高级别兽医生物安全实验室的初步定量风险评估研究

[目的]探讨高级别兽医生物安全实验室的定量风险评估方法。[方法]对2005年以来通过认可的高级别兽医生物安全实验室,就设施、设备、管理体系和运行管理四大类风险要素开具的不符合项进行梳理、分析,通过模型构建,利用@Risk风险分析管理软件,对实验室运行中可能出现的事故概率进行初步量化评估。[结果]比较分析了有代表性的高级别兽医生物安全实验室现场评审发现的不符合项,按照比例权重依次为管理体系(30.3%)、设施(25.7%)、运行管理(18.2%)、其他(15.2%)和设备(10.6%)。构建了设施-事故、设备-事故、管理体系-事故和运行管理-事故的发生概率模型,通过50%百分位数统计量和平均值统计量分析各要素对事故概率的影响,由高到低依次为运行时间、运行管理、设施(平均值统计量分析时,在体系之后)、体系和设备;通过模型运算估计,就目前部分兽医实验室运行状况看,实验室年度内发生生物安全事故的概率最小为0.38%,平均发生事故的概率为2.5%,90%的可能发生事故的概率事件集中在0.8%~6.7%。严重疏于运行管理情况下,发生事故概率将有2.3%~2.5%升高至13.1%。[结论 ]高等级兽医生物安全实验室有多重要素影响其安全,应在注重设施建设、设备配置、体系编制基础上,加强日常运行的管理。     

不同来源沙门氏菌的毒力基因检测与耐药性分析

[目的]了解不同畜禽中沙门氏菌的携带状况及其毒力和耐药性,为动物源沙门氏菌的流行病学分析和防控提供数据和依据。[方法]从山东、吉林、江西、新疆和云南等地区采集样本,用国标法分离鉴定沙门氏菌,用沙门氏菌血清型试剂盒检测血清型,用PCR方法检测毒力基因,最后用微量肉汤稀释法(MIC)对分离菌株进行耐药性分析。[结果]健康畜禽和发病畜禽样本中的沙门氏菌分离率分别为20.67%(141/682)、6.13%(45/734)。发现4种沙门氏菌优势血清型,分别为德尔卑(42.6%)、印第安纳(26.2%)、肠炎(17.7%)和汤普森(17%)。对分离菌株进行毒力基因分析,检测SPI-1~SPI-5上的5个核心蛋白基因和spv A、B、C、D和R毒力质粒基因,其中健康畜禽样本中沙门氏菌毒力岛上的基因携带率与发病畜禽样本中的携带率基本一致,但发病畜禽中的菌株毒力质粒基因携带率明显高于健康畜禽。耐药性检测结果表明,除多西环素和庆大霉素外,发病动物中的沙门氏菌对抗生素的耐药率均比健康动物中的高。猪源与鸡源沙门氏菌对庆大霉素、头孢噻呋、氧氟沙星、粘杆菌素的耐药率差异显著,对其他抗菌药物略有差异,但不显著。健康畜禽中的多数沙门氏菌株耐药1~2种,占分离菌株总数的55.32%;发病畜禽中耐药10种以上的沙门氏菌占分离株总数的44.44%。[结论]发病畜禽中的沙门氏菌分离率比健康畜禽中的低,但其毒力质粒基因的携带率较健康畜禽中的高,且耐药情况较严重,多重耐药率高。该分析结果可为沙门氏菌的危害评估和防控措施制定提供依据。     

抗稻瘟病水稻温敏核不育系Z268S的选育及应用

抗稻瘟病是水稻品种审定标准中重要指标之一,选育抗稻瘟病不育系有助于增强杂交水稻抗稻瘟病能力。本研究利用深08S与抗稻瘟病材料IR71033–121–15–B杂交,采取回交和系谱选择法,育成了抗稻瘟病温敏核不育系Z268S。Z268S具有播始历期短、抗稻瘟病等特点,于2017年通过安徽省品种审定委员会技术鉴定。     

我国草原蝗虫发生与防治现状分析

草原蝗虫是我国草原上主要害虫之一,近年来维持高发态势,对我国畜牧业生产和草原生态环境造成严重破坏,对农牧民的生产和生活造成严重威胁。文章综述了近年来我国草原蝗虫的发生现状、主要技术方法应用情况、经费投入与保障制度建设情况以及科技支撑情况等内容,分析了我国草原蝗虫防治面临的问题,并对未来草原蝗虫防治工作提出了建议。     

