转透明颤菌血红蛋白基因杨树的再生及其生长量初步测定

采用农杆菌介导法,将透明颤菌血红蛋白Vitreoscilla hemoglobin(VHb)基因vgb导入银腺杨(Populus alba ×P.glandulosa).以经无菌培养的叶片为外植体,通过450个叶盘与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404共培养,将植物双元表达载体pPZV中vgb基因导入银腺杨基因组,经卡那霉素筛选后,共获得60株卡那霉素抗性植株.经PCR特异性扩增和Southern点杂交分析,证明其中52株再生植株基因组DNA中整合了vgb基因.RT-PCR分析结果表明,vgb基因在其中的44个株系中获得表达.在2年温室生长条件下,转基因无性系的外部形态与对照相比无显著差异.但在株高和地径上,有3株转基因无性系较对照植株有明显增加.     

不同种源非洲桃花心木对寒害的生理响应

2012年1月,广东省经历了2次低温天气.本研究分别于2次降温后（3 ～10℃）和正常温度下（＞10℃）采集广州和肇庆2片试验林的非洲桃花心木叶片,测定相对电导率（REC）、丙二醛（MDA）含量、脯氨酸（Pro）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化物酶（POD）活性5个指标,分析了27个种源对寒害的生理响应模式.结果表明,2次降温均显著提高了非洲桃花心木的REC、Pro含量、SOD和POD活性.相比首次降温,第2次降温后,Pro含量、SOD和POD活性进一步提高,而REC则有所降低,表明植株在2次降温后进一步启动了自身的保护系统.该研究应用耐寒隶属函数值对27个种源进行综合评价,初步选出来自马里（种源10#,20#,22#）和布基纳法索（种源30#,31#,32#）的6个耐寒表现优异的种源.     

台风“天鸽”对湿加松无性系种子园的影响*

2017年第13号台风“天鸽”正面袭击台山，给台山红岭种子园内的湿加松(Pinus ellittii × P. caribaea)无性系种子园造成巨大损失，一半的球果和三分之一的单株遭到严重破坏。经过调查发现，单株的受害类型可以分为两类，一种类型主要表现为枝干受损，其中主干破裂占受害株的55%，侧枝受损占36.4%，而主干破裂的类型以基部破裂为主；另一种类型表现为根系受损，只占8.7%，包括倾斜、倒伏和连根拔起。不同湿加松无性系的受灾情况存在明显差异，参与分析的53个无性系中，8个无性系（EHA10-1，EHA11-1，G3-1，G3-3，G5-1，G7-1，S95-20-1 和 S95-20-3）没有遭受风害， 7个无性系（G11-4，G3-4，A05H06-1，B16H02-1，G1-1，G5-4，S95-54-1）受灾率超过80%，说明湿加松的抗风性在基因型间存在差异。跟踪调查2016-2019年湿加松种子园的种子品质，发现台风当年（2017年）的出种率和千粒重不受影响，但发芽率明显降低；台风次年出种率下降，但千粒重和发芽率不变。说明台风影响了球果的发育，但仍可对球果进行采摘利用。     

松树体细胞胚胎发生技术的发展与应用

植物体细胞胚胎(SE)发生作为上世纪中叶以来最强大的生物技术之一,相比其它无性繁殖方法,具有诸多优势。松树是世界上重要的商品林树种,松树SE研究是开展松树育种与繁育的热门领域。文章综述了松树SE的研究历程,对松属树种的SE发生情况进行了归纳;详细阐述了体胚发生技术在松树新品系选育(包括无性系林业及遗传改良)、苗木扩繁、遗传转化及杂种后代胚拯救方面的应用实例,以期为SE技术在松树上的利用提供参考。     

加勒比松异砧高位嫁接效果分析

在台山市红岭种子园内,以湿地松(Pinus elliottii)精选种子园3个无性系的12 a生树木为中间砧木、加勒比松(P.caribaea)3个变种共17个无性系的新梢为接穗,研究砧木无性系、接穗无性系对接穗嫁接成活率、成活穗条直径、长度生长、雌雄花量的影响。结果显示:3个砧木中无性系B118是嫁接亲和力高的砧木无性系,B2、B6、C4、C5、H10、H17是嫁接亲和力高的接穗无性系。方差分析结果显示砧木无性系对成活穗条直径和长度生长都有极显著的影响,其中嫁接在砧木A05上的接穗生长量最大。开花性状方面,在全部的成活接穗中,有18.07%的接穗产生雌球花,6.02%的接穗产生雄花序,成活接穗的雌、雄花量平均值分别为0.67个和1.37条。参试的17个接穗无性系中,有7个无性系的成活接穗共产生了56个雌球花、114条雄花序;砧木无性系间对成活接穗的促花效果存在差异,无性系B118的促花效果最佳。     

