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为了表达牛环形泰勒虫(Theileria annulata)截短HSP70基因编码蛋白并研究该蛋白的结构与功能特性,本研究扩增牛环形泰勒虫HSP70目的基因并构建重组质粒pMD18-T-HSP70,选取其他种的同源HSP70蛋白序列构建系统进化树;利用生物信息学方法分析HSP70基因编码蛋白的氨基酸组成、基本理化性质、亲疏水性、跨膜区结构、信号肽、可能的磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白的二级结构和三级结构;对重组蛋白HSP70进行蛋白互作网络分析;构建原核表达载体pET28a-HSP70,筛选诱导表达条件,镍柱纯化重组蛋白及检测反应原性。结果显示,牛环形泰勒虫HSP70蛋白序列与小泰勒虫的序列同源性较高,蛋白分子质量为42 ku,理论等电点(pI)为5.61,属于酸性亲水性蛋白,无跨膜区及信号肽;蛋白功能预测结果显示,HSP70包含32个可能的磷酸化位点,亚细胞定位分析显示该蛋白主要分布于细胞质。蛋白质二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占39.18%、8.51%、30.41%和21.91%。蛋白互作网络构建结果显示,与HSP70相互作用的蛋白主要为HSP90家族成员,另外还有伴侣蛋白GrpE同系物,预示着HSP70可能在细胞内与HSP90形成复合体发挥作用。本试验成功构建原核表达载体,获得了大小约为48 ku的融合蛋白,以0.6 mmol/L IPTG于37 ℃诱导5 h,蛋白表达较好;点状印迹及Western blotting结果表明,表达产物可被自然感染的牛环形泰勒虫阳性血清识别,具有良好的反应原性。本试验结果为进一步探讨牛环形泰勒虫HSP70功能机制提供了理论依据。 相似文献
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以1年生杨树幼苗为研究对象,研究了不同盐碱胁迫对杨树幼苗生理特性的影响。结果表明:低浓度的中性盐胁迫、碱性盐胁迫对杨树幼苗生长的抑制作用并不明显,随着盐碱浓度的增加,抑制作用逐渐增加。盐碱胁迫会启动杨树幼苗的防御基质,其脯氨酸含量及可溶性糖含量有所提升,SOD活性及CAT活性得以提高。综上所述,杨树幼苗对盐碱胁迫具备一定的耐受性,其幼苗对碱胁迫的耐受力略微低于中性盐。 相似文献
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沙蒿尖翅吉丁防治的探讨 总被引:1,自引:1,他引:0
文章通过利用不同药剂对沙蒿尖翅吉丁进行机动喷雾防治试验,筛选出防效较好的生物制剂森得保可湿性粉剂、化学药剂30%氯氨磷乳油,为保护飞播造林建设成果、沙蒿尖翅吉丁大面积防治提供科学依据。 相似文献
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奶牛胎衣不下是在奶牛生产中常见的产后期疾病之一,母畜产出胎儿后,不能在正常时间内将胎膜全部排出称为胎衣不下或胎衣停滞。各种家畜都可发生,以牛多见。各种家畜排出胎衣的正常时限为马1.5h、牛12h、山羊2.5h、绵羊4h。据资料分析,本病在我国的发病率约10%左右,国内外的大量文献报道,正常分娩的奶牛群,胎衣不下的发病率约为3%~18%,异常分娩的牛群,如双胎、难产或患有布氏杆菌病等,发病率则为30%~50%。本病不仅影响奶牛的产奶量和牛奶的品质,还影响奶牛的繁殖,给奶牛业造成了很大的经济损失,严重困扰着奶牛的发展。 相似文献
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