小麦白粉病离体叶片法生物测定技术研究

小麦白粉病是由子囊菌亚门真菌小麦白粉病菌(Blumeria graminis)引起的一种世界性小麦病害.小麦白粉病菌无法在人工培养基上生长繁殖,基于植株的筛选方式难以适用于室内高通量筛选.试验通过分析小麦白粉病在室内植株上的发病特点,进行了离体叶片人工接种方法的探索,对影响小麦白粉病侵染的主要因素进行了研究,建立了基于离体叶片法和低压微量啧雾法的高通量筛选方法.利用该方法对2种抗真菌剂进行了室内生物测定试验,同时对480份放线菌液体摇瓶发酵提取物进行了杀菌活性筛选.结果表明,该方法能稳定、高效地进行先导化合物筛选.     

一种抗真菌抗生素的分离纯化及初步鉴定

从海南五指山采集的土样中分离到一株放线菌,编号为WS-23883,其发酵提取物对多种植物病原真菌具有很强的抑制活性。对其产物进行提取精制及制备液相纯化,获得了纯度达90%以上的化合物。生测表明,在20μg/mL浓度下该抗生素对多种植物病原真菌的抑制率达100%。根据活性产物紫外吸收光谱,可判断其为一多烯大环内酯类抗生素。质谱分析表明,活性化合物分子质量约667 u,据此判断其为一四烯大环内酯类抗生素。     

苏云金杆菌防治大豆孢囊线虫效果试验

大豆孢囊线虫是一类重要的植物病原线虫,给大豆生产造成巨大的损失。研究发现苏云金杆菌对线虫有毒杀活性,为防治大豆孢囊线虫寻找到了一条新途径。结果表明,苏云金杆菌对大豆孢囊线虫的防治效果优于常规化学农药,且增产效果显著。     

除草剂室内高通量筛选方法研究

以狗牙根为材料,对除草剂筛选的限制因素进行了研究。结果表明,水分流失和真菌污染是引起筛选结果不稳定的主要因素;运用多种规格的组织培养板和雾化补水可以控制水分流失对筛选的不利影响;添加抗真菌剂和对种子进行杀菌处理可以消除真菌污染对靶标的侵害和延长试验的可观察时间。进一步的筛选试验结果表明,运用以上方法能够稳定、高效地对不同来源的样品进行筛选。     

两种蜘蛛毒素肽与苏云金芽胞杆菌Cry1Ac蛋白的融合表达及杀虫活性

蜘蛛毒液中含有多种杀虫肽,因而具有较强的杀虫作用,可迅速杀死农林害虫。蜘蛛毒素肽（ω-ACTX-Hv1a,ω-ACTX-Hv2a）是从澳大利亚的多能厚爪蛛Hadronyche versuta的毒液中分离获得,对昆虫有毒但对哺乳动物无毒。本文通过将人工合成的两种蜘蛛肽基因（hv1a、hv2a）与来源于对棉铃虫具有高活性的苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）野生菌株NBIC380中的杀虫基因cry1Ac进行融合并在NBIC380中表达,获得了7种不同的重组菌株BtBM-Ve（含有空表达载体）、BtBM-Ac（含有cry1Ac基因）、BtBM-1a（含有hv1a基因）、BtBM-2a（含有hv2a基因）、BtA1a（含有cry1Ac+hv1a融合基因）、BtA2a（含有cry1Ac+hv2a融合基因）和BtA（1+2）a（含有cry1Ac+hv1a+hv2a融合基因）。重组菌分别进行了棉铃虫Helicoverpa armigera 2龄幼虫、秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans和朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的生物活性测定,结果显示BtBM-Ve无杀虫增效作用,BtBM-Ac、BtBM-1a、BtBM-2a、BtA1a、BtA2a和BtA（1+2）a针对不同的虫源具有不同的杀虫增效活性,对3种害虫杀虫增效最多的重组菌是BtA（1+2）a,对棉铃虫2龄幼虫杀虫增效百分比为93.43%,对秀丽隐杆线虫为34.48%,对朱砂叶螨为13.46%。本文构建的基因工程菌对防治鳞翅目害虫、螨虫和线虫具有重要的理论意义和应用前景。     

芽孢杆菌(Bacillus spp.)防治豇豆根腐病效果

采用生长抑制法,发现芽孢杆菌(Bacillus spp.)对豇豆根腐菌(Fusarium spp.)具有较好的抑制作用,其代谢产物对豇豆根腐菌的抑制中浓度(EC50)为24.4 mg/L。采用拌种法,测定了芽孢杆菌对豇豆根腐病的室内预防效果,其中以药种比100 mL∶1 kg的防效最高,为92.1%,与对照30%噁霉灵水剂防效相当。田间灌根试验结果显示,芽孢杆菌发酵液稀释50倍,对豇豆根腐病的防效达到74.9%,与对照30%噁霉灵水剂防效相当。     

新型生物杀螨剂NBIF-001防治金桔红蜘蛛田间药效试验

依据农药田间药效试验准则，测定新型生物杀螨剂NBIF-001对金桔红蜘蛛的田间防治效果。结果表明：NBIF-001 200亿可湿性粉剂能有效防治金桔红蜘蛛。剂型A在稀释250倍使用浓度下，施药一次后1、3、5、7、14和21 d对金桔红蜘蛛的防治效果分别为98.98%、94.88%、89.52%、85.36%、68.72%和74.61%。剂型B在稀释250倍使用浓度下，施药一次后1、3、5、7、14和21 d对金桔红蜘蛛的防治效果分别为99.60%，95.43%，90.88%、88.26%、72.39%和77.25%。化学杀螨剂对照20%阿维·螺螨酯悬浮剂在稀释3000倍使用浓度下，施药一次后1、3、5、7、14和21 d对金桔红蜘蛛的防治效果分别为68.42%、74.09%、65.82%、61.58%、62.64%和69.38。田间防治效果结果说明，新型生物杀螨剂NBIF-001防效高、药效快、持效期长，是防治金桔红蜘蛛的理想药剂。     

苏云金芽孢杆菌NBIN863菌株对番茄根结线虫的防治效果和促生作用

在温室条件下,研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)NBIN863菌株对番茄根结线虫的生物防治效果,对番茄植株的促生作用及在番茄根际周围的定殖能力。结果表明:NBIN863菌株对番茄根结线虫的温室防效达到54.48%;对番茄植株具有促生作用,株高、根长和全株鲜质量分别比空白对照增加49.10%、43.69%和52.50%;该菌株能稳定在番茄根际周围定殖,接种30d后,其定殖浓度为8.37×105cfu·g-1。     

放线菌WS-13661活性产物的快速鉴别

放线菌WS-13661的代谢产物对农业病原真菌具有很强的抑制活性.试验对其HPLC半制备组分进行生物测定,表明其活性部位在1 5～20 min;根据HPLC及UV图谱确定其活性成分为五烯类化合物,对其质谱数据进行分析确定了其分子离子峰,经数据库比对,确定其活性成分为钦氏菌素衍生物.