重组人gdnf在人乳腺肿瘤上皮细胞中表达的研究

为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),本研究构建了牛β-casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体,用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap-37细胞中,经G418抗性筛选8~10 d后,分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞,PCR鉴定转基因细胞,用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞,RT-PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明:重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建,转染Bcap-37细胞后,稳定整合到细胞染色体中,转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的GDNF,为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。     

σ-共核蛋白在帕金森疾病中的功能

介绍了σ-共核蛋白的来源、结构,分析了对帕金森疾病有关键作用的多巴胺合成方面的σ-共核蛋白的调节作用,并探讨了σ-共核蛋白如何发生聚集及发生聚集后可能会造成PD的发生,最后重点讨论了σ-共核蛋白引起PD的多巴胺能神经元变性的作用。     

纹状体内注射6-羟基多巴胺制备兔帕金森病模型

应用脑立体定位技术微量注射6-OHDA于兔右侧纹状体内。术后每周观察以阿扑吗啡（Apomorphin,APO）诱导的旋转行为,并于术后6周处死兔,以黑质酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）免疫组化染色,观察黑质多巴胺能神经元的形态、结构及数量变化。结果表明,部分兔在术后即出现行动迟缓、躬身、易激怒等异常行为。术后6周时,20只兔中有16只在阿扑吗啡诱导后30min内的平均旋转圈数大于7r/min,达到成功模型标准。模型成功率达到80%。TH免疫组化染色可见正常对照组、假手术组及模型组未损侧黑质内有胞浆浓染、突起明显的TH免疫反应阳性神经元分布,神经元数量较多,轴突长度较长,且3者差异不显著（P〉0.05）;而模型组损毁侧黑质内TH免疫反应阳性神经元与上述3者相比,数目明显减少（P〈0.05）,残存的细胞染色较浅,胞体轮廓和突起均不清晰,轴突长度明显变短（P〈0.05）。结果提示,将6-OHDA注射于兔单侧纹状体是一种制备帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型的有效方法,此法操作简便,动物死亡率低,模型制作成功率高。     

提早发现“沉默杀手”帕金森症

4月11日是“世界帕金森病日”．我国目前有200万帕金森患者．占到全球帕金森患者总人数的一半．并且近年来患病人数仍在不断上升．每年新增患者10万人．防治形势十分严峻．     

帕金森病患者直立性低血压发生率的调查及其护理干预

目的对帕金森病患者进行直立性低血压发生率调查及研究有效的护理干预措施。方法按照Thulesius法对帕金森病患者进行直立性低血压的诊断，对其中符合直立性低血压诊断标准的患者进行针对性的护理干预，观察干预前后患者的临床症状及血压变化。结果帕金森病患者直立性低血压发生率达52．1％（124／238）；年龄〈60岁、60-75岁、〉75岁者直立性低血压的发生率分别为40．0％（16／40）、48．6％（53／109）、61．8％（55／89），3者间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。82例接受护理干预4周后，头晕眼花等症状得到改善（P〈0．05），收缩压、舒张压的直立位和卧位差值明显缩小（P〈0．01）。结论老年帕金森病患者出现直立性低血压的可能性更大；为减少帕金森病患者发生的直立性低血压，护理干预措施是安全、有效的非药物的对症治疗方法。     

人参皂苷神经药理作用研究进展

人参皂苷是人参中主要的活性成分,具有多种功能,被认为具有治疗人类疾病的潜在价值,包括抗炎、抗癌、创伤愈合、心血管保护和神经保护。本文分析了人参皂苷对阿尔茨海默病、认知障碍、缺血性脑卒中、帕金森病和抑郁症等疾病的神经药理作用及其作用机制,以期为上述疾病的临床治疗提供参考。     

多巴胺对PC12细胞活性的影响及三七皂苷-Rg1的保护作用

采用细胞化学及生物化学方法研究了三七皂苷-Rg1时多巴胺引起的PC12细胞损伤的保护作用。结果表明：三七皂苷-Rg1对PCl2细胞损伤有明显的改善作用，可显著提高PC12细胞的增殖活性。同时降低培养上清中乳酸脱氢酶的释放量夏细胞内凋亡蛋白Bax的表达，这提示三七皂苷-Rg1对神经系统由于多巴胺氧化引起的损伤有明显的治疗和保护作用。     

帕金森病的治疗进展

帕金森病(Parkinsondisease,PD)是以中脑黑质多巴胺能神经元的变性与消失及纹状体中多巴胺(Dopamine,DA)水平降低的一种疾病,长期困扰着中老年人,虽然病因比较明确,但目前还没有一种特别的治疗方法或药物能彻底根治PD。本文就PD治疗以及神经营养因子的应用等方面作了简要的阐述。     

pEGFP-N1-MeCP2上调质粒的构建及意义

目的:构建MeCP2真核表达载体并在SH-SY5Y细胞中表达。方法:采用RT-PCR、pEGFP-N1-MeCP2质粒提取、Western blot检测pEGFP-N1-MeCP2在在SH-SY5Y细胞中的表达。结果:将重组质粒pEGFP-N1-MeCP2与pEGFP-N1空载体组分别转染至SH-SY5Y细胞中,48h后利用Western Blot检测表明,转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞在82kDa处可见一特异性的表达带,为MeCP2与GFP的融合蛋白,而在空载体组未见条带;在27KDa附近,空载体组可见条带,而转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞未见条带,提示pEGFP-N1-MeCP2载体能够在SH-SY5Y细胞中表达。结论:构建pEGFP-N1-MeCP2上调质粒是进一步研究MeCP2蛋白功能的基础,也是研究MeCP2蛋白在帕金森病中作用机制的关键。