新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定

根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌（63／290）的OMP25的基因序列设计引物，用聚合酶链式反应（PcR）技术从新疆绵羊种布鲁氏菌（80／019）基因组DNA中扩增出OMP25基因片段，TtDNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上，将重组质粒转化到受体菌DH10B中，蓝白斑筛选阳性菌落，结果成功克隆OMP25基因片段，进行核苷酸序列测定，测序结果分析表明：新疆绵羊菌株与国际标准菌株有明显差异。     

优质晚稻新组合五丰优T025特征特性及栽培技术

五丰优T025系江西农业大学育成的达国标二级优质稻的晚杂组合,2008年通过江西省品种审定,在江西各地种植表现良好。文章介绍了其产量、特征特性及栽培技术要点。     

抗病丰产大豆新品种绥农25选育报告

绥农25是黑龙江省农科院绥化分院经有性杂交育成的大豆新品种。于2007年1月经黑龙江省农作物品种审定委员会审定推广。该品种抗病、丰产、节多荚密、通风透光性好、耐瘠薄、耐旱。蛋白质含量3892%,脂肪含量20.24%。生育日数116 d左右,需活动积温2 350℃左右。2006年生产试验平均产量2 666.6 kg/hm2,比对照品种合丰47增产16.1%。适应黑龙江省第二积温带广大地区种植,以及吉林省和内蒙古自治区相适应的积温区种植。适宜五月上旬播种,该品种垄作栽培适宜密度23万株/hm2,施种肥260 kg/hm2左右。     

CCL25/CCR9和CCL28/CCR10在仔猪胃肠道组织中的表达

【研究目的】旨在探讨CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在仔猪胃肠道中的表达规律。【方法】通过常规RT-PCR检测CCL25/CCR9、CCL28/CCR10分别在15日龄和30日龄仔猪胃肠道不同部位的表达。【结果】 CCL25 mRNA主要在小肠表达,而CCR9 mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,且表达量较高;CCL28 mRNA和CCR10 mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,并以后段肠道的表达量较高。CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在30日龄仔猪胃肠道中的表达高于15日龄仔猪。【结论】初步得出CCL25/CCR9、CCL28/CCR10 在仔猪胃肠道中的表达规律,并为进一步揭示在其它组织中的表达及它们的生物学作用奠定了基础。     

阿克泰等杀虫剂对棉蚜和瓢虫的毒力测定

在室内分别测定了阿克泰、赛丹和功夫3种杀虫剂对棉蚜Aphis gossypii(Glover)、十一星瓢虫Coccinella undecimpanctata(Linnaceus)和多异瓢虫Hippodamia variegate(Goeze)的毒力;比较了药剂在两种瓢虫和棉蚜间的选择毒力比(STR),以及两种药剂之间选择性差异。结果表明:阿克泰对棉蚜的毒力较高,LC50为6.5426mg/L,阿克泰在十一星瓢虫和棉蚜之间、多异瓢虫和棉蚜之间的选择毒力比(STR)值分别是154.28和105.98,表现出显著的毒力选择性。而功夫STR值均较小(4.39～4.69),表明对两种瓢虫有较低的选择性。由此证明,阿克泰不仅对棉蚜毒力高,对两种天敌瓢虫杀伤力较小,具有较高的安全性。     

粤糖系列甘蔗品种对25%敌草隆的敏感性差异

为探讨粤糖系列甘蔗品种对除草剂25%敌草隆应用的安全性,通过盆栽试验测定了3个粤糖系列常栽甘蔗品种及新台糖22号对25%敌草隆的敏感性。结果显示,总生物量更能表现出不同甘蔗品种对敌草隆不同剂量、不同喷施期的敏感性差异;通过总生物量的测定,YT00/236对敌草隆较敏感,ROC22较耐药,YT93/159、YT55对敌草隆的敏感性介于其中;在4800 g a.i/hm2剂量处理下,YT00/236与ROC22敏感性差异极显著,YT93/159、YT55虽有差异但不明显,表明甘蔗对敌草隆的敏感性与品种有关,从某品种的敏感性不能推断该品系所有品种的敏感性都是高或低。因此要明确甘蔗品种对敌草隆的敏感性,必须进行喷药时期、喷药量的试验测定。     

