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为了探究三方基序蛋白25(TRIM25)对脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)增殖的影响,在HEK-293T细胞上使用簇状规则间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除TRIM25基因,并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果,然后观察敲除细胞形态并利用试剂盒测定TRIM25缺失后细胞增殖速度的变化,确认敲除细胞与野生细胞无明显差异,用EMCV感染敲除细胞后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、病毒滴定测定和Western blot等方法测定病毒基因转录水平、蛋白表达情况。结果显示:感染EMCV后,敲除细胞与野生细胞相比,显著促进了病毒的转录水平、病毒蛋白的翻译水平和子代病毒的毒力(P<0.05)。综上,在HEK-293T细胞上,成功构建TRIM25缺失细胞系,且试验表明TRIM25的缺失有助于EMCV的复制。研究结果为后续TRIM25抗病毒机制研究提供了理论依据。 相似文献
32.
“金陵黛玉”是江苏省农科院蔬菜所近年选育的樱桃番茄新品种,属于无限生长类型,该品种中早熟,长势强,连续坐果性好。首花序节位7.6节;果实为椭圆形,果形指数1.16,成熟果为粉红色,果面棱沟轻;单果重20.9克,果实整齐度好;果实硬度强,耐贮运;果实综合品质好,可溶性固形物平均含量为7.1%。能够高抗TYLCV、ToMV病。2020年江苏德利尔现代农业集团有限公司引进该品种在宿迁地区进行温室长季节栽培试验示范,经过两年的栽培试验,平均每亩产1万千克以上,每亩效益近4万元,成效良好,现将该品种在宿迁地区温室长季节栽培技术总结如下。 相似文献
33.
正腹泻是较为常见的一种病症,且致死率也不高,但若未能及时发现与治疗,该病例将会继发新的疾病,诸如传染性胃肠炎、流行性腹泻以及猪痢疾等。而一旦出现继发病例,则猪的死亡率亦将大幅提升,继而导致养猪人蒙受巨大的经济损失。对此养猪人应对猪腹泻的防治格外重视。本文对宣城市宣州区规模化养猪场腹泻性疾病病因进行了调查与分析,报告如下。1对猪腹泻流行的调查2017年1~5月,宣城市宣州区的规模化养猪发生了22 相似文献
34.
介绍了一起雏鸭肉毒梭菌中毒症的发病情况、临床症状、病理变化、实验室诊断及类症鉴别过程,总结了其防治措施,以供参考。 相似文献
35.
为了获取影响大麦黄条点花叶病毒(BYSMV)在灰飞虱体内增殖、积累和传播的相关介体因子,本研究利用分离泛素酵母双杂交膜系统,以BYSMV核衣壳蛋白(N)为诱饵对灰飞虱cDNA文库进行了筛选。 将BYSMV N基因构建到诱饵载体pDHB1上进行表达检测和功能验证,结果表明重组载体pDHB1-N能在酵母内正常表达并行使功能。利用诱饵载体筛选pPR3-N空文库对文库筛选条件进行优化,确定3-氨基-1,2,4-三唑(3-AT)浓度为12 mmol·L-1的QDO平板为筛选文库培养基条件,去除可能存在的轻微筛库背景。在此筛选条件下以诱饵载体从灰飞虱cDNA文库中筛选得到57个阳性克隆,序列比对结果表明这些阳性克隆编码17种候选蛋白,包括表皮蛋白、泛素B、核糖体膜相关蛋白、细胞色素b5以及海藻糖转运蛋白等。 经酵母双杂交共转验证和β-半乳糖苷酶检测进一步确认了这17个候选蛋白与BYSMV N发生互作。本研究成功从灰飞虱分离泛素酵母双杂交膜系统cDNA文库筛选到与BYSMV N互作的蛋白质,为进一步探索弹状病毒与介体昆虫的分子互作机制奠定了基础。 相似文献
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37.
2003年8月中旬,宜州区部分乡镇大面积暴发了猪流行性感冒。发病区域猪的存栏数约为5万头,发病数约为4万头,发病率高达80%:猪(大部分是仔猪)死亡323头,死亡率为0.65%。由于宣州区畜牧兽医站及时采取了综合防治措施,9月上旬疫情基本得到了控制。 相似文献
38.
普洱茶对酒精性脂肪肝的预防作用研究 总被引:1,自引:1,他引:0
为探讨普洱茶(熟茶)对酒精性脂肪肝大鼠肝损伤的预防作用,将Wistar大鼠随机分为阴性照组、阳性对照组、KXL药物组以及普洱茶(低、中、高)剂量组。试验大鼠采用液体饲料饲喂,同时给予对应的受试物,60天后测定大鼠血清TG、TC、HDL-C、FFA、AST、ALT、INS水平及肝组织FFA、INS水平。与阳性对照组比较,普洱茶低、中、高剂量组血清TG、TC含量,低、中、高剂量组血清和肝组织INS水平,中、高剂量组血清及肝组织FFA含量,中、高剂量组大鼠血清AST、ALT活性均显著降低(P<0.05或P<0.01);普洱茶高剂量组血清HDL-C显著上升(P<0.05)。普洱茶能够有效预防酒精性脂肪肝的发生或发展。 相似文献
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大豆疫霉根腐病是大豆的毁灭性病害。为了深入了解大豆对疫霉菌的分子抗病机制,以大豆疫霉菌1号生理小种游动孢子接种抗性品种绥农10的根部及下胚轴,通过反转录差异显示技术分离到疫霉菌侵染0、0.5、1、2和4h后大豆下胚轴和茎部的差异表达基因,其中至少有8个基因与抗病相关。接种后0.5 h开始上调表达的有肉桂酸-4-羟化酶基因、ATP合成酶β亚基基因,以及类花生泛素结合酶基因;接种后1h和2h依次开始上调表达的有尿苷二磷酸-N-乙酰基-α-D-氨基半乳糖基因和豌豆蓝铜蛋白基因;接种后4 h才上调表达的有TGA型碱性亮氨酸拉链基因、大豆环孢素基因和14-3-3蛋白基因。这8个基因中有1个基因与信号传导有关、4个基因与抗病和防御有关、2个基因与转录调控有关、1个基因与能量代谢有关。研究表明,以上8个基因在疫霉菌游动孢子萌发、侵入大豆和在大豆体内扩展过程中起着重要作用。 相似文献
40.
灰飞虱Laodelphax striatellus的囊泡相关膜蛋白相关蛋白B(VAP-B)是内质网膜蛋白家族的蛋白,其主要参与调节囊泡运输、脂类的转运代谢以及未折叠蛋白应答等。本研究克隆了灰飞虱VAP-B基因,构建了pCold-SUMO-VAP-B原核表达载体,再将其转化大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE3),经过IPTG低温诱导表达得到了含有HIS和SUMO标签的VAP-B可溶性蛋白,经过Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后的蛋白再利用rTEV酶去除SUMO标签,得到无标签的VAP-B蛋白。通过免疫新西兰雄兔制备了VAP-B的多克隆抗体。Western blot检测结果表明该抗体可以特异性检测到灰飞虱的VAP-B蛋白;同时利用该抗体进行免疫荧光标记,发现其能特异性定位灰飞虱唾液腺内的VAP-B蛋白。研究结果表明制备的VAP-B抗体能够成功用于该蛋白的体内外检测,为阐明VAP-B在灰飞虱体内的关键作用奠定了基础。 相似文献