嗜热侧孢霉生物学特性及其液体发酵研究

嗜热侧孢霉(Sporotrichum thermophile)是一种嗜热丝状真菌,具有分解纤维素的特性.固体PDA培养条件下进行形态观察表明,所采用的嗜热侧孢霉菌株,菌丝丛枝状、有隔,分生孢子浅褐色,顶生或侧生.利用ITS序列进行分子分类发现嗜热侧孢霉与嗜热革节孢(Scytalidium thermophilium)及特异腐质霉(Humicola insolens)2种嗜热菌相距最近.嗜热侧孢霉的生长pH值范围较宽,在初始pH值4.0-12.0的PDA平板上均可生长,以4.0-8.0时生长较好.以还原糖含量变化和蔗渣减少量为指标,以蔗渣为唯一碳源进行液体发酵,在30 g.L-1蔗渣、11.45 g.L-1NH4NO3、初始pH值4.0和接种量15%(孢子悬液浓度106个.mL-1)条件下,蔗渣降解效果好.     

甘蔗AFLP分析技术体系的建立

研究目的】为了建立甘蔗AFLP标记技术体系;【方法】本文通过对甘蔗抗、感黑穗病的杂交亲本CP84-1198和科5,以及根据其杂交后代的浸渍接种田间抗性鉴定结果所构建的抗、感黑穗病池的AFLP银染法分析;【结果】建立了甘蔗黑穗病抗性的AFLP分析实验体系,同时将AFLP-银染技术应用于甘蔗近缘植物斑茅抗旱胁迫及其对照材料的cDNA差别筛选,建立了一种mRNA差别显示技术体系。实验过程中还筛选出了四对能在抗、感亲本上扩增出特异条带的引物,以及一对在斑茅水分胁迫和对照中表现良好差异的引物,为下一步的实验工作的开展奠定了基础。【结论】通过本实验建立了甘蔗AFLP分析技术体系、变性聚丙烯酰胺凝胶的快速银染、凝胶简单保存以及聚丙烯酰胺凝胶中的特异条带的高效回收技术。     

水分胁迫下斑茅3个逆境代谢相关基因表达的实时PCR分析

【研究目的】初步探讨斑茅3个关键逆境适应相关基因在水分胁迫下的表达机制。【方法】已克隆S-腺苷蛋氨酸脱羧酶、鸟氨酸氨基转移酶、甜菜碱脱氢酶3个基因和内参基因的基础上,应用定量PCR技术,对这3个基因在不同胁迫时间下的表达水平进行分析。【结果】斑茅的S-腺苷蛋氨酸脱羧酶、鸟氨酸氨基转移酶基因、甜菜碱脱氢酶基因表达在初期均受抑制,后期表达持续上调,但甜菜碱脱氢酶基因受水分诱导表达较前两个基因明显。【结论】这可能暗示着在斑茅中,脯胺酸和甜菜碱的合成受水分胁迫诱导,而甜菜碱的合成相对脯胺酸和多胺受水分胁迫诱导影响更大。这些研究为斑茅抗旱的分子机制提供初步的理论基础。     

甘蔗光合速率的日变化及其对光温的响应

在田间和盆栽正常生长条件下,Ｃ４植物甘蔗的光合速率日变化明显地不同于Ｃ３植物甘薯．甘薯为典型的双峰曲线,中午Ｐｎ的明显降低主要是由非气孔因素限制引起;而甘蔗为单峰曲线,其峰值出现在上午１０００左右．甘蔗Ｐｎ变化受到光温条件的强烈影响,强光有利于Ｐｎ提高,弱光下其Ｐｎ略低于甘薯,温度过高（＞４０℃）或过低（＜１５℃）明显地抑制甘蔗光合作用．还分析了引起Ｐｎ变化的气孔和非气孔限制．     