Construction of KHV‐CJ ORF25 DNA vaccine and immune challenge test

KHV ORF25 fragments were cloned from Koi Herpes Virus‐CJ (KHV‐CJ) strains isolated in our laboratory. The amplified products were inserted into the eukaryotic expression vector pIRES‐neo, forming recombinant plasmid pIRES‐ORF25. The recombinant plasmid pIRES‐ORF25 at 1 μg per koi, 10 μg per koi and 50 μg per koi was intramuscularly injected into healthy kois, respectively. The results showed that the recombinant pIRES‐ORF25 could induce the production of specific antibodies in koi determined by indirect ELISA. The differences of immune effect between three doses were not significant (P > 0.05), but all of them could induce the production of neutralizing antibodies. The immune challenge test showed that the mortality of koi injected with PBS, blank pIRES‐neo vector and nothing was 90%, 92.5% and 85% at 25 days. While the mortalities of koi injected with eukaryotic expression plasmid pIRES‐ORF25 were 20%, 17.5% and 12.5%. Differences in comparison with the control group were highly significant (P < 0.01). Histopathological staining revealed that the tissues of the immunized koi did not change apparently. In conclusion, the DNA vaccine pIRES‐ORF25 construct could well protect koi against KHV and had the potential to be applied in practice.     

布鲁氏菌omp25基因真核表达载体的构建与分析

摘 要: 【目的】 构建表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌并进行验证。 【方法】 对流产布鲁氏菌疫苗株S19外膜蛋白基因omp25设计特异引物进行PCR扩增,连接到pGM-T载体上,获得pGM-T-omp25,进行PCR扩增、酶切、测序鉴定。将质粒pGM-T-omp25与pGBKT7载体进行EcoRⅠ/SalⅠ双酶切,回收DNA片段,并进行连接,构建pGBKT7-omp25后,转化酿酒酵母菌Y187,并进行PCR鉴定、自激活实验和毒性检测。 【结果】 克隆了流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25,PCR、酶切、测序表明成功构建了pGBKT7-omp25真核表达载体,获得的转化子酵母Y187菌株无自激活活性,无毒性。 【结论】 成功构建了表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌,为揭示流产布鲁氏菌感染与母畜流产间的分子机制奠定基础。关键词：流产布鲁氏菌;基因omp25;酿酒酵母Y187;真核表达     

原花青素对Aβ25—35诱导PC12细胞氧化应激反应的保护作用

目的探讨原花青素对β-淀粉样肽25－35（Aβ25-35）诱导PCI2细胞凋亡及氧化应激反应的影响。方法3×10^8／LPCI2细胞培养24h,分别加入培养液（对照组）、10μmol／LAβ25-35（诱导组）、30mg/L原花青素＋10μmol／LAβ25－35（保护组）。24h后收集细胞,以Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡,比色分析测定MDA、H2O2含量和CAT活性。结果诱导组细胞可见凋亡特异性核固缩、核碎裂;MDA和H2O2含量与对照组比较明显增加（P〈0．01）,CAT活性明显降低（P〈0．05）。保护组与诱导组比较,凋亡特异性核固缩、核碎裂减少;MDA和H2O2含量明显降低（P〈0．01）,而CAT活性显著增强（P〈0．01）。结论原花青素可抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,可能与其抑制Aβ25-35引起的氧化应激反应有关。     

原花青素影响Aβ25-35诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的探讨原花青素（Proanthocyanidins,PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[β amyloid peptide-（25—35）,Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PCI2细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用血清饥饿培养使细胞同步于岛期,30mg／L的PAC预处理血清饥饿培养的PC12细胞,加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h,通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测细胞周期蛋白依赖性激酶4（Cyclin—dependent kinase-4,CDK4）、磷酸化的视网膜纤维母细胞瘤蛋白（phosphorylated Retinoblastoma protein,pRb）、腺病毒E2启动子结合因子1（Adenovirus E2 factor-1,E2 F1）、B细胞淋巴瘤／白血病关联X蛋白（B-cell lymphoma／leukemia-2 Associated X protein,bax）基因表达的变化。结果与Aβ25—35诱导组比较,CDK4、E2F1、bax mRNA表达和CDK4、pR6、Bax蛋白表达降低。结论PAC可能通过下调CDK4、pRb、E2F1的表达,从而降低bax的活化,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用的。