禽流感免疫预防风险评估

疫苗接种是当前预防和控制AI疫情的有效手段之一。由于影响AI免疫预防效果的因素众多,会给免疫预防带来风险。对这些风险因子进行识别,并分析其所引起的风险程度的高低,进而采取针对性的风险管理措施,能有效提高免疫预防的效果。本研究通过对免疫预防风险进行综合分析,得出结果:管理不良、接种操作不规范以及缺乏实验室跟踪监测等是免疫预防的高风险因素,并针对这些高风险因素,提出了相应的预防措施。     

不同pH值对鸡胚成纤维细胞培养的影响

利用不同的pH对鸡胚成纤维细胞进行培养,观察细胞在不同pH条件下的生长状况,研究不同pH对于细胞培养的影响。设置pH值为6.4、6.8、7.2、7.4、7.6和7.8的六个培养条件分别对鸡胚成纤维细胞进行培养,同时做重复对照,给每组中生长良好的细胞接毒,观察其接毒后在不同pH下的生长状况。通过观察可以看出细胞的耐酸性要强于耐碱性,而且鸡胚成纤维细胞在7.4～7.6的范围内生长情况最为良好和稳定。     

山西舍饲羊群羊痘病毒的分离和实验室诊断

为了分离舍饲羊群羊痘病毒并对其进行诊断研究,对山西舍饲羊群疑似羊痘发病羊的口唇痘状痴皮组织提取物进行细胞培养以扩增病毒,对病变细胞用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察,然后进行动物回归实验和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA).结果表明:扩增的病毒经连续培养3代后出现规律性细胞病变;用常规HE染色可见细胞中出现由于病毒感染产生的包涵体;动物回归实验表明已分离的病毒可导致动物发生痘性病变:用ELISA 检测出现显色反应,表明样品中存在与酶标抗体发生反应的病毒抗原,样品病毒浓度为6.835 IU·L-1.实验成功诊断并分离出山西舍饲羊群羊痘,为后续研究提供了理论基础.     

低碘对山西农村儿童智力影响的流行病学调查研究

碘缺乏病对脑组织和甲状腺功能有重要影响,为了有针对性地制定预防措施并提供流行性病学调查资料,用砷铈分光光度法对宁武县大寨村、头马营村、牛心会村和太谷县桃园堡村的儿童的尿样和该地区的水、饲料中碘含量进行测定,并采用国际瑞文智力测试题对当地8~13岁儿童的智力进行测试。发现宁武县大寨村、头马营村和牛心会村为缺碘地区。在这些缺碘地区,大寨村水碘、食碘以及儿童的尿碘的测定和儿童智力测定都属于最低水平,属于严重缺碘地区。可确定宁武县大寨村为低碘饲料的采集点。     

转基因大豆GTS40-3-2对子代雄性大鼠主要器官和生殖机能的影响研究

为探讨长期饲喂转基因大豆GTS40-3-2对雄性大鼠器官和生殖机能的影响,本研究将雌、雄大鼠随机分为2组,分别饲喂含转基因和非转基因大豆成分的饲料90 d后,亲代大鼠组内交配获得子代大鼠;子代雄性大鼠断乳后继续饲喂对应饲料30、60和90 d后,摘取子代大鼠睾丸、附睾、脑、心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏和肾上腺,检测脏器系数;选取睾丸、附睾、肾、肺制备石蜡切片,观察各器官的组织结构变化;运用实时荧光定量PCR检测睾丸雄性激素合成限制性蛋白葡萄糖转运蛋白8(GLUT8)基因的表达变化;用蛋白酶联免疫反应法进一步验证GLUT8蛋白含量。结果表明,与对照组相比,饲喂30、90 d后9种器官脏器系数均无显著差异(P>0.05);饲喂60 d后,仅肺、附睾脏器系数存在显著差异(P<0.05)。组织切片镜检结果显示,睾丸、附睾、肾、肺未发现明显结构改变;睾丸GLUT8基因转录水平和蛋白水平均未受到显著影响(P>0.05)。综上所述,转基因大豆GTS40-3-2饲料在试验周期内未对子代雄性大鼠各重要器官产生不良影响,对雄性大鼠生殖器官及其生理机能未显示毒性作用。本研究结果进一步拓展了转基因大豆安全评价研究深度,对转基因大豆的推广应用具有重要意义。     

