氧浓度对固定化黄孢原毛平革菌合成过氧化物酶的影响

氧浓度对固定化黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)合成过氧化物酶有较大的影响。限碳条件下培养黄孢原毛平革菌 ,生长阶段氧浓度对合成木质素过氧化物酶的影响不明显 ,但在产酶阶段氧浓度的影响却很大。 2 1%氧浓度即空气环境是合成木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶适宜的。增高氧浓度 ,胞外蛋白酶活力就会提高 ,不利于过氧化物酶的胞外累积。研究结果表明 ,空气环境下限碳培养黄孢原毛平革菌 ,合成的木质素过氧化物酶最高活力可达 360U/L ,比通纯氧条件下限碳培养时的木质素过氧化物酶要高 160 %。     

水果采摘器

日本小关农机公司开发的水果采摘器十分实用。它是一根空心长把,一端是采摘头,另一端是带弹性夹的手把,弹性夹与采摘头之间由钢丝拉线连接。采摘头由左右两个圆环及连接座组成,圆环内部有一个钢丝环,外套塑料软管,圆环柔软且富弹性,使之在夹持果实时不会损伤水果外表。圆环直径有45mm与55mm两种,前     

木糖醇发酵液脱色条件的研究

采用颗粒状活性炭对两种木糖醇发酵液进行脱色,就活性炭用量、起始pH值、脱色时间、搅拌速度和温度对脱色效果的影响进行了研究。确定了来自半纤维素水解液的木糖醇发酵液H(FBH)以及来自纯木糖合成培养基的木糖醇发酵液X(FBX)的最佳脱色条件为：在50℃、起始pH值6．0、搅拌速度125r／min的条件下脱色20min,两种发酵液的活性炭用量分别为250和150g／L。如果先将FBH的pH值调节至3．0,抽滤除去因调节pH值而产生的色素沉淀后,回调pH值至6．0．再进行活性炭脱色,则可以节约活性炭用量约50g／L,同时提高木糖醇回收率约6％。该结果将有助于建立一套完整高效的发酵法生产木糖醇的工艺。     

双菌种固态发酵木糖渣生产饲料蛋白

植物纤维是自然界中数量最大的可再生资源，据估计，全球年产量超过１０００亿吨。在我国每年形成的大量纤维素物质中，农副产品加工过程中形成的纤维质废渣占了很大一部分，它们本身利用价值不高，有些只能作为废物处理，既浪费资源，又污染环境。木糖渣是利用玉米棒芯生产木糖过程中产生的废渣，利用率很低，一般作为废物丢弃。因此，如果采用合适的微生物对它加以降解，使其中的纤维类物质转化为饲料蛋白，这将是一举数得的工作。就发酵方法来说，对于象木糖渣这样粗纤维含量高，通气性较好的废渣，采用固体培养具有投资少、高产、方法简…     

人工老化的甜玉米种子活力、生理特性和遗传多样性的变化

【目的】研究人工老化处理对甜玉米Zea mays L.saccharata Sturt.种子活力、生理特性和遗传多样性的影响,为甜玉米种子贮藏及大田生产提供参考。【方法】以甜玉米品种‘农甜88’和‘农甜99’为试验材料,采用人工老化的方法处理玉米种子,沙床发芽法检测种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。测定了种子的脱氢酶(Dehydrogenase,DHA)活性、过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性、相对电导率(Relative electrical conductivity,REC)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,采用SRAP标记检测不同处理时间种子的遗传多样性,分析种子生理指标和遗传多样性与种子活力的关系。【结果】随老化时间的增加,2个品种种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、DHA活性和POD活性逐渐降低,而REC和MDA含量则逐渐升高。老化处理6 d后,‘农甜88’和‘农甜99’种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、DHA活性、POD活性分别比对照下降18.32%和43.15%、10.73%和15.38%、19.43%和23.60%、41.85%和45.70%、69.78%和71.74%、52.02%和71.60%;浸泡24 h的REC分别比对照提高了33.68%和27.68%,MDA含量分别比对照提高了41.50%和47.08%。老化处理使种子的遗传多样性下降,老化处理6 d后,‘农甜88’和‘农甜99’等位基因数、有效等位基因数、基因多样性分别比对照下降29.35%和23.58%、25.00%和20.00%、96.99%和83.35%。相关性分析发现,2个品种老化种子浸出液的REC和MDA含量均与种子活力各性状呈显著或极显著负相关,DHA和POD活性均与种子活力各性状呈显著或极显著正相关。【结论】随老化时间的增加,2个甜玉米品种种子的活力以及DHA、POD活性逐渐降低、REC和MDA含量逐渐升高;种子老化处理降低了种子遗传物质的多样性;‘农甜88’种子耐老化能力强于‘农甜99’。     

