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为了探究重链抗体在骆驼免疫保护中的生物学作用,本研究利用Protein G和Protein A亲和层析纯化新疆双峰驼血清中总IgG和重链抗体IgG2,并免疫昆明小白鼠制备抗双峰驼总IgG和抗双峰驼重链抗体IgG2的多抗血清;通过ELISA检测双峰驼在体液免疫应答过程中针对spaA-N、溶菌酶和蒜氨酸酶3种抗原的重链抗体的滴度变化。结果从新疆双峰驼血清中亲和层析纯化出天然重链抗体IgG2,蛋白质分子质量约为46 ku;免疫昆明小白鼠后获得抗双峰驼总IgG多抗血清的效价为1∶204800,抗双峰驼重链抗体IgG2多抗血清的效价为1∶6400。在spaA-N免疫骆驼诱导的体液免疫应答过程中,重链抗体IgG2出现延迟反应。3种蛋白均能诱导抗原特异的IgG2亚类重链抗体的产生。 相似文献
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[目的]确定丹毒丝菌新疆分离株C43150表面保护性抗原A(SpaA)中起免疫保护作用的主要区段.[方法]PCR扩增SpaA氨基端(spaA-N)和羧基端(spaA-C)基因片段,测序鉴定正确后,克隆至pGEX4T-1原核表达载体,以IPTG诱导表达重组蛋白r-SpaA-N及r-SpaA-C,表达产物经亲和层析柱纯化后,免疫小鼠制备抗血清,Western Blot及ELISA检测重组蛋白的免疫反应性,最后分别从主动和被动免疫两方面分析r-SpaA-N及r-SpaA-C对小鼠的免疫保护活性.[结果] Western Blot结果表明抗r-SpaA-N及r-SpaA-C小鼠血清均能与天然的SpaA在64 kDa处特异性结合,ELISA检测也表明重组表达和纯化的融合蛋白都具有免疫原性,但小鼠免疫保护实验显示只有r-SpaA-N对攻毒小鼠保护作用显著(P<0.01).[结论]丹毒丝菌新疆分离株C43150表面保护性蛋白A起主要保护功能的核心区段为氨基端,且是由抗体介导的免疫保护. 相似文献
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【目的】克隆骆驼补体C3d基因,分析序列特征,为其佐剂效应研究提供依据。【方法】利用Trizol试剂,从骆驼肝脏组织提取总RNA,并反转录获得cDNA。设计C3d特异引物,应用PCR技术扩增C3d序列,构建到pMD18-T载体。将重组质粒转入感受态菌株并双酶切鉴定。使用ClustW,DNAstar, Swiss-Model软件对构建的重组C3d基因序列进行同源性比对,建立系统进化树并对其二级和三级结构进行预测和分析。【结果】采用骆驼C3d特异引物,PCR扩增获得大小为909 bp的骆驼补体C3d基因。构建至T载体并转入大肠杆菌,获得阳性转化克隆。克隆的新疆双峰驼C3d序列与骆驼科C3d基因之间的同源性在97%以上,与牛和猪C3d基因同源性为88%,与兔和人的C3d基因同源性为83%。对骆驼C3d蛋白采用Swiss-Model软件进行序列分析,预测该蛋白质的二级结构主要由α-螺旋和β-折叠组成,该蛋白可能具有良好的免疫原性和免疫结合活性。【结论】C3d基因在进化中较为保守,在骆驼免疫中可以采用亲缘关系较近的其他动物来源的C3d作为分子佐剂从而增强骆驼免疫效果。 相似文献
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当前我国栽培平菇的方法利用到的材料种类比较纷繁,主要讨论了怎样使用玉米秸秆作为生产原料栽培平菇。该技术的运用相较其他技术而言,具有一定的优越性,不仅能够有效利用玉米秸秆,使废物再利用实现可循环,为农民群众处理玉米秸秆提供了技术支撑,而且在当前大气污染防控的严峻形势下,能够对农民群众焚烧玉米秸秆这一污染空气的不安全做法得到更有效的控制和引导。种植平菇既有环境效益,为改进生态环境作出一定贡献,同时也可以为种植者带来较高的经济回报,产生可喜的经济效益,一举两得,故此应该大力发展此技术并不断予以改进提高。从平菇种植的一般情况展开探讨,以期对平菇的栽种具有一定的参考作用。 相似文献
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<正>2020年,中央一号文件指出,要加强对绿色食品、有机农产品、地理标志农产品的认证和管理,增加优质绿色农产品供给。“十四五”时期是全面推进农业绿色转型和高质量发展的关键时期,绿色食品应在深化农业供给侧结构性改革、推动农业高质量发展、提供优质农产品、满足消费升级、服务乡村振兴、促进农民增收等方面发挥更大作用,应受到各级农业农村部门的高度重视。2021年,中国绿色食品发展中心组织编制了《绿色食品产业“十四五”发展规划纲要(2021—2025年)》, 相似文献
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张新明,江西省赣县三溪人,1990年高中毕业后,南下广东、深圳、珠海,北上浙江、上海务工,他先后干过小工、水泥工、木匠、装修工,利用自己学到的技术和积累的资金,当了小老板,是当地小有名气的打工仔。2005年12月的一天,张新明回乡探亲,和朋友小聚时,谈到了人生感悟和在外创业的艰辛。当听朋友说到江西已经全面实行林业产权制度改革,林业是一项潜力大、值得投资的项目时,张新明心中久久不能平静。 相似文献
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新疆双峰驼抗血清中重链抗体的分离鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】初步探讨新疆双峰驼Camelus bactrianus免疫系统中缺失轻链的重链抗体(heavy chain antibody,HCAb)是否具有常规抗体的基本抗原结合功能。【方法】采用本实验室构建的丹毒丝菌表面蛋白A原核表达载体pGEX4T-1-spaA-N,进行诱导表达,纯化获得重组抗原GST-SpaA-N,免疫双峰驼制备抗血清,经Protein A和Protein G亲和层析从抗血清中分离重链抗体及常规抗体,Western blotting鉴定重链抗体的抗原结合特性,间接ELISA比较重链抗体与传统抗体的抗原结合活性。【结果】经过Protein A/G纯化得到了IgG2。对各组分进行分析初步表明重链抗体约占血清IgG的60%—80%。采用GST-SpaA-N免疫双峰驼可以诱导高滴度的IgG2型重链抗体,在5次免疫后,骆驼抗spaA-N特异的重链抗体IgG2多抗血清的效价为1﹕51200。Western blotting结果显示分离的多克隆重链抗体可特异结合SpaA天然抗原,且ELISA分析结果表明重链抗体与常规抗体具有相同的抗原结合活性。【结论】首次从双峰驼抗血清中成功分离获得具有与常规抗体相同生物学功能的多克隆重链抗体,提示重链抗体可能在骆驼免疫防御中发挥重要作用。 相似文献