毛白杨4-CL cDNA的克隆、表达及活性分析

从毛白杨(Populus tomentosa)木质化茎中提取总RNA,利用RT-PCR技术进行cDNA扩增,获得1条1 621 bp的片段。测序结果表明:该片段编码536个氨基酸组成的多肽,序列中包含所有已知4-CL蛋白的2个特征序列boxⅠ(SSGTTGLPKGV)和boxⅡ(GEICIRG)。将cDNA克隆到原核表达载体pET-32a( )中,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,4-CL基因在大肠杆菌BL21中获得表达,所表达融合蛋白的分子量约为70 ku。酶活性分析表明:该重组蛋白对底物PA、FA、CA均表现出催化活性,其偏爱性顺序为PA>FA>CA,对SA则没有活性。     

甘蓝型油菜异核型雄性不育系选育研究

用普通甘蓝型油菜(B.napus L.)中油821与埃塞俄比亚芥(B.carinata Braun)进行正反交,在对后代向甘蓝型方向选择的同时,中油821×埃塞俄比亚芥正交组合出现的不育株,广泛选择反交组合的可育株对其进行成对测交。根据测交后代的育性表现逐代选具有保持能力,遗传稳定的后代。进而医得性状一致,无育性分离的异核型雄性不育系及其相应的保持系。用不同的生态类型甘蓝型油菜品种或品系测交表明,在欧洲及亚洲类型的甘蓝型油菜中皆有它的恢复系。它的恢保关系与玻里马雄性不育系统具有显著差异。     

重迎茬大豆减产的原因及防治措施

东北三省及内蒙占地区是全国大豆种植面积最大的区域.常年种植面积在400万～500万hm2,大豆重迎茬现象十分严重,如黑龙江北部地区大豆重迎茬面积达80%以上.重迎茬大豆减产严重,一般减产10%～20%,严重地块减产30%以上,是妨碍大豆生产发展的重要因素.因此大力推广控制大豆重迎茬减产技术对大豆生产发展具有十分重要的意义.     

SRAP和SSR标记构建的甘蓝型油菜品种指纹图谱比较

利用SRAP ( sequence - related amp lified polymorphism)和SSR标记构建了甘蓝型油菜品种指纹图谱,并对 两种标记方法进行了比较。结果表明: (1)每对SRAP引物扩增出20. 36个条带,其中4. 44个是清晰、易于辩认的 多态性带;每对SSR引物扩增出3. 88个条带,均为多态性条带。(2)采用25对SRAP和SSR引物分别构建40个和 75个品种的特异指纹图谱, SRAP指纹中具有特异图谱的比例(82. 5%和50. 7% )高于SSR指纹图谱的结果( 60. 0%和44. 4% ) 。品种数越多具有特异指纹的品种越少。(3)运用引物组合法构建品种指纹图谱,大大地提高了指 纹图谱的特异性。25对SSR引物组合扩增97个多态性谱带,两个不同的品种具有相同谱带的概率只有6. 3108 × 10 - 30。组合指纹图谱比组合数码图谱更直观。与SRAP标记相比, SSR标记以其扩增谱带少、易于识别和统计而 更适合用于引物组合法构建品种指纹图谱。     

甘蓝型油菜NCa细胞质雄性不育系统花药败育前期的基因差异表达

采用cDNA-AFLP技术研究了甘蓝型油菜NCa不育系、保持系和可育F1花药败育前期的基因差异表达谱。用224对引物对不育系、保持系及育性恢复F₁等3个材料的cDNA进行AFLP分析。回收、克隆可能与花药育性有关的差异条带,筛除假阳性,获得41条阳性差异条带（TDFs）;经测序、同源比对、功能预测,归并为35个非重复的TDFs。大多数TDFs在甘蓝型油菜中属首次报道。将已知功能的28个TDFs按其推测功能分为2大类10小类,82%的TDFs与细胞形态建成和降解、蛋白质合成、加工和转运、能量代谢、信号传导有关;基本涵盖花药发育相关的关键代谢过程。对其中7个TDFs基因进行了RT-PCR分析。结果表明,果胶甲酯酶基因和氨基酸通透酶基因都在不育系花蕾中大量表达,果胶甲酯酶基因在不育系叶片、保持系的花蕾、叶片中都没有检测到;而氨基酸通透酶基因有微量表达。驱动蛋白和乙醛脱氢酶主要在保持系花蕾中大量表达,而在不育系花蕾、叶片以及保持系叶片中都只有微量表达。玉米黄素环氧化酶（ZEP）和单脱氧抗坏血酸还原酶则在保持系花蕾、叶片和不育系叶片中大量表达,而在不育系花蕾中微量表达。花粉油体蛋白在不育系和保持系的花蕾中都有表达,不过保持系花蕾中的表达量约2倍于不育系花蕾;但是在两者的叶片组织中都没有检测到。本试验获得的差异表达基因对于了解油菜花药育性形成的调控机制提供了重要的分子信息。     

