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从牛蒡子、胡黄连中筛选对猪磷酸二酯酶(PDE) 7A2具有抑制作用的中药单体成分,为PDE亚型抑制剂研究积累资料.使用高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外原核表达的猪PDE7A2的抑制作用.结果表明:在反应质量浓度为1,5,10,50,100 μmol/L时,绿原酸对猪PDE7A2的活性抑制率分别为12.55%,46.29%,56.17%,68.52%,47.12%;牛蒡子苷抑制率分别为21.60%,41.35%,70.16%,88.27%,80.07%;β-谷甾醇抑制率分别为40.53%,54.52%,71.81%,96.50%,94.86%;胡黄连苷-Ⅱ抑制率分别为69.34%,94.03%,96.50%,103.09%,101.44%.绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外表达的猪PDE7A2均有抑制作用,其中胡黄连苷-Ⅱ对猪PDE7A2的抑制作用最强. 相似文献
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目的:从青藏高原地产中药材中筛选磷酸二脂酶4(PDE4)特异性抑制剂。方法:选取甘草、羌活、柴胡、大黄、红景天5种药材为试验对象,以PDE4特异性抑制剂Rolipram为阳性对照组,从猪中性粒细胞中提取PDE4进行PDE4活性实验。结果:5 mg/mL甘草、羌活、柴胡、大黄、红景天水提物、10μmol/L Rolipram组PDE4活性分别为6.8%、11.02%、11.07%、12.7%、18.7%、7.61%;抑制率分别为38.18%、0.02%、-0.47%、-15.21%、-69.66%、30.90%。与空白对照组PDE4活性相比较,甘草组P〈0.05;红景天组P〈0.001。与Rolipram组抑制率相比较,柴胡组P〈0.05;大黄组P〈0.01;红景天组P〈0.001。甘草组对PDE4抑制率高于PDE4特异性抑制剂Rolipram。结论:5mg/mL甘草水提物能显著抑制PDE4活性,且高于PDE4特异性抑制剂Rolipram,5 mg/mL柴胡、羌活水提物对PDE4活性的影响不明显,5 mg/mL大黄水提物对PDE4的活性具有促进作用,5 mg/mL红景天对PDE4的活性具有极显著的促进作用。 相似文献
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为了解近年来京津冀地区猫传染性腹膜炎(FIP)的发生发展及流行规律,丰富和更新FIP流行病学数据,2018—2020年从京津冀地区73家动物医院搜集725例疑似猫冠状病毒(FCoV)感染病例的临床检查信息,同时将病例对应的积液、粪便等样本进行分子生物学检测,结合临床信息和检测结果,对FIP流行情况进行三间分布描述和统计学分析。结果显示:京津冀地区疑似病例的FCoV阳性检出率较高,为75.0%(544/725),其中传染性腹膜炎型308例,占42.5%。308例FIP确诊病例中,298例(96.7%)出现了长期反复发烧、腹腔或胸腔积液等湿性临床症状;春、夏、秋、冬四季的FIP阳性检出率分别为37.4%、40.1%、52.8%和37.3%,差异有统计学意义(χ2=18.051,P<0.01);各品种猫均可发病,其中英国短毛猫(36.0%)、中华田园猫(15.9%)和美国短毛猫(26.0%)FIP阳性检出率较高;雌猫的FIP阳性检出率为36.8%,雄猫为45.3%,二者差异有统计学意义(χ2=4.840,P<0.05);未绝育猫(251例)高于绝育猫(57例),差异显著(P<0.05);各个年龄段猫均可感染FCoV甚至发展为FIP,阳性检出率差异具有统计学意义(P<0.05),其中以2月龄到1岁的阳性检出率最高(54.8%)。结果表明:京津冀地区FCoV感染及FIP发生较普遍;FIP发生与年龄、性别、品种、绝育情况和季节相关性较高,多发于幼龄、青壮年以及纯种、未绝育的雄性猫,夏秋高温季多发,主要表现湿性临床症状。结果提示,应重视FIP预防,针对其流行特点制定相应措施,尽早诊断,尽早介入治疗。 相似文献
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使用RT-PCR方法扩增猪磷酸二酯酶4B2基因,将其克隆到表达载体,经PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达。结果显示,目的基因片段大小为1718 bp,与GenBank公布的猪PDE4B2基因序列同源性为99.7%。表达的重组蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在。Western blotting检测结果表明,蛋白质大小约为66 ku,通过液相检测重组蛋白的cAMP-PDE活性为51.46%。制备的多克隆抗体有良好的特异性,为进一步检测天然蛋白PDE4B2和筛选PDE4B2的特异性抑制剂奠定了基础。 相似文献
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【目的】阐明咯利普兰为代表的磷酸二酯酶4抑制剂的抗炎新机制。【方法】采用密度梯度离心法分离猪中性粒细胞,流式细胞术检测猪中性粒细胞表达巨噬细胞表面分子抗原-1(Macrophage surface molecular antigen-1,Mac-1);Real-time qPCR和Western blot技术检测猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p65核转录因子(p65 NF-κB)mRNA表达和磷酸化活性。【结果】佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)可显著上调中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01),咯利普兰对PMA上调的中性粒细胞表达Mac-1有一定抑制作用,其中,5μmol/L咯利普兰可极显著抑制中性粒细胞表达Mac-1(P<0.01);PMA可极显著上调中性粒细胞p38 MAPK、ERK和p65 NF-κB mRNA表达和磷酸化活性(P<0.01),5μmol/L咯利普兰对PMA升高的中性粒细胞p38 MAPK、p65 NF-κB mRNA表达有极显著抑制作用(P<0... 相似文献