1株奶牛源约翰逊不动杆菌的分离鉴定

旨在了解从奶牛垫料中分离得到1株革兰阴性菌的病原特征,本研究通过形态学观察、生化试验、染色镜检、16S rDNA同源性分析等方法对分离菌进行鉴定,并采用药敏试验测定药物敏感性,小鼠攻毒试验确定分离菌株毒力情况.结果 表明,分离菌为革兰阴性菌;扩增的16S rDNA序列长度为1283 bp,与约翰逊不动杆菌的核苷酸相似性...     

黄芪发酵前后黄酮含量及指纹图谱比较研究

应用HPLC-UV法比较发酵前后黄芪中4种黄酮含量及色谱图变化,旨在为发酵黄芪制品提供质控数据。采用色谱条件为Inertsustain C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水系统,梯度洗脱,检测波长:254 nm,柱温:25℃,流速:1 mL/min,进样量:20μL。该方法中毛蕊异黄酮苷在12.34~790 mg/L、刺芒柄花苷在5.0~320 mg/L、毛蕊异黄酮在4.53~290 mg/L、芒柄花素在9.53~610 mg/L与峰面积呈良好的线性关系,不同成分色谱峰分离程度较好。测定结果表明,黄芪经发酵后,毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量发生显著变化,其中发酵黄芪含量分别为12.236±0.232、0.201±0.021和0.737±0.041 mg/g,对照黄芪含量分别为0.327±0.013、5.453±0.078和12.847±0.118 mg/g;发酵前后色谱图差异显著,说明生物发酵可使黄芪成分及其含量发生较大变化,试验可为黄芪发酵制品的质量控制提供借鉴。     

发酵黄芪对蛋鸡生产性能、蛋品质及抗氧化能力的影响

正黄芪是临床上较为常用的补气中草药之一,含有多糖、黄酮、皂苷、生物碱等多种生物活性物质,具有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。现代医学研究表明,黄芪具有增强机体免疫力、抗炎、抗肿瘤等药理活性及保健功效[1]。黄芪为豆科植物,其细胞壁是由纤维素、半纤维素、果胶质和木质素等成分构成的致密结构。黄芪的有效成分大多包裹在致密的细胞壁内,提纯时不易析出。为提高黄芪有效     

百脉根组氨酸蛋白激酶LHK1的表达及活性鉴定

为研究LHK1蛋白的功能,构建了pPub-LHK1∶AG-GFP和pFastBac-LHK1表达载体,分别在烟草叶肉细胞和昆虫细胞表达百脉根组氨酸蛋白激酶LHK1跨膜蛋白。结果表明:在烟草和昆虫细胞中LHK1蛋白都能表达,且表达的蛋白在体外都能磷酸化底物(组氨酸转移酶HP1蛋白),具有组氨酸蛋白激酶活性。     

东北民猪源停乳链球菌的分离鉴定与药敏试验

为分离东北民猪源停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)并鉴定其生物学特性,从齐齐哈尔市某东北民猪场死亡仔猪的肝脏及其关节液样品中分离病原菌,通过生理生化试验和分子生物学试验鉴定分离菌,研究了分离菌的致病性和药物敏感性。结果表明,分离到革兰阳性球菌1株,生化指标与停乳链球菌停乳亚种相符。系统进化树分析表明,分离菌株与停乳链球菌停乳亚种参考菌株的同源性为97%~98%,其中与AB537921.1(Japan)同源性最高,达到98.99%,进一步从分子水平鉴定该菌为停乳链球菌停乳亚种。以0.2mL/只(3.2×10^9CFU/mL)接种量感染小鼠,发病率和病死率均为100%。分离菌对多黏菌素B、阿莫西林、氨苄西林、环丙沙星、氧氟沙星、庆大霉素、氟苯尼考、林可霉素、新霉素均敏感,仅对罗红霉素耐药。     

解淀粉芽孢杆菌固态发酵黄芪的安全性试验

为了评价解淀粉芽孢杆菌发酵黄芪的安全性,试验采用急性毒性、慢性毒性和小鼠骨髓细胞微核试验对小鼠的脏器系数、病理变化、血液生理生化指标及致突变性进行研究。结果表明:小鼠急性经口最大耐受剂量(MTD)为20 000 mg/kg,临床及病理学检查均未出现病理组织学变化;慢性毒性试验小鼠体征无异常变化,未出现死亡,在停药后第28天各组间小鼠脏器系数均差异不显著,各组间的血液生理生化指标差异不显著;小鼠骨髓细胞微核试验检测无致突变性。说明固态发酵黄芪粉安全性良好,对小鼠安全无毒,属于无毒性物质。     

