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利用血清剥夺/血清培养实验模型,采用油红O染色提取法、甘油试剂盒和RT-PCR,诱导和测定了大鼠附睾脂肪垫分离和培养的脂肪细胞生脂和脂解及其相关酶和转录因子mRNA水平的变化,探讨脂肪细胞脂代谢通路中关键酶和转录因子基因转录表达的规律。结果显示,依血清剥夺时间延长,脂肪细胞激素敏感脂酶(HSL)mRNA表达水平显著提高(P〈0.05),恢复血清培养后,表达水平显著降低(P〈0.05),与脂解活性的变化一致;脂肪生成及生脂相关基因脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)和碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)mRNA表达水平依血清剥夺持续时间明显下降(P〈0.05),恢复血清培养,随培养时间延长显著提高(P〈0.05);血清剥夺显著降低固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1cmRNA水平,但血清剥夺72h与36h无明显差异(P〉0.05);血清剥夺72h后恢复血清培养36h和72h,SREBP-1cmRNA的表达水平没有显著性变化(P〉0.05)。结果表明,生脂及FAS和ACC1表达与ChREBP mRNA水平一致,但与SREBP-1c不一致,提示ChREBP与成熟脂肪细胞生脂基因转录激活可能有更密切的关系,但尚待在蛋白水平进一步证实。 相似文献
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案例教学法因其具有启发性、灵活性、实践性和趣味性等特点,被广泛应用到大学课程教学中。论文结合《家畜环境卫生学》课程教学目标,引入案例教学并加以实施,对案例教学的各个环节-案例选择、案例教学组织、案例教学的课程评分体系等进行了详细的论述和分析,并加以实践。结果表明,在教学中引入案例教学可巩固学生在课堂上所学的理论知识,培养学生实际应用知识的能力,能有效激发学生学习热情和学习潜能,提高课堂教学效果,还有利于刺激教师提高自身业务素质,改进教学质量、提高教学水平。 相似文献
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对大鼠附睾和肾周脂肪组织分离的前体脂肪细胞原代培养,采用RT—PCR法分析脂代谢重要酶和转录因子基因在不同分化阶段转录表达的时序变化。结果显示,在前体脂肪细胞阶段,固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1c、碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)以及脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACC1)、硬酯酰辅酶A去饱和酶(SCD)和激素敏感脂酶(HSL)基因均不转录表达;HSL mRNA在分化初期表达,中期表达水平最高,分化末期降低;SCD mRNA在分化中期表达,末期表达水平显著提高;分化初期FAS mRNA水平明显高于中期和末期;ACC1 mRNA仅在末期表达;分化初期SREBP-1c mRNA水平较高,中期和末期显著下降;ChREBP mRNA表达水平在分化末期稍高于中期,但差异不显著。表明,SREBP-1c mRNA的表达与脂肪细胞早期分化调控有关,分化成熟脂肪细胞的ChREBP mRNA表达可能与生脂基因的转录激活有关。 相似文献
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半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达 总被引:6,自引:0,他引:6
在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACCl和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACCl和FAS等基因同管扩增.通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgCl2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系.结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好.因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达. 相似文献
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为了研究体外胰岛素对猪脂肪组织脂肪代谢及相关基因表达的影响,对取自于7日龄大白×长白杂种仔猪皮下脂肪组织的脂肪细胞,经原代培养,用0!400nmol/L胰岛素处理48h,采用油红O染色提取、甘油试剂盒和半微量RT-PCR分别测定了脂肪细胞生脂和脂解的累计变化,以及转录因子固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1c和碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)和激素敏感脂酶(HSL)基因mRNA水平的变化。结果表明,低糖条件下(5mmol/L)下,胰岛素不影响原代培养猪脂肪细胞ChREBP和ACC1转录表达;胰岛素(200nmol/L例外)明显促进FAS转录表达,100!300nmol/L也显著增强SREBP-1c表达。但二者表达变化不一致,在原代猪脂肪细胞胰岛素是否是通过SREBP-1c途径调控FAS转录尚待进一步研究;高浓度胰岛素(300!400nmol/L)显著促进脂肪细胞HSL表达和脂解活性。 相似文献
