山豆根毛状根培养体系的建立与优化

为探索定向培养山豆根植物细胞及器官获取有效药用成分的新途径,为山豆根有效药用成分的大规模生产奠定基础,采用共培养法研究发根农杆菌R1601感染诱导山豆根无菌苗子叶产生毛状根,并在此基础上从不同培养液、不同蔗糖浓度和外源激素对毛状根生长的影响方面筛选山豆根毛状根生长的最佳培养液。结果表明:利用发根农杆菌R1601感染山豆根无菌苗子叶16min,在MS+AS 100μmol/L的固体培养基上培养可诱导产生毛状根,且诱导率最高,达66.67%;1/2 MS+IAA 0.5mg/L+5%蔗糖的培养液最有利于山豆根毛状根的生长。     

溶磷细菌对复垦土壤养分、酶活性及磷解析的影响

为了探索溶磷细菌在复垦土壤上对磷素的作用效果,采用室内摇瓶培养的方法,研究了磷细菌及其组合对磷酸三钙的溶解能力,确定了最佳组合磷细菌。拉恩式菌(W2)+荧光假单胞菌1(W3)+荧光假单胞菌2(W4)培养液的有效磷含量最高,为609.1mg/L,故最佳磷细菌组合为W2+W3+W4。将筛选出的最佳组合磷细菌在采煤塌陷地复垦土壤上进行玉米大田试验,研究其对土壤养分、酶活性、磷解析特性及玉米产量的影响。结果表明:磷细菌可以增加土壤养分含量和改善土壤酶活性;磷细菌处理土壤有效磷和速效钾含量,以及磷酸酶、蔗糖酶和脲酶活性分别比基质对照处理增加了2.80,25.43,7.41,4.21,7.15mg/kg;与空白处理相比,磷细菌处理土壤最大吸磷量和吸附常数降低幅度最大,分别显著减少114mg/kg和0.021(p0.05);磷细菌处理土壤平均解吸率为14.7%,显著高于其他处理;磷细菌处理玉米产量最高,为8 036kg/hm~2,显著高于其他处理。因此在复垦土壤上施用磷细菌,可以改善土壤磷素解析特性,有利于土壤快速培肥,对作物增产也有积极作用。     

山豆根四倍体优良株系的综合评价

【目的】分析山豆根四倍体株系与二倍体株系间的生长发育及其有效成分差异,为山豆根优良种质的选育提供理论依据。【方法】以10个四倍体株系和1个二倍体株系的3年生山豆根为材料,分别从农艺性状(株高、茎粗、叶面积和根干重等)、生理生化[可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性]、内源激素[脱落酸(ABA)、油菜素(BR)、赤霉素(GA)、茉莉酸甲酯(JA-ME)和玉米素(Z)]、苦参碱和氧化苦参碱含量等多角度检测及评价其生长与品质状态,并进行因子分析,综合评价出高产优质的山豆根株系。【结果】在山豆根四倍体株系中,A-66株系长势最好,其株高(208.60 cm)和根干重(138.59 g)均显著大于其他株系(P0.05,下同);苦参碱含量最高的是A-96株系(0.6639 mg/gDW),氧化苦参碱及其与苦参碱总含量最高的是D-37株系(30.6366和31.1986 mg/gDW)。山豆根四倍体药用有效成分中的苦参碱含量与其株高和茎粗呈正相关,而氧化苦参碱含量与其株高和茎粗呈负相关。根据因子分析结果可知,综合评分最高的为A-66株系(99.13分),其次是C-16(89.99分)、B-309(84.65分)和A-96株系(80.90分),其余株系的综合评分均未达80.00分,二倍体株系的综合评分最低(53.71分)。【结论】山豆根四倍体株系A-66、C-16、B-309和A-96的综合得分均高于80.00分,即其品质较优,可作为优良品种选育对象进行深入研究。     

药用植物草珊瑚AFLP反应体系的建立

从草珊瑚(Sarcandra glabra)的幼嫩叶片中提取基因组DNA,建立草珊瑚AFLP反应体系,对AFLP反应体系中模板DNA的浓度、基因组DNA的双酶切时间、预扩增产物的稀释倍数和引物组合的筛选等关键因素进行摸索.优化的草珊瑚AFLP反应体系为模板DNA的用量20 ng/μL、酶切反应时间4h、预扩增产物稀释15倍,初步筛选出8对较为适合草珊瑚AFLP分析的引物组合.     

