岭南道地药材青天葵的组织培养与植株再生

以青天葵新鲜球茎为试材,对离体条件下青天葵的愈伤组织诱导及其植株再生进行研究。结果表明:0.1%升汞溶液处理青天葵球茎10min、玻璃培养皿有利于青天葵愈伤组织的诱导;青天葵走茎及愈伤组织在MS+1.0mg/L 6-BA培养基中培养可得到大量丛生芽及愈伤组织,多次继代培养可得到完整植株;将青天葵走茎接种于含有0.1%活性炭的MS培养基中可获得大量组培球茎。     

大穗大粒型冬小麦高产育种的实践

大穗大粒型冬小麦高产育种的实践何瑞，崔应有，马超霞，朱宗贵，朱同相（枣庄市农业科学研究所２７７３００）（滕州市农技站）近十年来，我们在冬小麦高产育种中主要是选育大穗大粒类型，从１９７８年开始杂交到１９８９年选出稳定新品系止，历时１２年共分两阶段进行。...     

镰刀菌ISSR标记体系的建立及遗传多样性分析

 【目的】建立镰刀菌ISSR反应体系和进行镰刀菌的ISSR遗传多样性分析。【方法】利用ISSR-PCR技术,对影响PCR扩增效果的一些因素和ISSR引物进行筛选和优化,通过聚类分析图对镰刀菌遗传多态性进行研究。【结果】镰刀菌ISSR-PCR分析最适宜的反应条件是以UBC885为引物,在20 μl反应体系中,2.0 mmol?L-1 Mg2+,0.5 U Taq DNA聚合酶,0.2 mmol?L-1 dNTPs,0.4 μmol?L-1引物,30 ng的DNA模板,退火温度为52℃。通过对27株镰刀菌进行了ISSR的遗传多样性分析,选用的11个引物共扩增出79个DNA片段,其中多态性位点为65个,占总扩增片段的82.3%。依据扩增结果进行遗传相似性分析,构建了分子树状图。聚类分析结果表明,供试的27株镰刀菌的遗传相似系数在0.672～0.950,在0.67水平上,可分为3个类群,2个亚类群。【结论】建立了适合镰刀菌ISSR-PCR分析的反应体系;ISSR标记技术在镰刀菌种间和种内都表现出明显的遗传差异性,此技术可用于镰刀菌遗传多态性的分析研究。     

唐古特瑞香开花物候及繁育系统研究

针对药用植物唐古特瑞香(Daphne tangutica Maxim)野生植株花多果少、坐果率低的问题,以唐古特瑞香野生种群为试验对象,观察其开花物候、花器官形态变化、花粉活力、柱头可授性等特征,并结合花粉-胚珠比(P/O)、杂交指数(OCI)的测定,访花者行为观察,揭示其繁育系统类型及坐果率低的限制因素。结果表明：唐古特瑞香为两性花,顶生或腋生头状花序,花期5—6月,群体开花持续17～22 d,单花序花期8～11 d,单花花期7～9 d;雌蕊先于雄蕊成熟,单花待开时柱头可授性最强,盛开时花粉活力最强;P/O和OCI的判定以及访花者观察显示其以异交为主,部分自交亲和,多数需要如中华蜜蜂(Apis cerana)、三条熊蜂(Bombus trifasciatus)、灰熊蜂(Bombus grahami)等有效传粉者。柱头可授性与花粉活力的最强时期不遇,细长的花冠管需要有效传粉者授粉,盛花期散粉量不高,异交竞争力弱和自交亲和度低,以及有效访花昆虫的数量和种类少等因素可能是造成唐古特瑞香开花量大坐果率低的主要原因。本研究结果为今后规模化、优质化人工繁育唐古特瑞香及祖师麻药材产量提升提供理论依...     

青天葵甲羟戊酸激酶基因的编码蛋白预测和表达分析

甲羟戊酸途径(mevalonic acid, MVA)是植物三萜类化合物生物合成的主要途径，而甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase, MVK)是MVA途径中的关键限速酶之一。根据前期获得的青天葵[Nervilia fordii(Hance)Schltr.]转录组数据，采用生物信息学方法对青天葵MVK基因编码蛋白的理化特性、功能结构域、二级结构、信号肽、跨膜结构域等进行预测，并采用RPKM法分析该基因在青天葵球茎和叶片的表达量。结果表明，NfMVK基因编码含有383个氨基酸的稳定型亲水性、酸性蛋白质，与其他植物MVK蛋白同源性可达70％。NfMVK蛋白分子量为41.29 ku，含有甲羟戊酸激酶功能域，归属于GHMP_Kinase超级家族。该蛋白没有任何信号肽、转运肽和跨膜结构域，二级结构为混合型结构的蛋白质。NfMVK基因在青天葵中的表达趋势为：球茎>叶片。该结果可为后续利用MVK基因调控青天葵三萜类活性成分的合成提供理论依据。     

岗梅种苗质量分级标准研究

目的:研究岗梅种苗质量分级标准.方法:测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法.结果:确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种苗分为三级,其中一级种苗株高≥59 cm,根长≥22 cm,株径≥6.96 mm;二级种苗株高43～59 cm,根长18～22 cm,株径4.88～6.96 mm;三级种苗株高15.5～43 cm,根长10～18 cm,株径2.18～4.88 mm.结论:建立了适用于生产实践的岗梅种苗质量分级标准.     

