不同提取方法及上样量对牡丹试管苗茎基部蛋白双向电泳的影响

为建立一套适合于牡丹试管苗茎基部蛋白的双向电泳技术,以便更好地利用蛋白质组技术研究牡丹试管苗不定根的发生机理,本研究比较了三种不同蛋白质提取方法对双向电泳结果的影响,并在蛋白质上样量方面进行了比较。结果表明,乙酸铵/甲醇酚提取法所得2-DE图谱的蛋白点很少,仅检测到45个,且较模糊,有明显的拖尾现象,分辨率很低;乙醇/乙醚丙酮法所得的蛋白点也较少（101个）,较模糊,且横竖纹干扰较大;三氯乙酸/丙酮法所得蛋白点数较多,可检测到434个清晰的蛋白点,且形状规则,重复性好,适合后续分析,操作也较为简便。用三氯乙酸/丙酮法提取蛋白,采用800μg、1000μg和1200μg三个不同的上样量进行双向电泳,在上样量为1200μg时（IPGpH3～10,24cm）,蛋白质在12%SDS-PAGE胶上得到了较好的分离,在2-DE图谱上可分辨出562个蛋白点。因此,三氯乙酸/丙酮法是较适合于牡丹试管苗茎基部蛋白质提取的方法,1200μg是较为合适的上样量。     

授粉方式对牡丹和芍药远缘杂交受精前障碍的影响

【目的】探寻克服牡丹与芍药远缘杂交受精前障碍的授粉方式,为克服牡丹、芍药远缘杂交不亲和提供理论依据。【方法】以芍药品种粉玉奴(Paeonia lactiflora‘Fenyunu’)为母本,牡丹品种凤丹白(Paeonia ostii‘Fengdanbai’)、洛阳红(Paeonia suffruticos a‘Luoyanghong’)为父本分别进行远缘杂交,采用常规授粉、延迟授粉、重复授粉、切割柱头授粉和蒙导授粉5种不同授粉方法,对授粉后花粉萌发及花粉管伸长过程进行荧光显微观察,研究母本心皮形态学特征,统计杂交组合结实率。【结果】杂交组合粉玉奴×凤丹白、粉玉奴×洛阳红采用重复授粉、蒙导授粉、延迟授粉的效果均优于常规授粉,在花粉萌发量、花粉管伸长及单花结实率方面表现为延迟授粉重复授粉蒙导授粉常规授粉切割柱头授粉,说明延迟授粉对于克服受精前障碍效果最佳,为最佳授粉方式。切割柱头授粉虽效果不佳,但对克服受精前障碍有一定影响。【结论】在牡丹、芍药远缘杂交育种中,可以采取延迟授粉的方法,减缓甚至克服母本柱头或花柱对异源花粉萌发及花粉管生长的抑制,克服受精前障碍,提高育种效率。     

贮存条件对卵叶牡丹花粉寿命的影响

为确定卵叶牡丹花粉萌发力准确测定的适宜培养基及高效保存方法,解析花粉在不同温度贮存下花粉萌发率变化的生理机制。采用扫描电镜观察分析卵叶牡丹花粉表观特征,用离体培养法对卵叶牡丹花粉进行了4因素(蔗糖、硼酸、Ca(NO_3)_2、GA_3含量)3水平正交试验,并研究了不同贮存温度及时间对花粉萌发率、超氧化物歧化酶(SOD,Superoxide Dismutase)、过氧化物酶(POD,Peroxidase)、过氧化氢酶(CAT,Catalase)活性、丙二醛(MDA,Malondialdehyde)含量的影响。结果表明:卵叶牡丹花粉畸形、瘪粒率达19.50%,是卵叶牡丹新鲜花粉萌发率低的主要原因;影响卵叶牡丹花粉萌发的因子依次为:蔗糖,硼酸,Ca(NO_3)_2,GA_3;花粉萌发力检测的最适宜培养基为:110g/L蔗糖,45mg/L硼酸,55 mg/L GA_3,30 mg/L Ca(NO_3)_2;2、-20℃分别适宜1～6个月花粉的短期贮存,-80℃适合花粉1 a左右的中期贮存,-196℃适合花粉的长期保存;相关分析结果显示:花粉萌发率与3种保护酶活性呈显著正相关,与丙二醛含量呈显著负相关,3种保护酶活性对花粉萌发率的影响次序为:超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,过氧化物酶;不同贮存温度下,3种保护酶的敏感性不同,室温下,POD为敏感性保护酶;2、-20、-80℃下,SOD为敏感性保护酶;花粉丙二醛含量及3种保护酶活性基本稳定,氧化代谢保持平衡,是卵叶牡丹花粉在-196℃下贮存长久保持高萌发力的内因;保护酶活性降低、丙二醛含量升高,不能有效清除活性氧、自由基,生理代谢失衡是卵叶牡丹花粉在室温、2、-20℃下贮存寿命缩短的主要原因之一。     