板芪益肺散药效学试验

为了研究自拟中药方剂板芪益肺散的止咳、平喘、祛痰和抗炎效果,本试验选用清肺散为对照中药,采用浓氨水引咳法、组织胺和乙酰胆碱引喘法、小鼠气管酚红排泌法和二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型法,检测了高、中、低剂量板芪益肺散[35.00、17.50、8.75 g/(kg·bw)]的药效。结果显示,板芪益肺散与清肺散的止咳作用相近(P>0.05),但2种中药方剂的止咳效果均明显低于阳性对照枸橼酸喷托维林(P<0.01);板芪益肺散具有良好的平喘效果,且其高剂量组平喘效果优于阳性对照氨茶碱与清肺散(P<0.01);板芪益肺散祛痰效果极显著优于阳性对照盐酸溴己新(P<0.01),但与清肺散作用相近(P>0.05);板芪益肺散具有一定的抗炎效果,抗炎效果极显著优于清肺散(P<0.01),但极显著低于阳性对照氢化可的松(P<0.01)。结果表明,自拟方剂板芪益肺散较传统方剂清肺散具有更为良好的平喘功效,止咳、祛痰作用明显,同时还有一定的抗炎活性,为该方剂的临床应用提供了数据支持。     

牛粪有机肥与化肥配施对土壤重金属形态的影响

为缓解畜牧业产能的提高和日益严峻的畜禽粪污污染之间的矛盾,充分挖掘畜禽粪污肥料化利用的潜力,避免过量施用对环境带来的潜在重金属危害,本试验采用牛粪有机肥为研究对象进行盆栽试验,根据牛粪有机肥和化肥的不同配施比例,设置5个处理,测定收获后不同处理土壤中重金属铜、锌各形态质量分数,并进行土壤有机碳和pH的测定。结果表明,与CK组相比,配施牛粪有机肥可以降低土壤中重金属Cu、Zn的总质量分数,DF1处理组降低幅度最大,分别下降了25.54%、39.20%;与CK组相比,DF1和DF2处理组可交换态Cu分配率从15.86%分别提高至28.13%、42.02%,促进残渣态向可交换态转化,DF2处理组对分配率的提高幅度最大;与CK组相比,CD和DF1处理组残渣态Zn分配率分别降低至39.27%、38.40%,DF2处理组变化幅度最大,降低至24.33%。配施牛粪有机肥后,土壤pH、有机碳含量有上升趋势,其中土壤有机碳与土壤中有效态铜、锌的分配率变化趋势呈正相关,相关性显著(P<0.05),同时土壤有效态锌与土壤pH的变化趋势呈正相关,相关性显著(P<0.05),但重金属铜的有效态与pH...     

一株产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定及其酶促反应适宜条件初步研究

为了分离、筛选产纤维素酶益生菌,确定其酶促反应适宜条件,利用羧甲基纤维素钠等作为筛选培养基,结合刚果红染色法,从玉米青贮饲料样品中筛选产纤维素酶益生菌,并通过形态学和系统进化树方法鉴定分离菌。同时对培养时间、pH和温度等酶促反应条件进行了研究。结果表明,筛选出1株可降解羧甲基纤维素,并产生清晰透明圈的菌株。经形态学观察和16SrRNA基因序列分析,鉴定该菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。粗酶液中滤纸酶活为1.5U/mL,外切葡聚糖酶活为1.3U/mL,内切葡聚糖酶活为6.4U/mL,β-葡萄糖苷酶活为2.3U/mL。酶促反应的适宜条件为pH 5.5,温度50℃,粗酶液为培养3d后发酵液上清。解淀粉芽孢杆菌分离株具有一定的产纤维素酶能力,在玉米秸秆生物降解与利用方面具有潜在的开发价值。     

解淀粉芽孢杆菌SSY2颉颃霉菌物质的鉴定及其理化性质研究

试验旨在鉴定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗霉菌物质及其理化性质。通过活性组分分析、硫酸铵沉淀、超滤除盐等方法鉴定并提取抗菌物质；通过对抗霉菌物质产生的时间、酶活性、温度、酸碱度（pH）、稳定性及储存温度的检测初步确定其理化性质。结果表明，不同组分对霉菌的降解率不同，菌液上清液对霉菌的降解能力最强，菌液发酵液的降解能力次之，胞内液降解能力最差。因此，初步确定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗菌物质活性成分是一种胞外分泌物，主要存在于菌液上清液；经30%、60%、80%和100%饱和硫酸铵沉淀，确定最佳硫酸铵饱和浓度为60%；超滤纯化后得到分子质量大于3 ku的抗菌活性物质。理化性质检测结果表明，该抗菌物质能在对数期早期（24 h）开始产生；具有产蛋白酶活性，对胃蛋白酶具有一定抵抗力，但对蛋白酶K、碱性和中性蛋白酶的抵抗力较低；在60~121℃抗菌活性稳定，证明其对热不敏感；耐酸性较强，在pH 6.0~8.0环境中对霉菌的抗菌活性稳定；此外，抗菌物质具有良好的传代稳定性，可在4℃条件下长期保存。本试验结果可为后续研发霉菌生物防控制剂提供依据。