青天葵叶片总RNA提取方法的比较研究

采用RNeasy Plant Mini Kit法、RNAiso Plus法、RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue法、CTAB法和SDS法,并结合4种抽提试剂组合,分别提取青天葵叶片总RNA.通过琼脂糖凝胶电泳、紫外检测及RT-PCR反应对提取效果进行了比较分析.结果表明:除RNAiso Plus法外,其它方法提取的总RNA均有一定程度的DNA污染.RNAiso Plus法组③(1/5体积KAC+4/5体积PCI)完整性最好,SDS法组④(1/5体积NaCl+ 4/5体积PCI)浓度最高,为372.4 ng/μL.5种方法共20个处理组获得的RNA反转录后均能扩增出18S rRNA基因片段.该研究建立起了适用于青天葵叶片的总RNA提取方法,为青天葵的基因克隆、表达及转录组分析奠定了技术基础.     

药用植物青天葵的悬浮培养条件优化

以悬浮细胞干重增加率、酶活力为考察指标,研究不同培养基、光照条件、蔗糖浓度、培养基pH值对药用植物青天葵细胞生长的影响,对青天葵悬浮细胞培养方法进行条件优化。结果表明,1/4MS和1/2MS培养物外观形态最佳,1/2MS组培养物干重增加率最大,MDA含量最低,POD含量最高;暗培养条件有利于愈伤组织干重的增加;蔗糖浓度为1%时愈伤组织干重增加率显著高于其他处理组,pH6.0为青天葵悬浮培养的合适pH值,培养基中添加MES可明显提高干重增加率。     

锦鸡儿花及根中酚性物质的含量及其抗氧化作用的比较研究

评价了锦鸡儿花及根中不同萃取部位的黄酮、多酚含量以及各项抗氧化能力指标,为制备天然来源的氧化剂提供理论依据,并为药食同源植物锦鸡儿的开发和利用提供科学依据。采用紫外分光光度法测定不同萃取部分的总黄酮和总多酚含量;通过DPPH·自由基、ABTS⁺自由基清除作用和铁离子还原能力试验比较锦鸡儿花及根中不同萃取相的抗氧化能力。表明:锦鸡儿花及根中总多酚含量普遍大于总黄酮含量,以氯仿部位总多酚含量最高,乙酸乙酯部位的总黄酮含量最高。锦鸡儿花及根均表现出很强的体外抗氧化活性。锦鸡儿花、根中对DPPH·自由基清除能力最强的分别为乙酸乙酯萃取相（IC₅₀ = 0.16mg/mL）和正丁醇萃取相（IC₅₀ = 0.28 mg/mL）;对ABTS⁺自由基清除能力最强的均为乙酸乙酯萃取相（花：IC₅₀ = 0.21 mg/mL;根：IC₅₀ = 0.04 mg/mL）;而对Fe⁺还原能力最强的分别为正丁醇层（EC₅₀ = 0.56 mg/mL）、乙酸乙酯层（EC₅₀ = 0.73 mg/mL）。结论：锦鸡儿花及根的乙醇提取物和不同萃取部位均具有较好的抗氧化活性。     

大豆花叶病毒病抗性基因发掘及分子育种研究进展及展望

大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus, SMV)病作为一种全球性病害,严重制约着大豆的高产稳产和品质。通过发掘和利用优异SMV抗性基因资源,提高抗病品种选择效率,是控制SMV危害的有效途径。然而目前国内外对SMV特性、株系划分、抗性鉴定、遗传特性及抗性基因发掘等多见于研究性报道,对相关研究现状、热点问题及其进展缺乏系统的探讨分析和梳理。本文结合国内外大豆SMV最新研究进展,从SMV的特征、株系划分及危害、抗性基因的定位及其种质资源鉴定、分子标记辅助育种方面,对该领域研究现状、最新研究进展与动态以及存在的问题进行梳理和分析,并对支撑大豆分子标记辅助育种的种质资源基因型信息数据平台构建等热点问题进行系统阐述,以期为推动大豆分子育种进程及其创新体系建设提供信息支持和参考依据。