昼夜温差对非洲菊试管苗生长的影响

以非洲菊‘瑞扣’试管苗为材料,研究不同昼夜温差(0℃、3℃、6℃、9℃、12℃)处理对其生长的影响。结果表明,0℃昼夜温差处理下试管苗株高、叶数、最大叶长、根数、最大根长、总鲜干重、地上部分鲜干重、地下部分鲜干重、叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量及根系活力均高于其他处理。昼夜温差9℃处理时试管苗的可溶性糖含量及干物率均优于其他处理,达到最大值。故在昼夜温差0℃处理时有利于促进非洲菊试管苗的形态生长、叶绿素合成及根部生长,在昼夜温差9℃处理时有利于试管苗的可溶性糖合成和干物质积累。     

切花月季萨曼沙组织培养微繁的研究

以切花月季萨曼沙为外植体，成功地建立了该品种无性繁殖系和高效的培养体系，在ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ和ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ培养基上芽的诱导率均在８０％以上；在１／２ＭＳ＋ＩＡＡ１ｍｇ／Ｌ、１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ及１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上，根的诱导率在８０％以上；生根试管苗经高湿度荫棚过渡锻炼后移栽成活率达９５％以上     

观赏植物病毒病害及病毒脱除研究现状与发展趋势

观赏植物在长期营养繁殖过程中经常受到各种病毒病害的侵染,严重影响了观赏植物的生长发育,造成经济价值和观赏价值大大降低,因此,观赏植物病毒病害的脱除技术受到世界各国的广泛关注。该文总结了观赏植物的常见病毒病害种类及常规脱毒方法,如热处理法、茎尖分生组织培养法、愈伤组织培养法、茎尖微体嫁接技术等,并展望了观赏植物脱毒技术的发展趋势。为进一步提高观赏植物的品质和观赏价值提供参考。     

观赏植物花药培养的主要影响因素

1964年很多国家开始了进行植物的花药培养,中国科技人员也在20世纪70年代开始了观赏植物的花药培养的研究。该文综述了影响观赏植物花药培养的主要因子,如供试植株的基因型、生理状况、花蕾预处理措施、花粉发育时期、培养基、培养条件,这些因素对观赏植物花药培养的影响;并探讨了当前花药培养存在的问题及其未来的发展方向。     

卡特兰叶片愈伤组织形成与MS培养基及生长调节物质浓度的关系

卡特兰叶片愈伤组织形成与ＭＳ培养基及生长调节物质浓度的关系何松林朱道圩任凝辉王献贾长法（河南农业大学园艺系，郑州４５０００２）（新郑市种子公司）卡特兰是世界上栽培最多，最受人们喜爱的洋兰之一。它花型优美，色彩艳丽，并且有特殊的芳香。一年四季都有不同的...     

H2O2对牡丹愈伤组织分化及抗氧化酶活性的影响

以凤丹白牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)继代愈伤组织为材料,研究不同外源H2O2浓度下牡丹愈伤组织生长过程中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,探究酶活性变化与牡丹愈伤组织生长、分化的关系。结果表明,在愈伤组织生长过程中,当H2O2浓度达到50μmol/L以上时,愈伤组织形态均出现了不同程度的变化;100μmol/L H2O2处理的SOD活性在第5天达到峰值,与其他处理呈显著差异,之后逐渐下降;POD和CAT活性变化基本一致,在第5天出现明显上升,之后下降,然后趋于平稳。从形态观察和3种抗氧化酶活性结果来看,100μmol/L H2O2对牡丹胚性愈伤组织的形成和体细胞胚的诱导有促进作用。     

实施综合改革工程 培养应用型卓越农林人才

培养解决实际生产和技术问题的农林高层次专门人才是当前农林经济发展的迫切需要,也是农业大学的时代使命。为此,河南农业大学近几年来高度重视卓越农林人才培养工作,出台"十二五"期间"卓越500计划"的发展规划,指导和保障农林人才培养的规范化、制度化和高质量化。通过构建农林人才培养综合改革工程体系,重点实施"卓越500计划",建立10个"卓越500计划"培养基地,扎实推进卓越农林人才培养工作。经过多年的改革和实践,学校完善了卓越农林人才培养方案,形成了系统、完整、具体、操作性强的人才培养的良好机制,培养了一大批卓越农林人才,取得了一批教学改革成果。