绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因(ndhB)的克隆及同源性分析

克隆并分析绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基(NDHB)基因片段.根据GenBank上已发表的NDHB氨基酸序列,设计合成了一对简并引物,采用RT-PCR技术对绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因进行扩增,将扩增的PCR产物与pMD18-T连接后转化至E.coli JM109感受态细胞,检测阳性克隆,测序并进行序列分析.克隆的绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因cDNA序列长893bp,由288个氨基酸残基组成,命名为FvndhB.序列比对结果表明FvndhB与参考的8个物种的NDHB在核酸水平上表现出较高的同源性,其与桑树、银白杨、按树、烟草、拟南芥、银杏、台东苏铁、日本柳杉NDHB核苷酸序列同源性分别为84.32%、83.88%、83.43%、82.86%、82.18%、78.82%、77.07%、71.23%.利用DNAMAN软件构建的系统进化树显示绒毛白蜡与其他植物亲缘关系较远.成功获得了绒毛白蜡FvndhB基因片段,并对其进行了同源性分析,为进一步克隆绒毛白蜡FvndhB全长基因及分析其表达特性奠定了基础.     

白桦BpHO基因非生物胁迫及信号诱导的表达模式分析

血红素加氧酶(heme oxygenase, HO)是一种普遍存在的敏感的和高活性的血红素分解代谢过程中的限速酶。本文揭示了白桦BpHO在非生物胁迫及信号诱导调控的表达特征,为该基因在白桦中代谢调控功能的研究奠定基础。通过前期研究获得了白桦HO基因,命名为BpHO,应用生物信息学软件分析了白桦BpHO基因的分子结构特征,利用重金属镉(Cd)、盐(NaCl)以及4 ℃低温进行非生物胁迫处理,利用硝普钠(SNP)和水杨酸(SA)进行信号诱导,分析BpHO的表达特征。生物信息学分析表明该基因全长855 bp,含有完整的开放读码框,编码284个氨基酸(Genebank登录号:KJ197335)。BpHO为不稳定类疏水性蛋白,不存在信号肽,也不具有跨膜能力,α-螺旋、延伸链、无规则卷曲分布于整个蛋白。分子进化分析结果表明,白桦BpHO基因与葡萄的遗传距离较近,说明二者亲缘关系较近;与大豆、菜豆、豌豆的遗传距离较远,说明其亲缘关系较远。非生物胁迫结果表明,BpHO基因的表达水平随非生物胁迫处理时间的不同而上下波动,但在处理6 h后BpHO基因对4种非生物胁迫处理都上调表达,说明BpHO基因对非生物胁迫具有响应。信号诱导结果表明,外源NO调节了BpHO基因的转录表达,调控血红素加氧酶的合成。SA也参与了BpHO基因的信号调控。盐、低温、重金属镉胁迫均能促进BpHO 的表达,但响应模式不同。      

大庆盐碱地绿化树种的引进及适应性分析

[目的]研究了大庆地区盐碱地绿化树种的引进及适应性.[方法]该研究选择了30个绿化树种在大庆地区进行了引种试验,并于2005 ～ 2012年进行跟踪调查.[结果]稠李、刺玫、连翘、锥花绣球等绿化树种对于大庆地区的生态适应性较差,不能作为大庆地区的抗旱耐盐的绿化树种引进.卫茅、树锦鸡、糖槭、白榆、绒毛白蜡、枸杞、榆叶梅、银中杨等绿化树种移栽成活后能够适应当地的气候及土壤条件,并能正常生长发育,可以初步确定为大庆地区的绿化树种候选树种.在重度盐碱地进一步试验,卫茅、白榆、榆叶梅和枸杞在栽植2年后的生长状况良好,可作为大庆地区重度盐碱地的耐盐绿化树种.栽植于重度盐碱地中的部分树种,如四季丁香、树锦鸡、八宝玫瑰、紫丁香出现了负增长,主要是由于这些树种在移栽成活后不能适应当地环境,大部分苗木出现了主枝死亡后从根部萌发新枝的现象,也说明了这些树种不适于栽植在重度盐碱地的环境中.[结论]通过对大庆地区抗旱、耐盐绿化品种引进技术指标和良种进行评定,引进的绿化树种中属于第Ⅰ类型——引种成功的抗旱耐盐的绿化树种有6种,属于第Ⅱ类型——较抗旱耐盐的绿化树种有11种,属于第Ⅲ类型——较难成功的绿化树种有13种.