苜蓿全基因组WRKY转录因子基因的分析

蒺藜苜蓿的基因组较小,遗传转化相对容易,是国际上广泛用于研究豆科植物的模式植物,其全基因组测序已经完成。WRKY转录因子是近年来在植物中发现的N-端含有WRKYGQK高度保守氨基酸序列的新型转录调控因子, 调节启动子中含W-box元件的调节基因和(/或)功能基因的表达, 从而参与植物的各种防卫反应。本研究以苜蓿基因组序列(Mt2.0)为材料,利用生物信息学方法分析苜蓿全基因组WRKY转录因子基因的数目、种类、系统发生学、保守基序,结果表明,苜蓿中共有28个WRKY基因,其中5个基因含有2个WRKY结构域,共含有33个WRKY结构域,根据其结构域特点可以分为3个大类,同时与水稻WRKY基因进行了比较研究,发现基因数目远少于拟南芥和水稻,同时研究证实苜蓿与水稻WRKY基因的起源和进化关系存在较大差异,显示出苜蓿WRKY进化有其独特的特点,此外分析苜蓿WRKY基因的保守motif共有46个,筛选得到WRKY结构域的5个保守motif。该研究对苜蓿WRKY基因功能的研究及进化具有重要的意义。     

兔排泄物中阿维菌类药物的高效液相色谱检测

建立了一种同时检测兔排泄物中阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、爱普菌素的高效液相色谱方法,样品用乙腈提取,Bond Elut C18柱净化,用三氟乙酸酐和1-甲基咪唑的乙腈溶液作衍生化试剂,然后加入冰乙酸和三乙胺进行衍生化反应30 min,用液相色谱荧光检测器检测,该方法检测兔排泄物在2～10 ng/g的添加范围内兔粪的平均回收率73.17%～101.30%,日内变异系数小于11.61%,日间变异系数小于11.31%,兔尿的的平均回收率在75.69%～101.84%,日内变异系数小于12.20%,日问变异系数小于10.880%.爱普菌素、阿维菌素、多拉菌素和伊维菌素在兔粪中的检出限为0.09～0.25ng.g-1,在兔尿中的检测限为0.04～0.28 ng·ml-1.4种药在兔t兔粪便和尿液中的定量限分别是2ng·g-1和2 ng·ml-1.该方法可靠、灵敏.可用于常规的残留检测.     

中国境外旅游者文明旅游的管理研究

中国境外旅游者在旅游当中所表现出来的不文明行为时常出现,正日益受到人们的关注。本文分析了中国境外旅游者不文明行为特征,强调了促进境外旅游者文明旅游的必要性,并在此基础上分别就广大潜在旅游者的教育、政府的公共服务、行政主管部门对国内旅行社及境外旅游者的管理几个方面进行了研究。     

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究：Ⅱ.免疫亲合色谱—酶？…

本文首次报道ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７１６０ｍｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ,Ⅱ柱为３７５０ｎｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ）。组织样品用甲醇提取,经ＩＡＣ柱分离纯化,ＥＬＩＳＡ检测,即ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法。本试验揭示,能组织样本提取纯化稀释液为介质制备扔标准曲线,其Ｉ５０值和斜率与以ＰＢＳＴ－１０％甲醇为介质的标准曲线相符     

沙门氏杆菌快速检测方法研究进展

作为一种重要的人畜共患病病原,沙门氏杆菌不仅会影响畜牧业的发展,还会给人类健康带来严重危害,因此对沙门氏杆菌的检测是非常必要的。传统的检测方法耗时费力,为了保障食品安全和人类健康,发展沙门氏杆菌的快速检测方法受到世界各国的日益关注。文章综述了分子生物学方法、免疫学方法、代谢技术检测法、生物传感器和仪器分析技术等几类常见快速检测方法的研究进展,为沙门氏杆菌快速检测技术的开发和应用提供参考。     

磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备

基于磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)公共母环(对氨基苯磺酰胺)结构,合成了两种具有该结构的半抗原∶2-(对氨基苯磺酸氨基)-4-噻唑乙酸(TS)和对氨基苯磺酰胺基苯甲酸(SS).采用碳二亚胺法合成了免疫原和包被原,分别免疫10只新西兰大白兔,制备广谱性磺胺类药物抗体.应用间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清的灵敏度和特异性,发现所有兔子对TS-BSA和SS-BSA均产生较高效价和特异性.其中SS-1号和TS-6号兔的血清灵敏度最好,效价分别为1∶80 000和1∶160 000,对10种磺胺类药物均有不同程度的识别能力.SS-BSA组IC50为257.9～6 590.9 ng/mL,而TS-BSA组IC50为12.9～586.1 ng/mL.结果表明,具有磺胺母环结构的半抗原TS和SS,可以应用于广谱性磺胺类抗体的制备.通过10只兔子免疫试验证明,应用SS获得的血清具有较高的簇特异性、相似的亲和性,优于TS.     

牛皮下注射爱普菌素注射剂后组织残留休药期的建立

建立牛肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织中爱普菌素残留的高效液相色谱荧光检测方法（HPLC-FLD）,并用统计学方法计算牛皮下注射爱普菌素后组织残留的休药期。牛组织样品经乙腈提取,过碱性SPE柱。组织样品添加浓度为2～100 ng·g^-1,平均回收率为70.5%～91.2%,变异系数为2.3%～11.5%;方法检测限和定量限分别为1和2 ng·g^-1。18头牛颈部皮下一次性注射爱普菌素注射液（1%）,注射剂量为200μg.kg-1体质量,分别在给药后第1、3、7、14、21、28天各屠宰3头取样,经HPLC-FLD分析。结果表明,皮下单次注射给药后,肌肉中药物残留量（2.1～9.3 ng·g^-1）低于美国规定的残留限量（10 ng·g^-1）;肝脏中药物残留量（29.8～625.1 ng·g^-1）低于美国、欧盟和CAC规定的残留限量（分别为4 800、1 500和2 000 ng·g^-1）;肾脏和脂肪中药物残留量（4.1～112.5ng·g^-1和2.1～96.4 ng·g^-1）都低于欧盟和CAC规定的残留限量（300和250 ng·g^-1）。采用欧盟官方推荐方法对残留浓度-时间数据统计分析,牛肌肉、肝脏、肾脏、脂肪休药期均为0 d。     

鲟鱼肌肉中氢溴酸常山酮残留检测的高效液相色谱法

建立了检测鲟鱼肌肉中常山酮残留的高效液相色谱法.样品经胰蛋白酶酶解,乙酸乙酯提取,再用0.125 mol/L的醋酸铵缓冲液分离,经Oasis-HLB柱净化,以乙腈-乙酸铵缓冲液-水为流动相（含0.1%三乙胺）,反相液相色谱-紫外检测法检测,检测波长243 nm.添加浓度为20、50、100和200μg/kg时,回收率分别为67.5%、77.4%、77.5%和71.6%,变异系数分别为15.6%、12.4%、0.4%和1.2%.方法检测限为15μg/kg,定量限为20μg/kg.     

马杜霉素在鸡组织中残留消除及临床毒性的研究

本文报道以3.0、5.0、7.0和9.0mg/kg马杜霉素剂量水平添加到饲料中饲喂AA肉鸡,研究马杜霉素对肉鸡的毒性作用及其在鸡组织中的残留消除。从临床症状、增重与饲料转化、死亡率、血清生化参数以及组织病理学等方面研究结果表明,饲料中添加3.0－5.0mg/kg剂量马杜霉素对肉鸡是安全的,未见任何毒副作用,而7.0-9.0mg/kg剂量则引起肉鸡中毒,中毒表现为,增重和饲料转化率明显下降,血清AST异常升高,心脏和肝脏出现病理变化。残留消除研究表明,马杜霉素主要残留于肉鸡的脂肪和肝脏,其次是肾脏,肌肉中残留最少。马杜霉素以5.0mg/kg剂量添加于饲料中饲喂肉鸡,停药2－3d,肉鸡组织中马杜霉素的残留量低于最高残留限量的规定。.