高效液相色谱-四级杆/线性离子阱质谱法筛查兽药中非法添加物的研究

建立了一整套利用高效液相色谱-四级杆／线性离子阱质谱对兽药中非法添加物进行筛查的方法。首先,通过比较样品与阴性对照的差异,采用Q3全扫描方式获取靶目标化合物的母离子质荷比（214．2Da）,再对该化合物的质谱参数、色谱分离条件等进行逐一优化,最后利用线性离子阱质谱的“多反应监测触发增强子离子扫描”功能对靶目标化合物与相应标准物质进行谱库匹配分析。综合靶目标化合物的保留时间（6．92min）、离子质荷比、特征碎片离子及谱库匹配度（93．2）等参数,确证了该品牌的部分兽药中非法添加了氯丙那林。本研究为兽药中非法添加物筛查及定性确证提供了一个有效的思路与方法。     

利用实时荧光PCR快速筛查玉米中转基因成分

玉米是拥有转基因转化体数量最多的作物,多样的转化体增加了玉米中转基因成分筛查的难度。为了建立玉米中转基因成分的快速筛查方法,利用Taqman探针实时荧光PCR方法,通过对玉米样品中CaMV35S启动子(P-35S)和NOS终止子(T-NOS)2个元件组合的检测,完成对现有玉米转化体的筛查。建立的Taqman探针实时荧光PCR方法灵敏度可达到0.1%,检测时间较普通PCR方法缩短1h以上。同时提出了转基因玉米转化体鉴定路线图。该筛查方法可对玉米中的转基因成分进行快速、高灵敏度的筛查。     

猪肉中92种兽药残留的UPLC-Qtrap高通量筛查和定量方法的研究

结合简单快速的前处理方法和超高压液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱(UPLC-Qtrap)技术,建立了猪肉中92种兽药残留同时检测的高通量筛查和定量方法。样品经简单快速的前处理后,经Kinetex Core-Shell色谱柱分离,分析时间仅13.5 分钟。质谱采用多反应监测－信息关联－增强子离子(MRM-IDA-EPI)采集方式及谱库检索技术,通过化合物的保留时间、离子对丰度比以及EPI标准谱库检索对比,可完成对92种兽药的快速筛查和确证。采用基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明：在1～50 ng/mL猪肉基质匹配标准溶液浓度范围内呈良好线性关系,相关系数R2均大于0.990;方法定量限均为1 ng/g;在1~10 ng/g的添加浓度范围内92种药物的回收率为50%～120%,批内批间相对标准偏差均小于20％。     

超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱筛查水产品中62种药物残留

建立超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱筛查水产品中62种药物残留的方法。样品用酸化乙腈提取后,经浓缩过滤后,进超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱进行筛查。采用AcquityUPLCBEHC18,2.1 mm×150 mm色谱柱分离,以乙腈和缓冲液(0.1%甲酸,2 mmol·L^-1乙酸铵)为流动相梯度洗脱,质谱Fullms-dd-MS²模式进行采集分析。方法检出限为10 μg·kg^-1,回收率范围在48.3%~105.8%。该方法自建谱库,利用高分辨质谱质量数准确、精度高的特点,匹配谱库达到准确快速筛查的目的。     

油菜中转基因成分的筛查检测策略

旨在建立油菜中转基因成分的快速筛查方法,服务于农业转基因生物安全监管。根据转基因油菜常用转化遗传元件信息建立转基因油菜的筛查策略,并使用定性PCR法检测。结果表明,利用CaMV35S启动子、NOS终止子、bar基因、pat基因、CP4-epsps基因和NPT II基因6个靶标元件的组合,理论上可筛查92%的已知商业化转基因油菜转化事件。该方法的检测灵敏度达到1g/kg,可对油菜中的大多数转化事件进行快速、高灵敏度的筛查。     

高分辨质谱筛查复合预混合饲料中非法添加药物

本实验旨在建立复合预混合饲料中超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(HPLC-Q-Exactive Focus/MS)测定157种非法添加药物的高通量筛查方法。通过构建非法添加药物筛查数据库并与样品中未知物信息进行比对，从而快速确定未知药物种类和含量。数据库包括磺胺类、喹诺酮类、β-受体激动剂类、硝基咪唑类、苯并咪唑类、蛋白同化激素类、糖皮质激素类、喹噁啉类、四环素类、抗病毒类、氯霉素类和真菌毒素类等12类157种药物的液相色谱条件及相关筛查参数。饲料样品使用50%乙腈水溶液超声提取，净化后过膜上机，正负模式扫描，TraceFinder软件进行定性筛查。结果表明：该方法可适用于复合预混合饲料中多种兽药非法添加的快速筛查，当药物添加浓度为50 ng/g时药物检出率为98.7%，药物添加浓度为100 ng/g时药物检出率100%。该方法可基本满足预混合饲料中非法添加药物的高通量快速检测需求，为实现多种药物高通量筛查提供数据支撑。     

