两种葫芦科病毒的分子检测和致病性研究

 小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)是浙江及其周边地区侵染葫芦科植物最主要的病毒种类。本文通过RT-PCR和基因克隆,获得了侵染南瓜的CMV杭州分离物(HZ01S10)的3'端序列,通过CP氨基酸序列同源性分析,确定其属于CMV亚组I;分别以³²P标记的ZYMV和CMV基因组cDNA作为探针,用RNA点杂交方法定点检测了浙江地区自然感病的葫芦科作物中以上2种病毒的发生情况。ZYMV和CMV在葫芦科作物上的发生表现出显著的季节性差异:夏季CMV发生普遍,只有部分南瓜和甜瓜感染ZYMV;ZYMV则主要发生在秋季,同一时期未检测到CMV。此外,幼苗期接种试验显示:以上2种病毒对西葫芦(早青一代)、丝瓜(中长)、黄瓜(津绿4号)的致病性存在明显差异,供试西葫芦对ZYMV比较敏感,供试丝瓜对CMV更敏感,而供试黄瓜品种对以上2种病毒均表现抗病。复合侵染在丝瓜和西葫芦上加重病害发生程度。     

从动盘总成及摩擦片的损伤与维修

从动盘总成是离合器的主要部件之一,由摩擦衬片（即摩擦片）、从动钢盘和从动盘毂等零件所组成。其技术状态的好坏将会直接影响离合器的工作。下面将其主要损伤形式与维修方法介绍如下。     

[噻唑基-2-14C]-毒氟磷在产蛋鸡体内的分布

为阐明毒氟磷在动物体内的分布代谢特征,并深入认识毒氟磷的安全性和膳食风险,本研究选择白羽产蛋鸡为试验对象,[噻唑基-2-¹⁴C]-毒氟磷为同位素示踪剂,研究了毒氟磷在产蛋鸡体内的排泄分布特征。结果表明,毒氟磷在产蛋鸡体内排泄水平高,首次给药24 h后即排泄出当日给药量的82.04%,连续给药7 d后的累计排泄率为82.24%。毒氟磷在组织中的总残留仅占引入量的3.81%,其中胃中残留量占比相对最高,占引入量的2.14%,而肺、肾、脂肪、胰腺中的放射性残留量均不超过引入量的0.01%,膳食评估结果表明在上述内脏组织中的毒氟磷残留无膳食风险。蛋、肌肉、心、脑、脾、卵巢等组织中未检测到放射性残留。本研究为科学评价毒氟磷在家禽中的安全性提供了试验依据。     

一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ对寄主中黄瓜花叶病毒含量的影响

茉莉酸(Jasmonic acids, Ja)为一种新型的植物内源生长激素,广泛存在于自然界中,其主要生物学效应是对生长的抑制作用和对衰老脱落的促进作用,如抑制非休眠种子的萌发、强烈抑制根系的生长、促进块茎的形成等.Ja 作为关键的化学信号物质在植物损伤和病原菌侵染过程中具有重要作用.本实验以一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ (9,10-二氢茉莉酸丙酯,9,10-Propyl dihydro-jasmonate)作为研究对象, 采用RNA点杂交方法对用不同浓度PDJ处理的假酸浆叶片中的黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量进行测定, 结果表明:在处理后不同的时间段和不同的浓度条件下,PDJ对黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量具有较大差别的影响.处理早期(7 d),与对照相比,各浓度PDJ促进CMV基因组RNA3的复制;随着时间的推移(处理21 d),0.001～5 mg/kg浓度PDJ处理的假酸浆叶片中CMV-RNA3负荷量的积累均明显低于对照,而高浓度50 mg/kg PDJ处理的高于对照,说明PDJ对CMV的促进作用随时间的增加逐渐消失;至处理42 d,对照中CMV RNA3的积累显著地大于各浓度的PDJ处理,显示出在处理后期PDJ对CMV较强的抑制作用,而且这种作用随PDJ浓度的降低而增强.     

氧化应激对Vero细胞的损伤及EGCG的保护作用

研究了氧化应激对肾细胞Vero细胞的损伤及EGCG的保护作用。用MTT、吖啶橙染色和DNA凝胶电泳等方法研究了H2O2和Cr6+应激对Vero细胞的损伤,及EGCG对凋亡细胞的保护作用及其机理。结果表明,H2O2和Cr6+剂量效应地抑制Vero细胞活性,IC50分别为175.6和9.8mgL-1;其中50 mgL-1 H2O2和400 mgL-1/2h Cr6+可诱导Vero细胞凋亡。0~60 mgL-1 EGCG有效抑制H2O2和Cr6+应激引起的细胞活性下降,且40 mgL-1 EGCG显著抑制细胞凋亡。对于Cr6+所诱导的细胞凋亡,EGCG的保护作用与EDTA和Vc的协同作用效果相当,表明清除活性氧和络合金属离子都有助于减轻Cr6+应激损伤。可见,EGCG通过清除活性氧和络合离子有效地保护了肾细胞免受应激损伤,这对易遭受活性氧损伤的肾脏无疑具有一定的临床价值。