ＣＳ－１９９１（Ｈ３ａｂ）作为标准品，３龄小菜蛾为供试虫，对其进行了毒力效价测定，测定的高效价粉剂死亡机率值与质量浓度对数值的回归方程为ｙ＝３．９３＋１．２６ｘ（ｒ＝０．９８），ＬＣ５０＝６．９８ｍｇＬ－１，效价为４７６１９．０８ＩＵｍｇ－１     

福建昆虫病原微生物资源名录

1974～1986年,对福建省部分地区害虫病原微生物的种类、分布及蕴藏量进行了调查、分离鉴定,并参阅有关资料,整理成名录。这些病原微生物包括:真菌34种,细菌3种,病毒13种,线虫3种,原生动物1种。     

不同种类杀虫剂对甜菜夜蛾和小菜蛾的药效测定

应用微生物农药、抗生素类农药、昆虫生长调节剂及化学农药对南方蔬菜的主要害虫——甜菜夜蛾和小菜蛾进行了室内外的防治试验．结果筛选出多种农药对２种害虫有较好的防治效果．此外，它们之间的合理混配还有增效作用