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通过设计筛选引物和探针、优化反应浓度和退火温度,构建一种尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的微滴式数字PCR(dd PCR)检测方法,分析该方法的敏感性、特异性及重复性,并应用于临床样品检测。结果显示:当引物、探针浓度分别为0.9μmol·L-1、0.3μmol·L-1且退火温度为56.9℃时,建立的罗非鱼无乳链球菌dd PCR方法阴、阳性微滴分布界限明显,平均拷贝数高,有较高扩增反应效率;线性关系线良好(R2=0.997 3),最低检测限为2.56 copies·μL-1;与猪链球菌2型、鱼类海豚链球菌和其他5种常见的水生动物疫病病原体无交叉反应;重复变异系数为3.15%;临床样品检测结果与实时荧光PCR方法结果的符合率100%,与细菌分离鉴定方法结果符合率为94.12%。结果表明,建立的罗非鱼无乳链球菌dd PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可对罗非鱼无乳链球菌感染的临床样品进行定量检测,为尼罗罗非鱼无... 相似文献
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目前,规模化、集约化养羊已经成为保障农民增收和保障养殖业健康发展的重要支柱产业,但是在养殖过程中除了传染性疾病之外还有一些营养代谢病对羊群健康造成严重威胁,甚至致死,不利于羊养殖的发展。根据羊群常见的营养代谢性疾病提出诊断和防治要点,旨在为临床工作提供参考依据。 相似文献
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为学习、借鉴农机工业强省浙江省经验,更好地贯彻落实国务院《关于促进农业机械化和农机工业又好又快发展的意见》(以下简称"国务院《意见》")精神,11月26日~29日,省农业厅巡视员彭济民、省农机局局长王绍萍一行到浙江省考察、调研农机工业。 相似文献
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