猪流感病毒（A／swine／Jiangsu／2／2006（H3N2）NS1基因表达产物分析

采用RT—PCR方法克隆猪流感病毒H3N2亚型NS1全长基因,构建NS1基因原核表达质粒pET-28a—NS1和真核表达质粒p3XFLAG—CMV—NS1,在大肠杆菌和真核细胞内表达NS1基因,制备抗NS1多克隆抗体。用所制备的抗体分析p3xFLAG—CMV—NS1转染表达NS1蛋白和病毒感染细胞内的NS1蛋白。经终浓度为1mmol／L的IPTG诱导后,重组蛋白NS1在大肠杆菌中得到表达。表达蛋白纯化后免疫Wistar大鼠制备抗NS1蛋白多克隆抗体,Western—blot分析表明抗NS1多克隆抗体可以识别大肠杆菌表达的NS1蛋白、转染Veio细胞表达的NS1蛋白和病毒感染细胞内的NS1蛋白。间接免疫荧光发现NS1蛋白主要定位于细胞核。结果显示,本试验成功构建了NS1基因原核和真核表达系统,获得了NS1特异性多克隆抗体,分析了NS1细胞定位,为进一步研究NS1蛋白在病毒复制过程中的生物学功能和猪流感病毒的复制机理奠定基础。     

反思现行农民工医疗保险政策

现行的以“保大病”为重点的农民工医疗保险存在很多问题,参保情况不容乐观。本文在对现行的农民工医疗保险政策分析的基础上,认为农民工医疗保险的重点应是基本医疗保障,在“保基本”的基础上“保大病”,切实解决农民工最迫切的医疗需求。同时,要建立与城镇职工基本医疗保险的衔接机制,完善农民工医疗保险监察机制。     

纳米Al2O3粉及Al2O3基纳米晶复合陶瓷断裂韧性的研究

陶瓷材料具有高硬度，耐磨，耐腐蚀及耐高温等特点，但其脆性问题始终困绕着人们，近年来的研究发现，当陶瓷材料的晶粒变得很细小时，其强度和断裂韧性均有很大程度提高。本文研究了纳米Ａｌ２Ｏ３粉的制备及民型，烧结，研究了用纳米粉Ａｌ２Ｏ３烧制成的纳米晶Ａｌ２Ｏ３基复合陶瓷的断裂韧性与其晶粒尺寸间的关系。     

玉米ZmPP6C基因的克隆及其响应光质和胁迫处理的表达模式分析

丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶6亚基(catalytic subunits of Ser/Thr protein phosphatase 6, PP6C)是PP6全酶的催化亚基。在模式植物拟南芥中的研究表明,PP6C参与生长素极性运输、脱落酸信号转导和光信号转导途径介导的开花调控。为了明确玉米丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶6亚基(ZmPP6C)的蛋白结构特征与同源蛋白间的进化关系,采用RT-PCR方法克隆了ZmPP6C的全长基因。序列分析表明,ZmPP6C开放阅读框为912个核苷酸,编码303个氨基酸残基,包含PP2A的催化亚基PP2Ac结构域;系统进化树分析表明,PP6C蛋白在进化上较为保守,并且与高粱的PP6C蛋白相似性更高。对玉米自交系B73的ZmPP6C基因进行器官特异性表达分析表明,其表达量在成株期叶片中最高,是根中的7.9倍;ZmPP6C能够响应不同光质处理,且受远红光和红光的影响较大;也能响应长日和短日处理,在长日条件下的光照和黑暗阶段各有一个明显的表达高峰,在短日条件下的光照和黑暗阶段分别有2个和3个表达峰值;同时,ZmPP6C还响应高渗透、盐渍和淹水等胁迫处理,出现明显的上调表达。结果表明,ZmPP6C在玉米光信号转导、开花诱导与胁迫应答中发挥重要作用,其分子与生化机制值得进一步探讨。     