农业执法案件中未知粉末的分析研究

对农业执法案件中缴获的未知粉末进行分析研究。应用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱（UPLC-TOF-HRMS）获得未知物分子离子峰的精确质量数、天然同位素信息，二级特征碎片的精确质荷比，并应用SCIEX PeakView及MasterView软件进行分析。经过靶向及非靶向筛查，同时参考文献报道，推导出未知粉末中的疑似化合物。采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-PDA）法及UPLC-TOF-HRMS法进行了双重确证。结果显示该未知粉末中含克仑特罗（16 g?kg-1）及其合成前体克仑特罗杂质B（455 g?kg-1）。本文详述的分析技术可为未知添加物的筛查和确证提供思路和技术参考。     

中兽药口服液中隐性药物筛查高分辨质谱方法的建立

建立了测定中兽药口服液中170种隐性药物的超高效液相色谱—四极杆静电场轨道阱质谱( HPLC- Q-Exactive Focus/MS) 高通量筛查方法。通过构建药物筛查数据库并与样品中未知物信息进行比对,从而实现快速筛查中兽药口服液中隐性药物的种类和含量。数据库包括磺胺类、喹诺酮类、β-受体激动剂类、硝基咪唑类、苯并咪唑类、蛋白同化激素类、糖皮质激素类、喹噁啉类、四环素类、抗病毒类、酰胺醇类和真菌毒素类等12类170种药物的筛查参数。样品中人为添加化学药物,经1%甲酸乙腈提取,QuEChERs净化,氮气吹干,0.2%甲酸水复溶上机,正负模式扫描,TraceFinder软件筛查定性,当药物添加浓度为400ng/g时,170种添加药物的检出率约为92.8%,随着药物浓度逐步提高至1 μg/g时,所有添加药物均可检出。结果表明,该方法可满足中兽药口服液中隐性药物高通量快速筛查的需要,为打击畜禽养殖投入品中非法使用化学药物的行为提高技术支持和数据支撑。     

用于树干内部缺陷筛查的应力波临界波速确定研究

古树和部分城市大树的树干内部，经常有空洞、腐朽等影响树木健康和安全性的缺陷存在。以筛查古树和城市大树树干内部缺陷为目标，测定了北京地区几种常见树种的古树和城市大树健康树干的多个径向应力波波速，对每个树种的应力波波速测量值进行了正态统计分析，基于95%置信水平原则确定了用于判别树干内部是否存在缺陷的应力波临界波速值，进而形成了用于树干内部缺陷筛查的应力波临界波速的确定方法。结果表明，北京地区8种常见古树及城市大树油松、白皮松、侧柏、桧柏、刺槐、英桐、美桐和银杏的树干径向应力波临界波速值分别为1 225、1 394、1 620、1 864、2 055、1 639、1 485、1 728 m·s^-1。树干内部缺陷筛查验证性试验表明，形成的应力波临界波速确定方法是可行的。     

QuEChERS-气相色谱-串联质谱法高通量筛查植物源中药材中460种农药残留

结合QuEChERS样品前处理技术，建立了460种农药残留的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)方法数据库，用于植物源中药材中农药多残留的快速高通量筛查检测。样品采用0.1%乙酸-乙腈提取，经氯化钠盐析分层、PSA + C₁₈分散固相萃取净化后，GC-MS/MS测定。结果表明:根茎类、花叶类、籽实类、全草类和皮类5种类型中药材基质中421种农药的定量限 (LOQ) 在0.006~221 μg/kg之间，其中80%以上农药的LOQ低于50 μg/kg。在100 μg/kg添加水平下，72%以上农药的回收率在60%~120%之间，77%以上农药的相对标准偏差在20%以内。该方法具有简便、快速和高通量的优势，一次进样可同时检测400多种农药残留。采用本研究方法对市售215批样品进行筛查检测，结果共检出72种农药残留，其中毒死蜱和氟氯氰菊酯的检出率和检出浓度均较高，其潜在质量安全风险需引起关注。