毕节地区脱毒马铃薯生产现状及发展对策探讨

马铃薯是毕节区主要的粮、经、饲兼用型作物，近年来，我区马铃薯生产发展较快，到2004年，全区马铃薯播种面积已达21．29万hm^2，其中脱毒种薯面积为6．8万hm^2，较2003年的5．96万hm^2。增14．7％，占整个播种面积的31．8％。     

让心理健康教育走进大学课堂

心理问题已成为当前大学生的主要问题，如何解决这个问题是教育界面临的一个重大课题。作认为：要解决这个问题，必须把心理健康教育融进课程中去。     

基于高光谱成像和卷积神经网络的‘库尔勒’香梨黑斑病潜育期诊断研究

黑斑病是‘库尔勒’香梨贮藏期的易染病害之一,在潜育期外观无明显变化,很难直接通过肉眼进行准确识别。本研究结合高光谱成像和卷积神经网络（CNN）,实现了‘库尔勒’香梨黑斑病潜育期的识别。获取健康和不同病害程度香梨样品的高光谱图像,提取感兴趣区域内光谱后,利用不同预处理方法对其进行处理,分别基于常规算法（最小二乘-支持向量机、K最邻近法、随机森林）和CNN建立病害识别模型。结果表明,与常规算法建模结果相比,CNN模型的识别效果最优。当卷积层数为3,全连接层数为3,学习率为0.000 5时,CNN模型的识别效果最佳,对样品的总体识别准确率为99.70%,对潜育期样品的识别准确率为99.76%,分别较常规算法提高了12和14个百分点。该结果证实CNN模型能够显著提高对‘库尔勒’香梨黑斑病潜育期识别的准确率,为‘库尔勒’香梨黑斑病的早期诊断防治提供了1种新的方法。     

两株猪圆环病毒2型的分离及基因组序列分析

为比较猪圆环病毒2型毒株的遗传变异特性,从2009年河南郑州和山东东营的猪场疑似猪断奶后多系统衰弱综合征(PMMS)病料中分离到2株病毒,经PCR检测初步鉴定为猪圆环病毒2型,并对病毒全基因组进行扩增,用DNA Star对序列进行比较分析.结果表明,分离到的河南郑州和山东东营PCV-2毒株全基因组长度均为1 767 b...     

大豆脂肪氧化酶的遗传规律

通过酶学鉴定，分析研究了大豆脂肪氧化酶（lipoxygenase)简称脂氧酶（lox)的遗传规律，试验证实lox基因突变体酶性失活，酶带缺失为隐性基因，显隐性属质量性状，细胞核遗传，3种lox同功酶非等位基因在同源染色体上分别独立占属一个位点，某一同功酶等位基因降性缺失时，基因遗传遵从3；1独立分配原则；2种非等位基因同时隐性缺失时，缺1和缺2的基因连锁遗传，双缺1和3或双缺2和3的基因分离各自互不干扰，都遵从独立分离规律；3种lox同功酶基因同时隐性缺失时，除lox缺1基因仍接近3：1独立遗传外，缺2和缺3基因都不符合独立传规律，其中缺1和缺2两对隐性缺失基因仍有71．5％的 锁遗传，重组率28．5％，缺2和缺3基因，缺1和缺3基因之间，基因重组率在45％以上，lox完全显性植株为49．3％，缺1为6．9％，缺2为10％，缺3为17．9％，1和2双缺为6．9％，、1和3双缺为0．9％，2和3双缺为5．4％，3种同功酶同时隐性缺失时获得率为2．7％。     

脱毒马铃薯微型种薯大西洋栽培技术研究

试验采用四元二次旋转回归正交组合设计,研究脱毒马铃薯品种大西洋种植蜜度、肥料种类及施用量与产量之间的优化数学模型,经计算机对模型进行分析模拟,求得脱毒马铃薯原原种大西洋每公顷产量在18 826.5kg以上的组合方案有266个,建立高产栽培技术模型:种植密度为每公顷129 450～133 680株,每公顷纯(N)施用量为109.8～123.75 kg,纯(P2O5)施用量为237.9～260.1 kg,纯(K2O)施用量为254.25～294.3 kg。措施中心值是:每公顷种植密度为131 655株、施纯N 117 kg、P2O5 249 kg、K2O 274.5 kg。N、P2O5、K2O的比例约为1:2.1:2.4。     

奥氏奥斯特他线虫巨噬细胞转移抑制因子克隆表达与酶功能鉴定

通过原核表达系统表达奥氏奥斯特他线虫（Ostertagiaostertagi）巨噬细胞转移抑制因子（OoMIF）,并对该蛋白的酶功能进行鉴定。通过GenBank和NematodeV3．0数据库发表的序列,利用分子生物学软件设计了1对特异的引物,通过RT—PCR扩增OoMIF全基因,经测序分析后,将OoMIF亚克隆到pET28a（＋）,然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到BL21中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组OoMIF蛋白进行纯化,同时通过免疫印迹对线虫自身的MIF及纯化后的OoMIF进行鉴定,最后对OoMIF的互变异构酶和氧化还原酶活性进行鉴定。结果表明OoMIF具有互变异构酶活性,但没有氧化还原酶活性。为进一步探究OoMIF生物学功能及其MIF在宿主免疫调节中的作用提供依据。     

玉米大斑病菌原生质体遗传转化体系的建立

以玉米大斑病菌菌株01-23为出发菌株,对影响原生质体遗传转化的主要条件进行了研究,包括原生质体制备的材料、酶解系统、稳渗剂、载体浓度及线性化程度等。结果表明,改良Fries培养基中培养24 h的分生孢子悬浮液是原生质体制备的首选材料;2%溶壁酶和1%蜗牛酶两种酶混用是最佳的酶解系统;0.7 mol/LNaCl是最适的稳渗剂;环状载体比线性载体转化效率高5倍以上;在载体浓度为100μg/mL时转化效率最高。     

巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达

为获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)受体猪氨基肽酶N(pAPN)抗原,提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA,PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,将重组质粒pET-32a-pAPN转化大肠埃希菌BL21,通过不同浓度的IPTG、不同诱导时间进行诱导表达,以确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和抗组氨酸标签的单抗进行Western blot检测重组蛋白在大肠埃希菌中的表达,结果显示,原核表达产物在诱导温度37℃、IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导4h可获得最佳表达,产物分子质量约为45ku,获得的目的蛋白大小与预期一致。     

猪伪狂犬病病毒HN2012株的分离鉴定及gE基因遗传进化分析

2012年以来,由新型猪伪狂犬病病毒引起的猪伪狂犬病(PR)在我国规模化猪场大范围发生,在河南省发病猪场分离到1株PRV,命名为HN2012。该病毒在BHK-21细胞中能够产生典型的PRV细胞病变,将HN2012以10~5 TCID50的剂量感染成年家兔,接种兔在36h内全部死亡,均出现典型的PR症状。序列比对结果表明,HN2012与其他毒株同源性为94.82%~99.83%。进化树分析结果显示,PRV gE进化方向分为国内分离毒株和国外分离毒株两支,中国分支明显划分为2012年前分离毒株亚群和2012年后分离毒株亚群。这些结果对于我国PR的预防和疫苗株的选择具有重要的参考价值。