姜种质资源离体保存技术研究

采用正交实验设计,研究了生长调节素、渗透压、温度等因素对姜种质资源离体保存的影响,以期建立姜种质资源离体保存技术体系,并通过生长恢复与遗传稳定性考察对保存材料进行初步评价.结果表明:生长调节剂、渗透压、温度等因素对姜种质资源的离体保存均有显著影响,最终确定姜离体保存的最佳保存方法为:MS+蔗糖60 g/L+琼脂4.0 g/L+甘露醇10 g/L+矮壮素(CCC)2.0 mg/L+多效唑(PP333)2.0 mg/L+脱落酸(ABA)2.0 mg/L,培养条件为光照时间14～16 h/d,光照强度1 500 lx,温度20℃,在此条件下保存300 d,存活率在50％以上,保存材料生长恢复情况良好,染色体保持稳定.     

珍稀濒危药用植物地枫皮离体保存研究

以地枫皮为试材,采用正交实验研究了无机盐、生长调节素、渗透压等对地枫皮离体保存的影响,建立地枫皮种质资源离体保存技术体系;并通过生长恢复的考察对保存材料进行初步评价。结果表明:无机盐、生长调节剂、渗透压等因素对地枫皮种质资源的离体保存均有显著影响,最终确定地枫皮常温离体保存的最佳保存方法为1/2MS+蔗糖50g/L+琼脂4.0g/L+甘露醇5g/L+矮壮素(CCC)1.0mg/L,培养条件为光照时间12~14h/d,培养温度25±2℃,光照强度2 000lx,在此条件下保存300d,存活率在50%以上,保存材料生长恢复情况良好。     

山豆根组培苗的质量分析

以山豆根组培生根苗为试材,采用TLC法鉴别其是否存在苦参碱和氧化苦参碱,并使用HPLC法测定其组培苗移栽前后苦参碱和氧化苦参碱的含量。结果表明:山豆根组培生根苗含有苦参碱和氧化苦参碱,且与氧化苦参碱和苦参碱对照品色谱相同的位置上,显示相同的橙红色斑点;HPLC定量分析结果表明,山豆根组培苗移栽田间4个月含有的苦参碱和氧化苦参碱均低于田间生长6个月的山豆根实生苗。     

剑叶龙血树疏松愈伤组织诱导技术研究

为了获取质地好且松散型的愈伤组织,为进行剑叶龙血树细胞悬浮培养提供材料.本试验以剑叶龙血树种子、芽为外植体,研究不同培养基、不同激素组合对剑叶龙血树愈伤组织诱导和质地的影响.结果表明:以MS为基本培养基,增加适当浓度的2,4-D和6-BA能促进剑叶龙血树愈伤组织诱导率的提高,长势良好,产生的疏松愈伤组织也最多,最佳疏松愈伤组织诱导培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+2,4-D1.5～2.0mg/L.     

植物生长调节素对西南凤尾蕨组织培养的影响

以西南凤尾蕨(Pteris wallichiana)的成熟孢子为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,研究了植物生长调节素对西南凤尾蕨离体组织培养的影响。结果表明,不同细胞分裂素和生长激素配比对西南凤尾蕨的组织培养影响不同,最适诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+AC 1.0 g/L,最高增殖倍数为7.05倍;最适生根壮苗培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根率达到90%以上。     

罗汉果研究综述

综述了罗汉果的生境、地理分布、主栽品种、繁殖技术、化学成分、药理作用和资源开发利用方面的研究成果.指出目前罗汉果研究中存在的不足,并提出挖掘良种资源,扩大罗汉果栽培面积;加强罗汉果抗病植株的筛选和罗汉果病害研究,培育抗病虫品种;运用多倍体育种技术开发甜苷含量和整果利用率高的多倍体无籽罗汉果新品种等建议.