奶牛生物钟基因BMAL1真核表达载体的构建及生物信息学分析

本研究旨在克隆奶牛脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1基因（Brain and Muscle Arnt-Like Protein 1,BMAL1）的蛋白编码序列（Coding Sequence,CDS）并构建其真核表达载体,运用生物信息学方法解析其CDS序列和编码蛋白特性。以牛肝脏组织为材料,利用PCR技术扩增奶牛BMAL1基因中带有同源臂的CDS片段。采用同源重组法,将目的片段连接至酶切线性化的pc DNA3.1-Puro-N-3HA真核表达载体上,酶切及测序结果均符合预期的质粒命名为pc DNA3.1-3HA-c BMAL1。将空载与重组质粒分别转染至HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR技术（q PCR）和Western Blotting技术检验奶牛BMAL1基因的过表达效果,并利用生物信息学软件分析BMAL1基因CDS区及其编码蛋白的特性和功能。结果显示,pc DNA3.1-3HA-c BMAL1真核表达载体构建成功,将该质粒转染至HEK293T细胞后,成功实现了BMAL1在m RNA和蛋白水平的过表达;牛BAML1基因与绵羊、山羊同源性最高,BMAL1蛋白为不稳定蛋白,其上不存在...     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响

旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染...     

粳型光敏核不育系与常规粳稻杂交后代育性的遗传分析

在分析粳型光敏核不育系与粳稻品种杂交组合F_3及以后世代部分株系的育性和基因型的基础上,对分离世代各种主基因型的育性及频率分布进行了估计,验证了根据F_1、F_2和BF_1代作出的水稻光敏核不育性及其育性恢复的遗传涉及核内2对独立的主基因的遗传结论。由F_6以上高世代株系中测选出对农垦58s恢复效应有明显差异的两种纯合单显性可育株系,获得了存在两个不同恢复基因的遗传证据。     

杂交晚粳徒稻4号A×反五-2亩产千斤的主要栽培技术

徒稻4号A×反五-2是水稻杂种优势利用课题组于1979年选育的杂交晚粳新组合。1980-1982年在南方稻区(苏、皖、沪、湘、鄂五省市六个点) 单季杂交粳稻区试中,连续三年亩产量居供试组合的第一位,其中1980年亩产972.5斤比对照“鄂宜105”增产12.9%;1981年亩产854.7斤比对照“南粳34”增产22.9%;1982年亩产1037.8斤,     

我国农村养老方式转变研究

我国农村目前的养老方式主要是家庭养老,这种过于单一的养老方式面临着诸多的困难和问题。转变农村养老方式已成为十分迫切的任务,我国当前需要建立家庭、社区、社会共同发挥作用的新型农村养老方式。     

妇科腹腔镜手术围手术期的护理

目的探讨妇科腹腔镜手术围手术期优质护理的重要性。方法选取行腹腔镜手术患者随机分为观察组和对照组,对照组由轮班护士采用传统的常规护理,观察组在常规护理的基础上由责任护士针对患者的具体情况,提供优质的围术期护理,并做好围手术期的护理观察记录和总结。以两组患者的手术接受程度、陪护率、疼痛程度等为观察指标,比较组间差异。结果组间差异具有统计学意义(P<0.05),接受优质护理的观察组患者对手术的接受程度高,住院时间短,陪护率低,术后随访恢复良好,满意度高。结论腹腔镜围手术期优质护理对手术的成功和患者的康复起到至关重要的作用,患者的满意度明显提高,陪护率下降,具有明显的社会效益。     

冬季预防油菜冻害技术

<正>冬季,保苗是确保油菜增产增收的一个关键环节。为此,我们根据多年实践经验,总结出了几种预防冬季油菜冻害的方法,现将其介绍如下。     

地膜覆盖夺丰收

~~地膜覆盖夺丰收@靳效成~~     

奶牛慢性地方性氟病的调查研究

前言 某场滨洲奶牛群,牛只调入后经一年饲养,从1964年开始陆续出现关节肿大、瘸腿、爬窝(瘫痪),易骨折、十多年来,共有288头奶牛发生上述症状(每年平均有25—35头左右发病),严重影响奶牛业的发展。其病因久查不清,急待探明,以便防治。     

耕牛常见的齿病诊治

笔者经多年临床经验,牛的齿病较常见的为臼齿的磨灭不整、发生异常和齿槽骨膜炎。1齿病的共同症状咀嚼缓慢,不充分或过速(尤其是老年牛)常流涎,吐草,常有舌、颊部损伤。