口蹄疫病毒VP1基因的克隆及结构蛋白VP1的原核表达

根据Genbank中的O型口蹄疫病毒全基因序列设计了一对扩增口蹄疫病毒VP1基因的引物，用该特异性表达引物从口蹄疫阳性质粒pMD—P1中扩增得到目的基因VP1（639bp）。用相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体PET32a后构建重组表达载体．转化宿主菌BL21（DE3），经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆．测序证明目的基因正确插入了表达载体，用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达，收集菌液进行SDS—PAGE电泳，Westerll—blotting分析蛋白免疫原性。结果表明，VP1结构蛋白在大肠杆菌中表达量较高，表达产物的分子量约为41Ku，并能被口蹄疫阳性血清所识别，经分析表达蛋白约占菌体蛋白的34％。口蹄疫病毒VP1蛋白在大肠杆菌中高效表达且表达产物具有免疫原性。     

鲎素对嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制研究

为探讨鲎素对嗜水气单胞菌的抑杀作用,采用最小抑菌浓度、AB染料、扫描电镜、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳等方法研究鲎素对嗜水气单胞菌的抗菌活性、杀菌率、胞内紫外物质泄露、膜负电荷数、外部形态结构及胞内基因组DNA的影响。结果表明,鲎素对嗜水气单胞菌的抗菌活性较其他细菌弱;2倍最低杀菌浓度(MBC)鲎素能在短时间内迅速杀死嗜水气单胞菌并导致胞内生物大分子泄漏;扫描电镜发现1倍MBC鲎素能导致轻微的壁膜破损及一些胞内物质渗出和粘连;流式细胞仪结果表明,1倍MBC鲎素能破坏细胞膜的完整性;AB染料测定表明鲎素处理后能改变膜负电荷数;琼脂糖凝胶电泳表明,鲎素能够与嗜水气单胞菌的基因组DNA发生作用,并呈浓度依赖关系,浓度越高对细菌基因组DNA损伤越大。鲎素对嗜水气单胞菌的抑菌活性弱,只有高浓度时才能短时间内导致胞内紫外吸收物质泄露、膜负电荷数发生改变及基因组DNA损伤。     

口蹄疫检测技术研究进展

口蹄疫(Foot-and-Mouth Dis-ease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。该病可快速和远距离传播,易感动物多达70余种,主要包括猪、牛、羊等主要畜种及其他家养和野生偶     

VP7—ELISA检测牛,羊血清蓝舌病抗体的研究Ⅱ应用VP7—ELISA检 …

蓝舌病ＶＰ７抗原包被板在－２０℃保存期为６个月,４℃保存１个月。抗原批内重复性试验ＣＶ＜１０％,批间重复性试验ＣＶ＜１０％。ＶＰ７－ＥＬＩＳＡ与ＡＧＩＤ对４２０份血清平行检测结果：ＶＰ７－ＥＬＩＳＡ较ＡＧＩＤ试验多检出了１３份阳性样品,ＶＰ７－ＥＬＩＳＡ检出的阳性样品对ＡＧＩＤ阳性样品的覆盖率为９７．４％,对采自陕西等省１８１６份牛、羊血清样品进行检测,检出阳性样品数为２５７份,阳性检出率为１４．     

防治面积破“八”，生防I比例进“六”—2011年草原虫害防治工作取得显著成效

目前,全国草原虫害面积约2．67亿亩,严重危害面积约1．26亿亩。主要危害种类为草原蝗虫、草原毛虫、叶甲类和夜蛾类等害虫,危害区域主要集中在内蒙古、新疆等13省区和新疆生产建设兵团。     

泾河典型流域水沙变化及其景观格局分析

以黄河中游泾河流域的3个子流域为研究对象,借助GIS和RS技术与基本的水沙数据,分析各子流域水沙变化特点与土地覆被空间格局特征。结果表明:流域北部的环江上游、合水川与汭河的径流量和输沙量以及土地覆被空间格局分布差异显著;30多年来环江上游的径流量增加了60%而输沙量却增加了1倍多,汭河的径流量减少了约40%而输沙量却减少到1/5,合水川的径流量基本保持不变而输沙量略有增加;环江上游只有6种土地覆被类型以低密度草地和半荒漠草地为主,汭河有9种土地覆被类型以林地、农田和高密度草地为主,合水川有7种土地覆被类型以林地和郁闭灌丛为主。