丹江口库区湿地植被对南水北调中线工程响应研究

丹江口水库是我国南水北调中线工程的水源地,维护其库区湿地生态系统的健康对调水工程具有非常重要的意义,而良好的植被条件则是湿地健康和功能完整性的必要基础.通过对丹江口库区湿地植被的全面调查,表明目前的库区湿地具有较为丰富的植物资源,分布着多种类型的湿地植物群落.丹江口水库大坝加高后,大部分的消涨带植被永久被淹没,并在更高海拔的区域形成新的消涨带湿地植被.进而,通过构建目前库区湿地植被与环境因子的CCA和逐步回归模型预测了新消涨带的潜在植被.结果表明,丹江口大坝加高蓄水后,在高坡度的湿地生境下,植被将由狗牙根(Cynodon dactylon)等偏旱生群落组成,物种多样性也较低;而在坡度平缓的区域,双穗雀稗(Paspalum paspaloides)等湿生群落将占优势,物种多样性也相对较高.     

试析大豆高产优质施肥研究与应用

大豆原产于我国，自古以来就有栽培，至今已经有5 000余年的种植历史，产居世界首位。然而从20世纪50年代开始，世界大豆的生产情势发展迅猛，我国的大豆产量屈居为世界第4位，人均产量远不及世界人平均产量的1/2，急需向外国进口，每年的大豆进口数量达1 000万t之上，我国的大豆种植业急需发展，优质施肥改善土壤的水肥条件这项关键技术可以在很大程度上促进大豆高产的生产及发展。文章意在概述大豆优质施肥的可行性、重要性和主要技术手段。     

甘蓝型油菜NCa雄性不育系选育及其在甘蓝型油菜中的恢保关系

 选用芸苔属细胞质类型不同的2个复合种甘蓝型油菜（B.napus L.P#-1）和埃塞俄比亚芥（B.carinata Braun P#-2）正反交。F#-3代开始，从反交组合（P#-2×P#-1，CaN）选甘蓝型可育株对正交组合（P#-1×P#-2，Nca）的不育株测交。以后反交组合逐代选甘蓝型且具有保持能力单株作父本对正交组合不育株连续成对回交。NCa经过6代回交，获得稳定的雄性不育系。CaN经连续11代选择成为稳定的保持系。细胞遗传学分析表明，不育系和保持系染色体数都为38条且核型一致，保持系减数分裂染色体配对正常，表明NCa雄性不育系遗传稳定。NCa雄性不育系恢保关系测定表明，在甘蓝型油菜中有较多的恢复系且在恢保关系上与波里马雄性不育系有很大差异，在波里马保持系和恢复系中都有NCa雄性不育系的恢复系。     

具双价基因的甘蓝型油菜游离小孢子的遗传转化

以双低(低芥酶和低硫甙)甘蓝型油菜(Brassica napus)游离小孢子为受体，通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导，将几丁质酶基因和β-1，3-葡聚糖酶基因导入杂交油菜新品种油杂4号亲本恢复系和保持系中，成功地获得了转基因植株。在小孢子数与根癌农杆菌数接近时，100-200mg／L羧苄青霉素能有效地抑制菌的生长，而不影响小孢子胚胎形成。用预培养2d的小孢子与根癌农杆菌共培养10h后离心，重新悬浮小孢子于含上述浓度的羧苄青霉素的NLN培养基中培养，获得了16株抗卡那霉素的恢复系的单倍体植株。经PCR及PCR-Southern blot检测，有10株呈阳性，证明外源基因已整合到油菜基因组中。     

现代生物技术在油菜育种中的应用及前景

从小孢子培养、基因工程、分子标记等方面综述现代生物技术在油菜育种中的应用现状及其应用前景。