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樱桃谷鸭CD3ε胞外区多肽原核表达、抗体制备及初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR技术从樱桃谷鸭总RNA中克隆CD3ε基因ORF序列(DuCD3ε),通过生物学软件分析,切除信号肤和跨膜区,将胞外区cDNA(DuCD3ε)插入表达栽体pET-28a.构建了E.coli BL21(pET一28a/DuCD3ε)原核表达系.经IPTG诱导表达、蛋白纯化,制备兔抗DuCD3ε多克隆抗体.应用免疫组织化学SABC方法在樱桃谷鸭外周血液涂片上进行初步应用.结果显示,DuCD3ε胞外区序列长252 bp,编码83个氨基酸.SDS-PAGE和Western-blot分析证实重组DuCD3ε(rDuCD3ε)在BL21大肠杆菌中表达.表达蛋白相对分子质量约为14000,经3次免疫后,通过问接ELISA测定兔抗rDuCD3ε蛋白多克隆抗体效价为1:12800.在鸭瘟病毒感染后不同时间,对照组CD3+T淋巴细胞数占淋巴细胞总数的百分比为28%~47%,试验组CD3+T淋巴细胞百分比为32%~77%,在感染后1~3 d外周血液中CD3+T淋巴细胞比值急剧升高,3 d以后比值缓慢下降.结果表明,本试验成功表达CD3ε胞外区多肽,制备的兔抗樱桃谷鸭CD3ε多克隆抗体可用于鸭外周血中CD3+T淋巴细胞标记染色,具有较好的特异性. 相似文献
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为了摸清种子包衣后对发芽率的影响程度,笔者对包衣种子与未包衣种子作了比较试验。一、试验材料、方法 1.样品来源:扦取我省忻州市种子加工厂的包衣和未包衣种了样品共18个,其中玉米12个,高粱4个。谷子2个。玉米、高粱为1990年产种,谷子为1989年产种。 2.试验方法.包衣与未包衣(CK)的种子统一按国家种子检验规程规定进行,即高梁、谷子为100 相似文献
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<正>在泰国清迈省举行的猪病研讨会上,David Burch说:"对于PRRSV的研究已经引起了大家的广泛关注,并且取得了一定的成果。但是同时又出现了一些新的问题,就是在欧洲和其他的一些国家发现了新的变异毒株,疫苗对变异株是否有效还不得而知。"由于大家对蓝耳 相似文献
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