巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌Slt2类MAPK同源基因CMP1的克隆与序列分析

根据几种丝状真菌Slt2类MAPK的保守氨基酸序列设计简并引物,从巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌[Corynespora cassiicola(Berk.Curt.)Wei]中扩增出MAPK同源基因的部分片段,再利用染色体步移法延伸该片段的上、下游邻接序列,获得MAPK编码基因的全长序列,命名为CMP1(GenBank Accession No.GU321364)。序列分析表明,该基因含有5个外显子和4个内含子,编码417个氨基酸的多肽,推测分子量为47.5 ku,等电点为5.57。CMP1含有一个参与双重磷酸化作用的MAPK蛋白激活域(TEY),其氨基酸序列与丝状真菌的MAPK,AAslt2和MAP-kinase等高度同源。系统聚类结果显示,该基因与白菜黑斑病菌(Alternaria brassicicola)、细交链格孢菌(A.alternata)和玉米小斑病菌(Cochliobolus heterostrophus)的Slt2类MAPK基因具有较高的同源性。Southern杂交分析表明,CMP1基因在巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌基因组中以单拷贝形式存在。     

产几丁质酶香蕉枯萎病拮抗细菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了筛选出对香蕉枯萎病菌有拮抗作用的几丁质酶产生菌,以几丁质为唯一碳源进行几丁质酶产生菌筛选,然后通过平板对峙试验,从几丁质酶产生菌中筛选出1株香蕉枯萎病拮抗菌,通过形态特征和分子生物学分析,确定其为解淀粉芽孢杆菌并将其命名为DF.LB培养液测定的生长曲线显示24 h内该菌株生长达到稳定期;生物学特性数据显示该菌株在pH为5.15～8.94范围内生长良好,最佳pH为7.09;最佳碳源为甘露醇,最佳氮源为脲(尿素);拮抗试验可见病原菌菌丝发生膨大,凸起变形,原生质外漏造成菌丝中空干枯.     

橡胶棒孢霉落叶病菌rDNA-ITS区的PCR扩增与序列分析

橡胶棒孢霉落叶病是橡胶上的一种病害.该病侵染巴西橡胶树,造成天然橡胶大幅减产,已成为亚太和非洲许多成龄胶园的一种毁灭性病害.该病在我国橡胶树上尚无发生记录,为我国的进境植物检疫性病害.2006年在海南发现有该病零星分布,且发病面积有扩大的趋势.因此.加强对该病原菌的检测和防疫控制,阻止其进一步扩散和危害,是防止该病在我同爆发成灾的重要措施.本研究以从海南发病橡胶叶片分离的棒孢霉落叶病菌为研究对象,PCR扩增其ITS并进行序列分析,旨在为橡胶棒孢霉落叶病菌鉴别诊断、分子流行病学研究以及本病的防治等提供基本资料.     

香蕉细菌性枯萎病菌16S rDNA片段的克隆及序列分析

香蕉细菌性枯萎病是香蕉上的一种毁灭性维管束病害(Salanoubat et al．，2002)。美国、墨西哥、中南美洲、以及亚洲一些国家都有此病发生，目前我国尚无分布的报道，因此它是被我国列为禁止入境的二类危险性有害生物。我国入世后，香蕉的进口量呈明显上升趋势，而这种病原细菌在与我国有贸易关系的国家(如菲律宾等国家)中发生极为普遍，一旦这种病原细菌传入我国，将会给我国的香蕉种植业造成不可估量的损失。本     

海南香蕉枯萎病菌营养亲和群研究

从海南省各市县香蕉种植区采集发病的香蕉和粉蕉植株近地面茎段维管束病变的样本,经分离纯化获14个单孢菌株。经寄主致病性测定表明:粉蕉分离物皆为香蕉枯萎病菌1号生理小种,香蕉分离物则为4号生理小种。利用氯酸钾诱变这14个枯萎菌株共产生104个抗氯酸盐突变体,诱发获得67个nit突变株,其中nitl型58株,nitM型6株,nit3/nit8型3株。将获得的nit突变株做营养亲和性配对反应,可将14个菌株分为2个亲和群,其中VCG1包括7个菌株,且全为1号生理小种,VCG2则由7个4号小种菌株组成。     

巴西橡胶树棒孢霉落叶病病原菌的生物学特性

研究多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)的生物学特性,结果表明,菌丝生长的最适温度为28℃,最适pH为6～9,孢子萌发的最适温度为28～30℃。该菌能有效利用各种碳源和氮源,碳源以麦芽糖最好,氮源以蛋白胨最好。光照处理对菌丝生长速度影响不显著,交替光照有利于产孢。菌丝致死温度是60℃,15min;分生孢子的致死温度是55℃,5min。在PDA,PSA,Czapek等培养基上生长良好,但不能大量产孢,在保湿的卫生纸、玻璃片和橡胶离体叶片上,能大量产孢。