甘蔗净光合速率、叶绿素和比叶重的季节变化及其关系

供试的８个甘蔗品种净光合速率、叶绿素含量以及比叶重的季节变化规律都表现为：从苗期到伸长盛期逐渐增加,伸长盛期达到最大值,然后又逐渐下降,且这种变化规律随品种的变化而改变．不同品种间及同一品种不同生育期净光合速率与叶绿素含量、同一品种不同生育期净光合速率与比叶重均表现显著正相关．进一步分析各品种的叶绿素荧光动力学参数表现为,品种的原初光能转化效率（Ｆｖ／Ｆｍ）、ＰＳⅡ潜在活性（Ｆｖ／Ｆｏ）以及潜在光合作用量子转化效率ＲＦｄ（Ｆｄ／Ｆｓ）大的品种其净光合速率较高．     

抗花叶病转基因甘蔗安全性评价

根据国内外研究进展与本实验室的最新研究成果,综述了甘蔗抗花叶病转基因甘蔗的食品安全、土壤生态安全、基因漂移、病毒的异源包装和重组、转基因杂草化等方面的研究进展。     

甘蔗黑穗病菌（Ustilago scitaminea Syd.）分子多样性初步分析

摘要：应用经筛选的13条10 bp随机引物，对来自福建等6个省（区）甘蔗(Saccharum ssp.)上的18个甘蔗黑穗病菌（Ustilago scitaminea）分离物进行了RAPD分析。来自福建和广西的2个代号分别为7和9的分离物间，显示出最大的相异系数为0.89474； 最小相异系数为0.25217, 是在两个福建分离物间出现的。UPGMA聚类结果表明，18个分离物在0.75的相异水平上可以聚为6个群体，7个来自不同寄主品种的福建分离物相异系数较小，分布于2个相邻的遗传聚类群中，同时，2个来自同一寄主品种不同地理来源的分离物间，显示出高达0.82353的相异系数。说明分子多样性同地理来源之间具有一定的相关性，但与寄主来源无关。     

甘蔗新品种福农38号的选育与评价

福农38号系从组合粤糖83-257×粤糖83-271中经多年选育出的中熟高产高糖强宿根适应性广甘蔗新品种,并于2013年通过国家鉴定.多年多点试验结果表明,福农38号出苗较好,苗壮,分蘖力强,植株高,中大茎,易脱叶,57号毛群不发达,高抗黑穗病,高抗花叶病,抗逆性强.平均蔗茎产量104.21t/hm2,分别比对照种新台糖22号、新台糖16号增产4.53％、10.76％.11-12月平均蔗糖分14.48％;1-3月平均蔗糖分15.53％;11-3平均蔗糖分15.08％,分别比对照新台糖22号、新台糖16号高0.24％、0.49％.平均蔗糖产量15.69t/hm2,分别比对照种新台糖22号、新台糖16号增糖6.16％、14.28％.     

玉米BADH基因的克隆与序列分析

Betaine was accumulated as a nontoxic and protective osmolyte in water-dificit and salt-stressed plants. Betaine aldehyde dehydrogenase for glycine betaine synthesis is an important enzyme. The BADH gene of Maize was cloned by RT-PCR and RACE. The gene is 1 762 bp in length, including an open reading frame of 1 515 bp.Its nucleotide sequence shares 95% with the the partial cDNA of BADHI from Sorghum bicolor. Its deduced amino acid sequence contains the conserved domain sequence “VTLELGGKSP“ of ALDH, and a tripeptide SKL at its C-terminal, a signal targetting to the microbodies. The phylogenetic tree of 20 BADHs was constructed,which corresponds to the classical botanical division of plant, the BADH of maize is closest to the one of Oryza Sativa.     

影响根癌农杆菌EHA105感受态细胞转化效率因素的研究

通过对EHA105菌株48h不间断培养观察,绘制出其生长曲线图;同时用不同浓度的CaCl2溶液分别制备根癌农杆菌EHA105的感受态细胞,在转化过程中用不同的温度进行热激处理,统计分析阳性转化子个数,明确了采用冻融法将外源DNA导入农杆菌EHA105时的几个影响因素的参数。结果表明,当0D。值在1．0—1．5之间时,根癌农杆菌EHA105正处在对数生长期,活力最强;制备感受态细胞时,CaCl2溶液的浓度在6～10mmol·L-1之间,无显著差异,但以10mmol·L-1效果最佳,转化率达5．322×10^6·μg-1热激处理温度在20～37℃之间均无显著差异,但37℃处理时转化率最高,达5．550×10^6·μg-1。