纤维废料固态发酵产纤维素酶的研究

以木质纤维废料为主要原料,采用里氏木霉（ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉＡＴＣＣ５６７６４）固态发酵生产纤维素酶。浅盘发酵试验结果表明：菌丝接种优于孢子接种,底物含水量以７０％为宜,在底物初始ＰＨ为４．５－６．０时,纤维素酶的形成无明显差异。试验中发现：在同一固态发酵培养基上,至少可以重复进行三批产酵试验。     

香水柠檬RHF2A的克隆与互作蛋白的筛选

【目的】以香水柠檬（Citrus limon (L.) Burm. F.）为研究对象,分析两个RHF2A的时空表达规律,利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补试验（BiFC）筛选、验证其互作蛋白,为深入研究RHF2A在香水柠檬自交不亲和过程中的分子作用机制奠定基础。【方法】从前期转录组和泛素修饰组（未公开）筛选获得2个E3泛素连接酶RHF2A（RING-H2 Zinc Finger2A）基因RHF2A-1、RHF2A-2,并克隆其全长序列,通过生物信息学分析2个RHF2A的序列和蛋白质结构,预测其启动子顺式作用元件,构建35S-RHF2A-GFP融合蛋白表达载体用于亚细胞定位分析,采用实时荧光定量PCR分析两个RHF2A的时空表达模式,构建酵母双杂诱饵载体从香水柠檬酵母文库筛选互作蛋白。构建BiFC载体,在洋葱活体细胞内对目标蛋白进行互作验证。【结果】从香水柠檬克隆获得RHF2A-1、RHF2A-2,ORF全长分别为1 161和1 134 bp;NCBI结构域预测发现其具有Ring/U-box结构域。启动子分析发现其具有花粉特异性表达相关元件POLLEN1LELAT52、GTGANTG10。组织表达分析发现RHF2A-1在花粉特异性表达,RHF2A-2在叶中特异性表达;时空表达分析结果显示,RHF2A-1在自交柱头表达量从第1天开始升高,第3天达到峰值,是杂交柱头表达量的5倍以上。亚细胞定位显示RHF2A-1和RHF2A-2定位在细胞核。经过Uniprot网站预测其互作蛋白显示RHF2A能与KRP6、AT3G57370、UBA1、FBL17、SK11蛋白相互作用,推测其参与自交不亲和泛素化反应途径、配子体发育调控、花粉的生长发育等生物学过程。通过酵母双杂交技术筛选出72个克隆,对其测序并进行Blast比对后排除重复克隆,最终得到ABCF3等20个候选互作蛋白。经过一对一互作验证、双分子荧光互补实验确定RHF2A-1与ABCF3-2存在互作关系。【结论】RHF2A-1的时空表达规律与自交不亲和过程中花粉在雌蕊上的萌发规律相吻合;筛选得到柠檬授粉过程中直接影响花粉生长发育的互作候选蛋白,初步证明RHF2A-1在自交不亲和过程中具有重要作用。     

杧果MiOFP1基因的表达与功能分析

【目的】卵形家族蛋白（ovate family proteins,OFPs）在植物生长发育及逆境响应过程中扮演重要角色。前期通过杧果成花基因酵母文库筛选，获得了一个MiOFP1基因，为明确其功能，对MiOFP1的表达模式和转基因功能开展了研究。【方法】在本研究中分析了杧果MiOFP1的启动子序列；通过实时荧光定量PCR技术分析MiOFP1在杧果不同组织器官和不同生长发育期叶片中的表达模式；转化构建好的超量表达载体并侵染拟南芥研究MiOFP1的功能。【结果】四季蜜杧MiOFP1启动子包含激素响应元件：ABA响应元件、GA响应元件、SA响应元件和乙烯响应元件，逆境响应元件：盐响应元件、脱水响应元件、MYC转录因子和MYB转录因子结合位点。组织特异性表达分析显示，MiOFP1在各组织器官中均有表达，且在童期实生树和成年期嫁接树的茎中表达量最高，在成熟果实中表达量最低；嫁接树不同成花发育时期表达分析结果显示，MiOFP1在营养生长期的叶中表达量最高，在成花诱导期和花发育期表达水平较低。转基因功能研究显示，超量表达MiOFP1的拟南芥出现晚花表型，抽薹期叶片中成花抑制基因FLOWERING LO...     

固定化乳酸杆菌发酵纤维素水解液的研究

采用海藻酸钙凝胶包埋法固定德氏乳酸杆菌,固定化细胞可有效地利用纤维素水解液发酵生产乳酸。与游离细胞相比,固定化细胞具有发酵时间短、乳酸得率高等优点,其最适发酵温度为48℃,添加适量的麸皮水解液对乳酸发酵有明显的促进作用,乳酸得率可达90.1%。利用固定化细胞重复分批发酵纤维素水解液生产乳酸,连续16批发酵试验表明,固定化细胞性状稳定,产酸能力强,乳酸平均得率为88.6%。利用固定化细胞在柱式反应器中连续发酵纤维素水解液,当稀释率为0.12h-1时,乳酸得率和生产效率分别达到80.2%和4.97g/(L·h)。