基于针刺仪测定技术的湿地松木材密度间接选择效果

【目的】木材密度是林木重要的经济性状,在广东湿地松第2轮遗传改良中被列为目标性状之一。本研究比较了针刺仪与传统体积法在评价湿地松木材密度上的效果,分析了湿地松材性与生长性状的遗传变异规律,为选育速生优质的湿地松种质提供理论与方法。【方法】以广东省台山市18年生的32个湿地松自由授粉家系为材料,在测定林中对活立木木材阻力与去皮直径进行快速测定;并在同一株树上利用生长锥钻取木芯,以体积法测量木材基本密度。利用Asreml统计软件对研究性状间的相关性、性状的遗传力、选择效率等进行估算。【结果】1)单株木材阻力与木材密度在单株水平上呈表型正相关(0.659),为此建立了利用木材阻力原值预测木材密度的线性回归方程(模型R~2=0.393)。2)木材密度与木材阻力的遗传相关性更强(0.738),二者在家系水平受到中等程度的遗传控制;木材阻力的家系平均遗传力(0.618)高于木材密度的家系平均遗传力(0.410)。利用木材阻力值进行家系水平的间接选择,其间接选择效率为91%。表明可以利用针刺仪法进行湿地松木材密度的间接选择。3)为了消除针刺仪刺入木材过程中由于摩擦引起的阻力值上升趋势,在数据分析前,对阻力值做了校正。校正阻力值的遗传力,其与木材密度的表型与遗传相关无明显提高。4)湿地松的去皮直径遗传力在家系水平为0.596,去皮直径与木材密度和木材阻力无显著的遗传相关性,但表型相关达到显著水平,分别为0.272和0.493。这暗示着,改良湿地松生长性状,不会降低木材的密度。【结论】针刺仪法具有快速、无损、相对准确的优点,可用于湿地松活立木木材密度的间接评价与去皮直径的测定,在湿地松材性与生长性状的遗传改良中可发挥重要作用。在根据木材材性或生长性状选择湿地松优良个体中,为获得较可靠的选择效果,宜采用家系选择+家系内单株选择的合并选择方法。     

分子标记在松树遗传与进化研究中的应用

松树是世界上分布最广且最具经济价值的树种之一。近年来随着DNA分子标记技术的发展,分子标记已经广泛应用于松树的遗传多样性、亲缘关系、遗传图谱构建、基因定位及分子标记辅助选择等方向。本文从遗传多样性、亲缘关系、遗传图谱构建、基因定位及标记辅助选择等角度,评述了松树遗传与进化上常用的DNA分子标记如RFLP、RAPD、AFLP和SSR等的应用情况和进展。在遗传多样性方面,DNA分子标记技术已成为鉴定松树种间、种内遗传多样性的有效手段,并用于指导杂交育种;在亲缘关系判定方面,可以在分子水平上阐明生物系统演化及分类情况,揭示育种亲本的选配和种质资源的有效利用;在松树遗传图谱构建和基因定位及标记辅助选择方面也取得了显著进展,构建了二十多张连锁图谱,并对其生长、材性和抗性等性状进行了基因定位,获得了一些重要的与抗病相连锁标记。     

转双价抗蛀干害虫基因杨树的获得及其抗虫性鉴定

随着我国大规模人工林的发展,天牛等高危害蛀干森林害虫蔓延肆虐。目前,防治蛀干森林害虫主要采用人工机械防治和化学防治等。由于绝大多数蛀干害虫具有繁殖速度快、生活场所隐蔽、世代较长并不整齐等特点,防治难度较大,所以到目前为止,由蛀干森林害虫所导致的虫害并未得到根本的控制,并且呈逐年加重态势,对林业生产和生态环境建设影响严重。如在我国的华东、华北、东北、西北等地都有大片杨树(Populusspp.)、柳树(Salixspp.)被光肩星天牛(AnoplophoraglabripennisMotsch.)毁灭的报道。三北防护林工程,遭受天牛的危害严重,完全失去利用价…     

湿加松MSAP反应体系建立及引物筛选

为建立适合湿加松的MSAP（甲基化敏感扩增多态性）反应体系,以湿加松幼嫩针叶为材料,建立了湿加松MSAP反应体系,即：400ng基因组DNA用EcoRⅠ,HapⅡ或MspⅠ各3U,37℃保温24h。预扩增体系为：酶切-连接产物1μL、上下游引物各1μL、2×PCR mastermix10μL和ddH2O2 7μL。20μL选择性扩增体系中,含有10倍稀释的模板DNA2μL、上下游引物各1μL、2×PCR mastermix10μL和ddH2O2 6μL。利用反应体系,筛选出了13对适宜于湿加松MSAP分析的引物,建立的MSAP反应体系可用于湿加松基因组DNA甲基化差异分析。     

湿地松生长性状遗传参数的年度变化趋势

对广东省台山市红岭种子园内由60个自由授粉家系所建立的湿地松（Pinus elliottii）子代测定林开展了多年度持续观测,根据其2 a、4 a、6 a、17 a、20 a、22 a生的生长性状数据,分析了该林分的生长表现并估算了树高、胸径和材积的遗传参数。主要结果如下：湿地松子代测定林树高、胸径和材积遗传变异系数分别为3.14%～6.87%、3.87%～5.49%、10.12%～14.62%,年度变化趋势表现出较高的一致性;树高、胸径、材积生长受中等程度的遗传控制,其单株狭义遗传力分别为0.27～0.46、0.21～0.38、0.25～0.40,家系平均遗传力分别为0.56～0.74、0.50～0.75、0.56～0.76。总体上生长性状在成熟期（17 a、20 a、22 a生）的遗传力大于在幼龄期（4 a、6 a生）的遗传力; 6 a生树高、胸径、材积与成熟期相同性状的年-年遗传相关系数为0.57～0.74,成熟期树高、胸径、材积的年-年遗传相关系数为0.99～1.00。如果以22 a生材积作为目标性状,4 a生前根据树高,之后根据材积作早期选择,可期望获得较高的选择效益。