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分别靶向猪流行性腹泻病毒(PEDV) M基因和猪圆环病毒4型(PCV4)ORF2基因,合成了2对特异性引物,建立了同时检测PEDV和PCV4的双重SYBR GreenⅠ荧光PCR检测方法。结果显示,PEDV和PCV4在一个反应体系中出现明显不同的熔解峰(Tm),PEDV的Tm值为84℃,PCV4的Tm值为79℃,而对其他常见的非靶标猪病毒没有显示特定的熔解峰,且对于PEDV和PCV4的最低检测极限分别为55.2,44.1拷贝/μL。利用本研究建立的双重荧光PCR方法对30份猪临床样品进行检测,结果显示,PEDV和PCV4的检出率分别为40%(12/30)和60%(18/30),PEDV和PCV4混合感染的检出率为33%(10/30),相较于常规PCR方法更加灵敏。该方法能够同时对PEDV和PCV4进行检测,极大地提高了检测效率和准确度,为PEDV和PCV4的诊断与防控提供技术支持。 相似文献
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为提高土壤有机质含量检测的工作效率,按照标准方法《土壤检测第6部分:土壤有机质的测定》(NY/T1121.6-2006)中实验步骤增加一种电热消解仪法。将数显恒温油浴锅加热法和电热消解仪加热法的加热方式进行比对。在微沸后计时5min后的两组不同编号的土壤标准物质样品有机质含量结果,不但在标准认定值范围之内,且结果平均值的绝对差值都是0.2g/kg,小于规定的允许绝对差值。实验表明电热消解仪加热法测定出的土壤有机质含量与油浴加热法测出的有机质含量并无显著差异。而电热消解仪加热方式能适应大批量土壤样品,节约时间,更好地提高农业土壤检测水平,进一步促进农业发展。 相似文献