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不同处理方法对稻草营养成分的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]研究不同处理方法对稻草营养成分的影响。[方法]以稻草为研究对象,分别用氢氧化钠+氨水、氨水、尿素进行处理,研究稻草在第153、0和45天的主要营养成分及颜色、气味和手感等变化。[结果]结果表明,3种处理均可降低稻草的粗纤维含量,提高稻草的粗蛋白(CP)含量;处理45 d后,氢氧化钠+氨水、氨水、尿素组的粗蛋白(CP)含量分别比对照组提高了14.4%、48.1%和90.9%;粗纤维(CF)含量分别比对照组降低了6.8%、10.2%和12.9%。3种处理对钙(Ca)、磷(P)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)的影响不大。[结论]经过3种处理后的稻草呈黄褐色,质地松软,有氨味,动物喜欢采食。 相似文献
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参照《饲料分析及饲料质量检测技术》的方法,测定不同时期华西蟾蜍蝌蚪初水分、水分、粗灰分、粗蛋白质、粗脂肪、钙和总磷7种指标,得出其含量分别为90.84%~91.76%,4.82%~6.33%,26.49%~47.39%,25.69%~42.40%,13.23%~18.09%,0.88%~1.36%和0.70%~1.06%。随着蝌蚪的成长,除初水分和粗灰分含量递减外,粗蛋白质、粗脂肪和总磷的含量都呈递增趋势。华西蟾蜍蝌蚪含粗蛋白质和粗脂肪均较高,是一种高蛋白质、高脂肪的种类。 相似文献
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氟致小鼠肾脏组织形态结构损伤的观察 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究氟致非骨相组织的损伤作用,选用20只20日龄的昆明小鼠,随机分为4组,每组5只,分别饲喂含0 mg/L、50 mg/L1、00 mg/L和150 mg/L氟化钠的饮水120 d,并通过石蜡组织切片观察氟对肾脏的损伤作用。研究结果表明:50 mg/L氟中毒组小鼠肾脏肾小管排列结构无异常变化,肾小球细胞出现空泡样病变。100 mg/L氟中毒组小鼠肾脏肾小管排列结构没有明显的异常,肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞出现空泡样变,并出现微核现象和凋亡样细胞,且近曲小管上皮细胞有脱落现象。150 mg/L氟中毒组小鼠肾脏肾小管排列结构轻微紊乱,肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞发生变性、坏死,肾小管内脱落的上皮细胞增多。 相似文献
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选取18日龄肉鸡80羽,随机分为4组,分别为组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ、组Ⅳ,其中组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ为试验组,组Ⅳ为对照组。每组5个重复,每个重复4羽(♀)。采用单因子随机分组设计,各组基础日粮相同。组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ分别添加1%、3%、5%的松针粉,对照组饲喂基础饲料+抗生素。试验期为56 d,在7周龄和9周龄时,分别从每个组每个重复选取5只接近平均体重的肉鸡进行屠宰试验和肉品质分析。结果表明:7周龄时,组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ和对照组的屠宰率各组间差异不显著(P>0.05);9周龄时,屠宰率对照组显著高于组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ(P<0.05),组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。7周龄、9周龄时,腹脂率各组间差异不显著(P>0.05)。添加松针粉对肉鸡肌肉pH值、蛋白质、脂肪、粗灰分影响不明显。4周龄、7周龄时,添加1%、3%、5%的松针粉能有效促进肉鸡脾脏、胸腺和法氏囊免疫器官的发育,促进机体的细胞免疫水平,提高机体的抗病能力,尤其是添加5%松针粉组促进免疫器官发育效果明显,7周龄时添加3%松针粉组效果较明显。综合考虑屠宰性能、免疫功能、经济效益,本试验中3%松针粉组饲喂肉鸡效果较明显,达到抗生素组水平。 相似文献