用单克隆抗体荧光标记技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体

用单克隆抗体荧光标记技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体程国富，陈毓川，苏雄，徐珊（华中农业大学牧医系武汉４３００７０）猪痢疾（ＳＤ）是生长育肥猪的一种严重的粘膜出血性腹泻病，其病原为猪痢疾密螺旋体（Ｔ·ｈ）。对该病的诊断常依据可疑猪的病史，临床症状和病理...     

鸡分泌型免疫球蛋白A相关研究进展

粘膜免疫已成为当前生物医药研究领域的又一热点。作为粘膜免疫主要防御因子的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)理所当然更加倍受研究人员的重视。近些年，随着家禽粘膜免疫的深入开展，围绕鸡SIgA的各类研究也逐渐开展起来了。家禽粘膜系统由家禽胃肠道、呼吸道及某些外分泌腺(如哈德氏腺、盲肠扁桃体)等与粘膜相关淋巴组织构成。家禽粘膜免疫主要通过SIgA来发挥作用。在     

葡萄球菌性跗关节炎肉鸡血液中T细胞与IL-2的动态变化

通过跗关节腔接种金黄色葡萄球菌(简称金葡菌),成功地复制了肉鸡葡萄球菌性跗关节炎的病理模型,运用ANAE-淋巴细胞-酸性非特异性酯酶组织化学染色法对所建立的病理模型进行了血液ANAE 淋巴细胞比例(%),以及运用放免方法对血清IL-2水平进行了动态研究。研究结果表明:从接种后第3天开始,试验组血液ANAE 淋巴细胞比例(%)持续升高,并在接种后第14天达到最大值53.40%,此后则下降,在试验期结束时(接种后第35天)回落至对照组水平。试验组血清IL-2水平在试验期内则一直高于对照组水平,在接种后第28天以前一直呈升高趋势,并在接种后第28天达到峰值9.428,此后血清IL-2的水平略有下降。经对试验组血清IL-2水平与血液ANAE 淋巴细胞比例(%)进行相关性分析发现:两者间呈显著正相关(P<0.05),相关系数为0.4579。     

实验性鸡葡萄球菌性关节炎的发病机制--血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和类风湿因子的动态变化

8周龄健康肉鸡 6 0只随机分成 2组 ;其中试验组 4 5只 ,对照组 15只。试验组每只鸡经关节腔注射鸡源致病性金黄色葡萄球菌 2 .5× 10 9CFU,复制鸡葡萄球菌性关节炎的病理模型 ,研究血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 6 (IL- 6 )、类风湿因子 (RF)的动态变化。结果表明 :接种后鸡血清中 RF水平自第 1天开始明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,第 2 8天达到峰值 5 .5。血清中 TNF-α的含量与对照组相比 ,在接种后第 3、5天差异显著 (P<0 .0 5 ) ,第 14天差异极显著 (P<0 .0 1) ;血清中 IL- 6的含量在第 2周上升的幅度最大 ,随后持续至少 3周 ,第 14天开始该因子水平显著高于对照组 (P<0 .0 1)。 3种细胞因子的含量均与关节炎的发展程度成正相关。     

感染新型鸭肝炎病毒雏鸭的SOD活性和MDA含量变化

用新型鸭肝炎病毒人工感染雏鸭，对感染雏鸭血液、肝、脑中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量进行了检测。结果显示：血清和肝组织中MDA含量在感染后第24 h极显著高于对照组(P＜0．01)，脑组织中MDA含量无显著变化。血清中SOD活性第24h极显著高于对照组(P＜0．01)，第96h极显著低于对照组(P％0．01)；肝组织SOD活性于感染后第24h显著低于对照组(P＜0．05)；脑组织中SOD活性无显著变化。提示：自由基参与了新型鸭肝炎的发生、发展过程。     

NO、TNF和IL-2与新型鸭肝炎病毒感染雏鸭肝脑组织损伤的关系

用新型鸭肝炎病毒人工感染9日龄健康樱桃谷雏鸭，对感染后12、24、48、96、168h和14d雏鸭血液、肝和脑组织中一氧化氮（NO）含量，血液中肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素2（IL-2）含量进行了测定，同时对感染雏鸭的组织病理学变化进行了观察。结果表明．血清中NO含量在接种后48h开始升高，一直持续到接种后96h，接种后7d恢复正常；肝脏组织中NO含量仅在接种后24h与对照组比较显著升高，在其他时间未表现有差异；脑组织中NO含量在整个试验期间没有变化。血清中的TNF和IL-2含量在接种后24h均表现升高，接种后96h降低，其他时间无改变。感染雏鸭的肝组织在接种后24h表现出血性坏死性肝炎变化，接种后48～96h呈增生性病变，而接种后各时期脑组织均呈非化脓性脑炎变化。由此表明，新型鸭肝炎病毒感染可导致雏鸭体内NO、TNF和IL-2发生变化，并且与肝组织损伤、疾病的发生发展有关。     

鸡白细胞介素-6活性MTT检测方法的建立

采用白细胞介素-6依赖细胞株B9建立了鸡白细胞介素-6活性的MTT检测方法。每孔培养细胞数在2.5×103~4×104范围内D值与细胞数显示有良好的线性关系,MTT的最佳保留时间为4 h,最低检测限为0.1 U/mL。应用该方法检测了健康艾维茵肉鸡25例,血清chIL-6活性为(4.33±0.75)U/mL,而25例葡萄球菌病患鸡血清chIL-6的活性为(14.05±6.87)U/mL,与健康肉鸡比较差异极显著(P<0.01),为该方法进一步临床应用奠定了基础。     

应用单克隆抗体的免疫组织化学法研究雏鸭体内鸭瘟病毒的分布

本实验应用了免疫组织化学的单克隆抗体间接酶标染色法，对人工感染鸭瘟病毒雏鸭的组织切片进行染色观察。旨在研究病毒在鸭体内分布，对其进行定位。研究结果显示，鸭的心脏、肝脏、脾、胸腺、肠、法氏囊、胰、肺、肾等组织的细胞浆内均出现了染色的特异阳性反应物。结果表明，鸭瘟病毒广泛分布于感染雏鸭的各种组织器官，并造成一定的组织病理变化。     

4株鸭源肠球菌的鉴定和致病性

对临床分离的4株鸭源肠球菌郑1株、郑2株、郑3株、北京株和1株粪肠球菌参考菌株进行了系统鉴定,并用SDS-PAGE和Western-blot技术对各菌株细胞壁蛋白图谱进行比较分析。结果5个菌株的形态、染色、生理生化特性均与粪肠球菌特性一致;它们均对青霉素、万古霉素和庆大霉素敏感而对四环素耐药;5个菌株人工感染雏鸭及小白鼠均有致病性,但各菌株间致病力存在差异,北京株最强,参考株最弱,其余3株介于北京株和参考株之间;各菌株的细胞壁蛋白经SDS-PAGE在相对分子质量33 370~131 690之间均显示数十条蛋白带,其中郑2株和北京株在相对分子质量66 840处均有1条染色较深的蛋白带,而用Western-blot分析显示抗北京株胞壁蛋白抗体只能检测到北京株相对分子质量为66 840的抗原蛋白。以上结果表明,这5个被检菌株为致病性粪肠球菌,且致病性以北京株最强。