军曹鱼池塘人工育苗技术的初步研究

在池塘进行军曹鱼Rachycentron canadum人工育苗研究,通过解剖消化肠道以确定仔鱼开口的生物饵料种类。结果显示,个体较大的桡足类无节幼体比轮虫更适合作为军曹鱼仔鱼的开口饵料;对体长和体重进行测定,军曹鱼在鱼塘进行人工育苗,鱼苗生长迅速,7日龄的仔鱼体长达1cm,30d的鱼苗可长至15cm。     

南海大眼金枪鱼和黄鳍金枪鱼的群体遗传结构

测定了南海西沙和南沙群岛附近海区(11～12°N,15°N;110～112°E)黄鳍金枪鱼61尾(17尾成鱼、44尾幼鱼)和大眼金枪鱼26尾(22尾成鱼、4尾幼鱼)的线粒体基因组控制区部分序列(D-loop),结合GenBank数据库中印度洋、太平洋和大西洋群体的同源数据,分析结果:(1)黄鳍金枪鱼与大眼金枪鱼均具极高的单倍型多样性(Hd>99%),聚类树及群体间分化指数(FST和Snn)表明大眼金枪鱼群体分化程度明显高于黄鳍金枪鱼群体;(2)大眼金枪鱼和黄鳍金枪鱼的南海群体与印度洋群体之间基因流最强(Nm=51.638和261.280 10),其次为太平洋群体(Nm=10.868 8和-50.801 81);(3)黄鳍金枪鱼和大眼金枪鱼都基本服从群口扩张模型,而mismatch分布分别呈单、双峰,其中大眼金枪鱼的南海群体扩张较晚(Tau=7.902)且最为明显(θ1/θ0=99 999/14.752)。     

鲈形目线粒体DNA蛋白编码基因的适用性分析

[目的]对线粒体DNA 13种蛋白质编码基因的系统进化分析能力进行了评估。[方法]单个基因和基因拼接序列比较,综合考虑序列的信息量和邻位连接法构建系统进化树的置信度。[结果]按分类阶元不同将基因都分成不同的4等。在鲈形目的科间阶元,最好的为ND6和cox2 好的序列为ND5和ND4 ND4L、ND3和ATP8差 包括Cyt b、cox1在内的其余6种基因为中等 在属内种间阶元,最好的为ATP6和cox2 好的序列为ND2和cox1 ND6、ND3和ATP8差 包括Cyt b在内的其余6种基因为中等。另外,分析揭示序列长度的增加可以提高系统进化树的置信度,且属内物种间比较时序列长度的影响小于高级阶元。[结论]线粒体DNA蛋白质编码基因的信息分布具不均一性,需分类阶元选择最佳基因和组合。     

红笛鲷（Lutjanus sanguineus）性腺发育初步研究

用组织学方法对1．5～2．5龄红笛鲷的性腺发育进行研究。结果表明：雌性红笛鲷GSI在3—5月处于较高水平,5月达到最高值（0．14％）,6-7月呈下降趋势,8月略有回升,而后一直处于较低水平;雄性红笛鲷GSI的周年变化趋势与雌性红笛鲷基本相似;雌雄红笛鲷HIS的周年变化趋势基本一致,即3月最高（雄性红笛鲷为1．73％,雌性红笛鲷为1．71％）;雌性红笛鲷除6-8月外,其GSI与HSI均呈负相关,而雄性红笛鲷在5～12月GSI与HSI呈正相关,其他月份呈负相关。另外还发现精巢中精原细胞与卵巢第Ⅱ、Ⅲ时相细胞的出现几率与雌雄红笛鲷的GSI周年变化一致。精巢的发育经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、精子整个发育过程,但结合解剖学特征总体判断,精巢仅发育到Ⅳ期早期;在雌鱼只观察到卵原细胞、第Ⅱ时相卵母细胞、第Ⅲ时相卵母细胞,结合解剖学特征判断卵巢只发育到Ⅱ期。     

管角螺生殖系统解剖学及组织学观察

解剖并观察了管角螺的生殖系统,采用组织切片技术,对其生殖腺发育及生殖细胞发生过程进行了研究。结果表明,管角螺为雌雄异体,雄性生殖系统主要由精巢、贮精囊、前列腺、输精管和阴茎构成,其中,精巢由生精小管和输精小管组成;根据生精小管内生殖细胞分布和间质细胞数量,精巢发育分为增殖期、生长期(精母细胞分裂期)、成熟与排放期、退化期等4个时期,根据细胞大小、形态及分布特征,精细胞的发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子4个阶段。卵巢结构为滤泡型,由滤泡壁和滤泡腔组成,内含嗜酸性颗粒。从卵巢内滤泡的大小、结构及滤泡内嗜酸性颗粒的数量,卵巢发育分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期;根据卵细胞的大小、形态及卵黄颗粒的含量,卵细胞发生过程分为增殖期、生长期和成熟期。管角螺生殖腺及生殖细胞的发育均不同步,为多次成熟、多次排放方式。     