转基因作物安全评价研究进展

转基因技术是现代生物技术的核心,转基因作物安全制约着转基因技术的发展和转基因生物产业化进程。文章围绕转基因作物的食用安全性,阐述了转基因作物安全评价常用方法,综述转基因生物安全评价现状,展望转基因作物安全评价趋势。     

一株H9N2型禽流感病毒全基因的序列分析

采用异硫氰酸胍法提取禽流感病毒分离株的SPF鸡胚尿囊毒RNA,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒A/chicken/Zhuhai/154/03(H9N2)的8个基因片段(HA,NA,M,NP,NS,PA,PB1,PB2)。然后将其克隆到线状克隆载体pGEM-Teasy vector后进行序列测定和拼接,并将克隆到的8个基因片段与其他禽流感病毒毒株(A/Chicken/Guangdong/SS/94,A/Swine/Hong Kong/9/98-MA,A/Chicken/Shanghai/F/98,A/Duck/Hong Kong/Y439/97,A/Quail/Hong Kong/G1/97,A/Chicken/Shanghai/4/01)各个基因的相应序列进行比较分析。结果表明:克隆到的A/chicken/Zhuhai/154/03(AZH154)株的8个基因片段均含有相应病毒基因的完整开放阅读框架:AZH154的各基因与A/Chicken/Guangdong/SS/94株相应各基因同源性最高(NS基因除外,同源性只有67.5%),与A/Chicken/Shanghai/4/01各基因同源性高于A/Swine/HongKong/9/98-MA,A/Duck/Hong Kong/Y439/97和A/Chicken/Shanghai/F/98各基因同源性。所克隆的基因为禽流感病毒HA基因芯片的研究奠定了基础,同时为诊断和预防禽流感(AI)提供了科学依据。     

应用小牛血清代替犊牛血清生产鸡痘细胞苗的研究试验

生产鸡痘细胞苗一直以来都是在细胞中加入适量犊牛血清的培养液进行培养．但是由于犊牛血清中广泛性的存在牛黏膜病的病毒抗体，给鸡痘细胞苗的生产带来了很大的困难。为了排除该病毒抗体的干扰，顺利而稳定地生产鸡痘细胞苗，因此笔者应用小牛血清代替犊牛血清生产鸡痘细胞苗的试验。最后测得两种细胞苗的效价基本相等．从而可以得出利用小牛血清代替犊牛血清生产鸡痘细胞苗是可行的。     

H9(N2)型禽流感病毒HA基因的克隆与序列分析

研究采用异硫氰酸胍法提取禽流感病毒分离株的SPF鸡胚尿囊毒RNA,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒(H9亚型)血凝素的cDNA。用UNIQ-10柱式DNA胶回收试剂盒回收纯化目的片段,后连接到线状克隆载体pGEM-T easy vector,转化JM109感受态细胞,在含氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆。经PCR扩增,进一步确证为目的片段,并对目的片段进行测序,结果获得3个毒株的HA基因全长。与已知序列进行同源性比较,同源性最高的都可达98％,表明这些分离株的亲缘关系较近;系统发育分析表明,这三个毒株均属欧亚种系;通过血凝素裂解位点的氨基酸序列分析可知,三分离株的HA切割位点上均为-PARSSR-GLF-。所克隆的基因为珠海地区禽流感病毒HA基因芯片的研究奠定了基础。     

转基因大豆的食用安全性研究进展

为了更深刻的了解转基因大豆的食用安全性,介绍了国内外转基因作物的发展和种植应用现状。从营养学、毒理学和过敏性三个方面归纳了转基因大豆食用安全性研究现状,提出了应秉着科学的态度,以实验研究为手段,用数据说话,以转化体为安全评价试验的个案,以品系为安全证书申请的个案,对转基因生物进行系统的安全评价,建议进一步加强食用转基因大豆营养积累、引入基因对代谢激素分泌及其对过敏性影响的研究。