甘蓝光敏色素B基因的克隆及在拟南芥中异源转基因的功能验证

目的】甘蓝（Brassica oleracea L.）是世界上最广泛种植的蔬菜作物之一,其种植已由春、秋两季种植转变为四季栽培,因此,研究甘蓝对光温的反应能力是品种改良的重要基础。光敏色素是植物最重要的一类光受体,主要响应远红光和红光的变化,其中,光敏色素B是红光的最主要受体,与光形态建成、避荫性以及生物产量等性状密切相关。克隆甘蓝的光敏色素B基因（BoPHYB）,在拟南芥中验证异源基因BoPHYB在光形态建成和避荫性反应中的作用,丰富植物光敏色素基因功能研究,评价光敏色素在甘蓝品种改良中应用的潜在价值。【方法】利用RT-PCR的方法克隆、测序验证得到甘蓝自交不亲和系12C的BoPHYB编码区cDNA序列;利用生物信息学软件分析其编码的氨基酸序列及结构域,并与其他植物的光敏色素B进行序列比对,分析它们之间的同源关系;构建其35S启动子驱动的植物表达载体pJIM19-Myc-BoPHYB,通过农杆菌介导法转化拟南芥野生型Col-0和phyB-9突变体,并获得纯合转基因株系;比较BoPHYB与拟南芥光敏色素B（AtPHYB-GFP）的转基因株系在不同光质下的下胚轴伸长和成株期的表型,验证其在光形态建成和避荫性反应中的作用。【结果】从甘蓝中克隆了BoPHYB的编码区cDNA序列,该基因编码区含有3 507个核苷酸,编码具有1 168个氨基酸残基、分子量为128.9 kD的蛋白质;与拟南芥和白菜的phyB结构域类似,BophyB包含1个GAF结构域、2个PAS结构域、1个HisKA结构域和1个HATPase_c结构域;氨基酸序列同源性分析发现,BophyB与拟南芥以及白菜的phyB同源性最高,与小麦、玉米、水稻等单子叶植物的同源性较低;与AtPHYB-GFP类似,在红光和白光下不但Myc-BoPHYB能互补phyB-9极端黄化的表型,而且转基因株系均表现为下胚轴加剧缩短;长日照和短日照下成株期转基因导致植株矮化、叶片深绿和叶柄缩短。【结论】克隆了甘蓝光敏色素B基因,甘蓝光敏色素B与拟南芥和白菜的光敏色素B具有相似的结构和功能,在红光和白光下促进幼苗的去黄化反应,在成株期显著抑制长日照和短日照下植株的避荫性反应。     

海利生物规模化猪场CPMA核心免疫工程介绍与应用

正1规模化猪场CPMA核心免疫工程介绍1.1规模化猪场CPMA核心免疫工程理念阐述规模化猪场疾病复杂多变,但猪场的防疫体系建设是有规律可循的。科学的免疫程序是重中之重,若免疫程序不合理或存在漏洞,则后患无穷,混合感染和继发感染让疾病复杂多变,单一疾病疫苗的接种已收效甚微,综合防疫才是关键,特别是核心疾病防控,同时免疫时机和免疫密度也非常重要。基     

高致病性猪蓝耳病与猪链球菌2型混合感染的诊断与防控

高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株引起的一种猪的高度接触性传染病,可造成母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状,具有发病急、传播快、发病率高和病程长等特点.夏秋季多发,隐性带毒猪和发病猪是该病的重要传染源.高致病性猪蓝耳病易引起猪群的免疫抑制,继发或混合感染其他病原.猪链球菌病是由多种不同群的链球菌引起的不同临诊类型的传染病的总称,根据其荚膜抗原(CPS)的不同,分为35种血清型,主要以血清2、7、9型居多,其中2型致病力最高.     

基于AMESim船式拖拉机悬挂液压系统分析与优化

管道压力损失广泛存在于液压系统中,严重影响其性能。为此,以船式拖拉机悬挂液压系统为研究对象,采用理论计算和AMESim软件仿真相结合方法分析其压力损失,发现管路压力损失占该系统总压力损失的20.5%。进一步对船式拖拉机悬挂液压系统进行优化设计,优化后其压力损失较之前下降了21.9%,执行机构响应速度较优化之前提高了68.8%,并通过实验验证该方法的有效性。该研究对提高船式拖拉机悬挂机构操作性能具有指导意义,可为液压系统仿真分析与优化设计提供一种思路。     

月饼过度包装厂家须买回

国家发改委、中宣部、商务部、工商总局、质检总局近日联合下发通知，要求各有关部门加强对月饼过度包装的整治。     

圆环疫苗单针和双针免疫方案选择及效益分析

<正>2013—2014年度,养殖业的市场持续低迷和深度亏损,给养猪户带来沉重的打击,部分养猪户濒临破产的边缘,大部分养猪户徘徊在坚持和放弃的纠结中,对行业的信心备受考验。目前养殖业规模化程度的日益提高和疫病防控水平的持续改善,在未来的3~5年养猪业将会进入微利的时代。同时,养猪人都清楚,要想顺利渡过难关,只有加强猪场的综合管理,提高生产成绩,降低养殖成本,即开源节流。其中,圆环病