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不同光周期条件下日本牙鲆尾部神经分泌系统转录组分析 总被引:2,自引:1,他引:1
为发掘日本牙鲆响应光周期变化的重要功能基因,采用新一代高通量测序RNA-seq技术分析8L∶16D、12L∶12D和16L∶8D等3个光周期条件下日本牙鲆尾部神经分泌系统(caudal neurosecretory system,CNSS)的基因表达变化。转录组测序结果显示,3个样品分别产生了5 807 622、6 147 140和6 116 872个Clean reads。分别对8L∶16D、12L∶12D和16L∶8D条件下的文库进行两两比较,共获得200个差异表达基因。GO分类分析表明,差异表达基因属于生物学过程、细胞定位和分子功能的42个类别。KEGG Pathway显著性富集分析差异表达基因共涉及29条代谢途径,包括糖酵解/糖异生、钙离子信号转导、血管平滑肌收缩和光信号转导等通路。上述结果不仅加深了对鱼类尾部神经分泌系统功能的认识,也为进一步探索硬骨鱼类光信号转导机制提供了多方面多层次的信息。 相似文献
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利用 PCR-SSCP技术对高繁殖力绵羊品种湖羊雌激素受体(estrogen receptor,ESR)基因第一外显子的部分序列进行单核苷酸多态性研究。结果表明,湖羊ESR基因中存在 3 种基因型 AA,BB,AB,且A等位基因频率为0.554,B 等位基因频率为0.446。经测序,BB型与AA型相比在外显子 1 第 363 位发生 1 处C→G的碱基突变。据产羔数统计,AB 基因型和 BB 基因型的湖羊产羔数分别比 AA 基因型多0.98只(P<0.01)、1.47只(P<0.01)。说明ESR基因可能是控制湖羊多羔性能的一个主效基因或与之存在紧密遗传连锁的一个标记。 相似文献
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用不同浓度的促滤泡激素(FSH)和17α,20β-双羟孕酮分别作用于斑马鱼卵母细胞。结果表明,1 IU/mL的FSH和5 ng /mL的17α,20β-双羟孕酮对斑马鱼卵母细胞生发泡破裂都具有明显促进作用。其中17α,20β-双羟孕酮的作用效果较好,经过SDS-PDGE电泳和Western-Blot检测发现,5 ng/mL 17α,20β-双羟孕酮对斑马鱼卵母细胞诱导后,分裂原蛋白激酶被激活,生发泡破裂的卵母细胞数目增多。免疫组化检测证实,第Ⅰ期的卵母细胞中分裂原蛋白激酶没有激活,第Ⅱ期、第Ⅲ期细胞质中分裂原蛋白激酶开始激活,第Ⅴ期卵母细胞的胞质与核区同时存在活性的分裂原蛋白激酶,并伴有生发泡破裂。以上结果说明分裂原蛋白激酶在斑马鱼卵母细胞第一次减数分裂恢复过程中发挥重要作用,并且随着分裂原蛋白激酶激活,其活性部位从细胞质转移到细胞核。 相似文献
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尾部神经分泌系统(CNSS)是硬骨鱼类特有的神经分泌系统.其主要分泌物为促肾上腺皮质激素释放因子(CRH)尾紧张素Ⅰ和尾紧张素II(UⅠ、UⅡ)。选取平均体重为600 g的日本牙鲆(Paralichthys olivaceus),系统研究了日本牙鲆尾部神经分泌系统日节律的变化。荧光定量PCR分析表明,昼夜变化过程中,UⅠ和UⅡmRNA表达量没有显著变化;CRH mRNA表达量在6:00~12:00 显著升高袁12:00后降低。余弦法分析表明,CRH、UⅠ和UⅡmRNA表达峰值依次出现在12院:00、18:00、12:00。免疫组织化学染色结果显示,CNSS 分泌细胞要要Dahlgren细胞中CRH,UⅠ和UⅡ抗血清免疫反应阳性细胞总数目均无显著性差异,均无日节律现象。酶联免疫反应及放射免疫反应检测血浆中激素含量表明袁血浆中CRH、UⅠ和UⅡ、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(Cortisol)含量在光照-黑暗循环中均没有显著性差异,但UⅠ、UⅡ和ACTH 含量随昼夜交替呈先升高后降低的趋势。上述结果表明,日本牙鲆尾部神经分泌系统各基因存在转录振荡,有一定的日节律变化,激素分泌量亦随日周期发生改变。这证明CNSS在牙鲆适应环境变化过程中发挥重要调节作用。 相似文献
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摘要:为构建重组人红细胞生成素(hEPO)真核表达载体,应用PCR及人工合成方法获得除第一内含子的hEPO基因组基因,并将其插入载体pIRES2-AcGFP1,成功构建hEPO基因和AcGFP1共表达载体phEPO-IRES-AcGFP1,然后用脂质体法使该载体转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)及山羊成纤维细胞,于转染后48h在荧263光显微镜下观察到绿色荧光。经G418筛选,在荧光显微镜下发现成簇的绿色荧光细胞,说明重组质粒被成功导入细胞并表达AcGFP1,为鉴定hEPO转染成功与否及阳性细胞筛选提供了方便。 相似文献
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人促红细胞生成素(human erythropoietin,hEPO)是一种由肾脏分泌的酸性糖蛋白激素。它是一种红细胞造血刺激因子,在医学临床,主要用于治疗肾性贫血,对其它各种疾病和 相似文献
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