笛鲷属线粒体基因组编码序列的系统进化分析能力评估

运用通用引物长距PCR(Long-PCR)和常规PCR相结合的方法测定了鲈形目笛鲷科的4种笛鲷属鱼类(孟加拉笛鲷、四带笛鲷、千年笛鲷和马拉巴笛鲷)和军曹鱼科的军曹鱼线粒体DNA基因组全序列(GenBank序列号分别为FJ171339,FJ416614,FJ824741,FJ824742 和NC_011219),得出所用全序列测定体系的方法通用性较强,操作简单。线粒体基因组的比对分析表明,测定的mtDNA基因组的绝大部分区段与GenBank中现有的脊椎动物的序列有较高的同源性。以军曹鱼外群结合GenBank中近缘笛鲷鱼类(勒氏笛鲷、蓝点笛鲷和黑带鳞鳍梅鲷)进行的聚类分析中,勒氏笛鲷与黑带鳞鳍梅鲷的聚类关系近于同属物种,与形态学分类存在矛盾。通过单个基因和基因拼接序列比较,综合考虑邻位连接法构建系统进化树的置信度和序列的信息量,对13种蛋白质编码基因在属内种间的系统进化分析能力进行了评估,将基因分成不同的4等:很好的为ATPase6和cox2;好的序列为ND2和cox1;差的为ND6、ND3和ATPase8;包括Cyt b在内的其余6种基因为中等。分析还揭示出序列长度的增加可以提高系统进化树的置信度,且属内物种间比较时序列长度的影响小于高级阶元。     

5种笛鲷属鱼类的遗传多样性及分子标记

运用RAPD及SSR技术对笛鲷属的画眉笛鲷(Lutjanus vitta)、金带笛鲷 (L. fulvus)、金焰笛鲷 (L. fulviflamma)、千年笛鲷(L. sebae)和星点笛鲷(L. stellatus)等5种鱼的遗传多样性及其分子标记进行了研究。RAPD研究结果表明, 5种鱼的平均多态性位点比率(P)依次为89.30%、86.70%、92.11%、86.47%和86.00%; 种内两个体间平均遗传距离(D)分别为0.3431，0.2130，0.3121, 0.1825和0.1775；平均遗传多样性指数(Hi)分别为0.1634、0.1095、0.1353、 0.1022和0.1024。引物OPA8和OPP10的扩增产物中得到9个RAPD标记，分别为OPA8-413bp、OPA8-140bp、OPP10-418bp、OPA8-697bp、OPP10-526bp、OPA8-361bp、OPP10-449bp、OPA8-311bp和OPP10-599b，可鉴别5种鱼。SSR研究结果显示, 5种鱼的有效等位基因数依次为1.9610、3.3793、3.2957、1.7893和3.6591；群体的杂合度(H)分别为0.332、0.462、0.593、0.367和0.676；多态信息含量(PIC)分别为0.302、0.438、0.554、0.332和0.641。 在11个微卫星位点上得到6个微卫星标记，分别为13 Prs229-115 bp、4 Lca43-212 bp、4 Lca43-240 bp、13 Prs229-288 bp、19 Prs275-156bp和7Lca91-118 bp可用于鉴别5种鱼。     

3个不同鸭种基因组DNA多态性的RAPD分析

RAPD（random amplified polymorphic DNA）即随机扩增多态性DNA技术是由Williamsc和Welsh发展起来的一项研究遗传物质本身的分子生物学技术，克服了从表型、染色体和蛋白质水平研究物种遗传多样性所固有的缺点，并具有相对简便、易操作、省时省力、无需设计引物和产物遗传多样性丰富等优点，已被广泛地应用于生物研究中。笔选取了3个鸭种，用RAPD技术研究其基因组DNA的多态性，目的在于深入了解其种质、亲缘关系及遗传多样性，为保护鸭种质资源和分析鸭配套品系的遗传多样性提供分子生物学方面的证据。     

番鸭随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术分析番鸭的遗传多样性,20个引物共扩增出164条带,分子量约在200 ～2 000 bp之间,番鸭20个个体间遗传距离为0．4572～0．0177,群体内个体间遗传相似度(F)为0．9823～0．5428,遗传多样性指效(Ho)平均为0．1639．结果表明番鸭DNA的同源性高,品种的纯度保持较好．     

青鳉DNA聚合酶β基因的电子克隆与分析

[目的]为了进行青鳉DNA聚合酶β基因的电子克隆与分析的试验。[方法]利用生物信息学手段克隆了青鳉DNA聚合酶β（OlPolβ）基因全长cDNA序列,并对其启动子和编码蛋白结构进行分析。[结果]该cDNA序列的全长1716by,编码含338个氨基酸残基的蛋白。OlPolβ具有14个外显子和13个内含子。OlPolβ启动子上发现了SP1等一些转录因子的潜在结合位点。[结论]OlPolβ蛋白序列与其他脊椎动物的蛋白序列具有高度一致性。