日本沼虾过氧化物还原酶基因的克隆及其表达分析

利用cDNA末端快速克隆方法获得了青虾(Macrobrachium nipponense)的过氧化物还原酶基因(Prx)全长cDNA序列。该基因cDNA全长878 bp, 包括72 bp的5′末端非翻译区, 594 bp的开放阅读框(ORF), 212 bp的3′末端非翻译区, 开放阅读框编码198个氨基酸。氨基酸相似度比对显示, 所分离的青虾过氧化物还原酶基因包括两个半胱氨酸残基的区域“FYPLDFTFVCPTEI”和“GEVCPA”。系统进化树分析表明, 青虾过氧化物还原酶基因与南美白对虾(Litopenaeus vannamei)过氧化物还原酶聚在一起, 具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示, 过氧化物还原酶基因在青虾不同组织中均有表达, 其表达量由低到高依次为肠道、心脏、卵巢、肌肉、鳃、肝胰腺。使用荧光定量PCR检测青虾在低氧胁迫和复氧条件下肝胰腺中的过氧化物还原酶基因mRNA的时空表达情况, 结果显示, 与对照组相比, 实验组青虾过氧化物还原酶在肝胰腺和鳃组织中的表达量分别在低氧胁迫12~24 h 和复氧6 h出现了3次明显上调, 由此推测过氧化物还原酶基因参与低氧应激分子过程。本研究结果可为进一步了解青虾低氧应激分子机制提供参考。

     

应用SSR和SRAP标记构建青虾遗传连锁图谱

采用SSR和SRAP标记结合拟测交策略构建青虾(Macrobrachium nipponense)遗传连锁图谱。共有175个标记(含27个SSR、148个SRAP标记)分布在53个连锁群上。每个连锁群含2~8个标记,其中不少于3个标记的连锁群有35个,连锁对18个,平均每个连锁群的标记数为3.3个;连锁群长度在6.7~91.2 cM之间,相邻标记间最大间隔为49.0 cM,最小为1.4 cM,平均间隔为13.1 cM。青虾框架图谱长度为997.2 cM,图谱观察总长度为2 270.5cM,根据估算,青虾遗传连锁图谱预期长度为4 380.6 cM,图谱的覆盖率为51.83%。本研究构建了青虾遗传连锁图谱,该图谱也是淡水虾蟹类第一张遗传连锁图谱,可为青虾QTL定位、基因克隆、遗传选育等提供指导,并为进一步构建高密度的青虾遗传连锁图谱奠定了基础。     

水产动物重要经济性状相关联的微卫星标记研究进展

近年来,随着现代分子生物学及统计学分析方法的快速发展,水产动物重要经济性状相关性研究已成为当前分子育种研究的热点。本文重点介绍了近年来微卫星分子标记在水产动物几个主要经济性状相关性研究中的进展,讨论当前研究中存在的问题,并展望了水产动物经济性状相关微卫星标记的研究前景。     

杂种优势预测研究进展

杂种优势预测对于杂种优势的利用具有重要意义,然而传统的杂种优势预测方法由于要花费大量的人力、物力和财力,限制了杂种优势的进一步利用。几十年来,育种工作者从亲缘关系、生态类型、生理生化和数量遗传等不同方面,进行了大量的研究,提出了许多预测杂种优势的方法。通过概述有关杂种优势预测,及数量性状、同工酶、分子标记亲本间遗传距离和杂种优势关系的研究现状．对杂种优势预测的发展方向进行了展望。     

日本沼虾SRAP反应体系正交设计及优化

对影响SRAP反应的4个因素(Taq酶、dNTP、Mg2+、引物)4个水平进行正交组合,以建立日本沼虾的SRAP分子标记技术。试验分两步进行:第一步筛选出可有效扩增的引物组合;第二步对筛选出的体系进行优化。结果表明,日本沼虾SRAP反应体系适宜引物组合为Me4Em2,最适条件为在25μL的反应体系中,Mg2+、dNTP、Taq酶、引物浓度分别为2.5 mmol/L、0.25 mmol/L、0.64 U/20μL、0.6μmol/L。本研究结果为SRAP分子标记技术在日本沼虾中的应用奠定了基础。     

青虾新品种池塘混养技术

正青虾池塘混养技术包括青虾河蟹混养、青虾鱼类混养、青虾鱼种混养、青虾南美白对虾或罗氏沼虾混养等多种模式。青虾与河蟹生活习性、环境条件要求相近,为两者混养提供了条件,因此青虾河蟹混养取得了良好效果。经过多年的科学试验和生产实践,建立了以河蟹为主的青虾河蟹混养技术,在此基础上,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心又建立了以青虾为主的青虾河蟹混养模式,进一步推动了青虾河蟹混养技术的进步。     

青虾无公害养殖技术（四）

（2）青虾和罗氏沼虾等品种轮养：青虾生长期短，与许多养殖品种存在季节差异，同一池塘在一年中可与罗氏沼虾、南美白对虾、淡水白鲳、罗非鱼等轮养。温水性鱼类或虾类一般都在5月初开始放种，4月底前池塘空闲，可以利用青虾的价格差，即每年秋冬季青虾价格低、存节前后至4月底前青虾价格高而获取利润，     

人工诱导三倍体锦鲤繁育技术

本文采用温度休克法研究锦鲤的人工三倍体诱导技术,以培育大规格三倍体锦鲤。冷休克诱导温度为1-2℃,热休克诱导温度为41-42℃;受精卵的诱导起始时间分别为受精后第2、4、6min;冷休克持续时间为20min,热休克持续时间为1.5min。结果显示,受精后6min开始对受精卵进行冷、热两种休克处理均可获得较高的受精率、出苗率和较低的畸形苗率。通过流式细胞仪对血细胞DNA含量的测定表明,16.67%的个体其DNA含量为对照组的1.5倍左右,为三倍体;83.33%的个体其DNA含量为对照组的1.2-1.35倍,为三倍体在发育过程中染色体丢失产生的系列非整倍体。体长测定结果显示三倍体具有生长优势。     

运用RAPD技术鉴别建鲤雌核发育后代的研究

用紫外线灭活红鲫Carassius auratusvar. red精子,诱导建鲤Cyprinus carpiovar. jian进行人工雌核发育,共获得241尾雌核发育子一代鱼。经形态特征初步分类后,取10尾进行RAPD分析,以鉴别雌核发育鱼。用筛选的10种随机引物,均可扩增出建鲤和红鲫的特征条带。扩增结果发现:部分子一代仅出现建鲤特征条带,未发现红鲫特征条带,为雌核发育鱼;部分子一代既有建鲤特征条带,也出现红鲫特征条带,为鲤、鲫杂交鱼。本试验结果表明,采用RAPD技术可高效、准确地鉴别出异源精子诱导的雌核发育鱼。     

二种微生物制剂对青虾池水质和生长的影响

将二种微生物制剂施用于青虾养殖池,观察池塘水质的变化和对青虾规格及产量的影响,结果表明,施用微生物制剂后,池水的溶解氧、总磷增加,氨氮值下降,而COD、pH和总氮则没有明显变化和差异。试验池青虾的生长速度明显要大于对照池,说明微生物制剂可明显改善水环境,提高养殖青虾的产量和规格。