大丽轮枝菌（Verticillium dahliae VdLs.17）分泌组预测及分析

 【目的】预测并分析大丽轮枝菌基因组范围内的分泌蛋白,为大丽轮枝菌分泌蛋白致病机理的研究奠定基础。【方法】利用已公布的大丽轮枝菌全基因组序列,组合使用生物信息学软件SignalP、TargetP、TMHMM、Big-pi和PROSITE,预测大丽轮枝菌基因组范围内所有分泌蛋白,定义为分泌组。统计分析分泌组中蛋白N-端信号肽特点;应用碳水化合物活性酶类数据库和病原菌-寄主互作蛋白数据库对分泌组蛋白进行注释,预测分泌组中潜在果胶酶、纤维素酶和病原菌寄主互作蛋白;利用真菌激发子的保守结构域,预测分泌组中潜在的激发子蛋白集;应用BLASTP程序比较分析大丽轮枝菌和黑白轮枝菌分泌组,获得大丽轮枝菌相对于黑白轮枝菌特异的分泌蛋白。【结果】大丽轮枝菌分泌组共有922个蛋白。信号肽分析表明,以19个氨基酸为信号肽的蛋白数目最多,非极性氨基酸丙氨酸的出现频率最高,而有带电侧链的氨基酸天冬氨酸和谷氨酸的出现频率最低,信号肽的-3和-1位置上的氨基酸相对保守。大丽轮枝菌分泌组含有158个潜在的碳水化合物活性酶类,其中,包括10个果胶水解酶和14个果胶裂解酶;190个潜在的病原菌-寄主互作蛋白、97个含有RxLx[EDQ]模体的蛋白和52个富含半胱氨酸的小分子量分泌蛋白;58个相对于黑白轮枝菌分泌组特异的蛋白。【结论】本文建立了预测大丽轮枝菌分泌组蛋白的方法。分泌组蛋白信号肽长度具有高度的变异性,氨基酸组成多为脂肪族氨基酸,序列在C-端结构域较为保守。分泌组中包含大量潜在的果胶降解酶、病原菌-寄主互作蛋白、RxLx[EDQ]模体蛋白和富含半胱氨酸的小分子量蛋白等致病相关蛋白。     

制约我国粮食生产稳定发展的因素分析及对策建议

随着工业化、城镇化进程的深入发展和农产品消费需求的持续增长,“十二五”我国粮食生产稳定发展的任务将更加艰巨。利用中国农业年鉴等统计资料,从粮食生产现状和形势出发,深入剖析了当前制约我国粮食生产稳定发展主要面临的问题。制约粮食增产潜力的主要因素包括粮食播种面积波动和下降、粮田基础设施和水利配套建设缺位、粮食生产力布局和耕作栽培制度不合理以及科技潜力发挥不够等,从而提出“十二五”四条保障我国粮食生产稳定发展的对策建议,供有关部门决策参考。     

大丽轮枝菌分泌蛋白提取方法比较

【目的】采用超滤法（UF）、三氯乙酸沉淀法（TCA）、离子交换富集法（IEX）分别从大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）高致病性菌株VdG1培养上清液中提取分泌蛋白,对提取样品进行质谱鉴定。寻找适合大丽轮枝菌分泌蛋白的提取方法,为大丽轮枝菌分泌蛋白组深入研究奠定基础。挖掘大丽轮枝菌分泌蛋白中潜在的致病相关蛋白,为其深入功能验证及致病机理研究提供平台。【方法】3种方法提取大丽轮枝菌VdG1分泌蛋白,shot-gun方法进行质谱鉴定。利用生物信息学软件WoLFPSORT、SignalP、TMHMM、PHOBIUS对其中经典分泌蛋白进行预测。通过CAZy和PHI数据库进行经典分泌蛋白中碳水化合物水解酶（CAZy）和病原菌寄主互作因子（PHI）注释,BLASTp软件进行RxLx、LysM、Cys Pattern等模体蛋白比对分析。提取的蛋白样品接种感病棉种（军棉1号）进行样品生物学活性及致病性检测。【结果】TCA法、IEX法和UF法制备大丽轮枝菌分泌蛋白,其提取效率分别为1.18、0.96和0.56 mg?L-1。SDS-PAGE电泳检测显示UF法提取的蛋白样品条带少而模糊。而TCA法和IEX法提取的蛋白样品条带较多,样品的纯度也较高;经生物信息学软件预测分析,提取的蛋白样品中含有经典分泌蛋白分别为124、112和75个;质谱鉴定的分泌蛋白中含有潜在致病因子分别为98、85和57个;另外,IEX法制备大丽轮枝菌分泌蛋白效果较好,具有小分子偏好性,且能够保持样品的生物学活性,该蛋白样品接种棉花叶片能够引起萎蔫、坏死的症状。【结论】3种方法提取大丽轮枝菌分泌蛋白,UF法提取效率最低,纯度最差,蛋白数量最少,蛋白样品中含有潜在的毒素蛋白数量也最少,而且对于大体积处理相当耗时。TCA法和IEX法都适合大丽轮枝菌分泌蛋白的制备,但是TCA法制备过程中不能保持样品的生物学活性,后续适合于2-D电泳检测等试验。IEX法首次应用于病原菌分泌蛋白的制备,操作简单、方便,全部过程均由仪器系统完成。制备的大丽轮枝菌分泌蛋白具有生物学活性,能够引起棉花叶片的萎蔫、坏死病症。另外,数据库及软件比对分析发现大丽轮枝菌分泌蛋白组中含有CAZy酶类61个、PHI相关蛋白38个、RxLx模体蛋白13个、LysM模体蛋白1个、Cys Pattern的模体蛋白15个、VdNEP蛋白家族2个。该结果将为致病相关蛋白的筛选和深入功能验证提供重要依据。     

关于中国发展现代农业的道路与目标任务思考

分析了中国发展现代农业面临的若干矛盾与制约因素,提出了发展现代农业始终需要坚定不移统筹处理好六大关系、实现六大统一的战略与原则,探讨了中国发展现代农业的基本目标和任务,从加强农业基础设施建设、继续推进体制创新、建立完善农民组织、加强政府支持和保护的力度、构建社会化服务体系、加大国家支持和财政投入的力度、加速集约化经营进程、优化农业内部产业结构、建设国家新型农业科技创新体系、建立新型农技推广体系、建立完善农业教育培训体系等方面详细讨论了发展现代农业的优先重点。     

无公害农业发展现状、趋势与对策

综合评述了国内外无公害农业的产生和发展 ,分析了推进无公害农业发展的技术重点与趋势,提出了推动我国无公害农业的对策和应把握的政策     

抗棉铃虫、棉蚜兼抗枯、黄萎病的高产优质棉花新品系“中植372”

抗棉铃虫、棉蚜兼抗枯、黄萎病的高产优质棉花新品系“中植３７２”ＣｏｔｔｏｎＣｕｌｔｉｖａｒ＂Ｚｈｏｎｇｚｈｉ－３７２＂ＲｅｓｉｓｔａｎｔｔｏＣｏｔｔｏｎＢｏｌｌｗｏｒｍ,ＣｏｔｔｏｎＡｐｈｉｄ,ａｎｄＣｏｔｔｏｎＷｉｌｔＣａｕｓｅｄｂｙＦｕｓａｒｉｕ...     

农业科技革命的特点与规律——兼论我国新农业科技革命的必然性

文章全面回顾了全球三次科技革命和两次“绿色革命”的过程,从发展的跳跃性、创新性、取代性、奠基性、冲激性、不平衡性等方面分析了农业科技革命的发展特点与规律,探讨了农业科技革命产生的内在根源和方向,揭示了现阶段我国新的农业科技革命产生的历史必然性。     

小鼠乳腺炎模型的建立及中草药防治研究进展

奶牛乳房炎是奶牛常见的三大疾病之一，其制约着奶牛养殖业发展，并且常年造成巨大的经济损失。直接在奶牛上进行实验研究的成本较高、操作不便及无法进行标准化管理，这在一定程度上影响了对奶牛乳房炎的研究及防治。近年来，国内外学者开始选用小鼠建立乳腺炎疾病模型，该模型具有费用低、耗时少、效率高及性价比高等优点，解决了使用奶牛成本高及无法进行标准化管理等问题。本文对小鼠乳腺炎模型的构建、中草药对小鼠乳腺炎的作用机制及防治等进行综述，为开发中草药防治奶牛乳腺炎的研究提供一定的理论基础。     

知识创新与新的农业科技革命

从知识经济的挑战与机遇，知识经济与农业科技革命，深化农业科技体制改革与推进新的农业科技革命，建设国家农业科技创新能力与加速实现农业现代化等方面进行了系统阐述。