猪瘟病毒野毒株与疫苗株E2基因双重TaqMan real-time PCR鉴别检测方法的建立

为建立猪瘟病毒(CSFV)野毒株和疫苗株快速定量鉴别检测方法,根据CSFV野毒株和疫苗株E2基因序列差异,设计了2对特异性引物及1条Taq Man探针,以含CSFV HB株和C-株E2基因的重组质粒p BS-E2C和p BS-E2作为标准品,建立了能同时检测CSFV野毒株和疫苗株的双重Taq Man real-time PCR鉴别检测方法。结果表明,建立的CSFV双重Taq Man real-time PCR标准曲线Ct值与1×101~1×106copies/μL之间的E2基因拷贝数呈良好的线性关系,灵敏度达10 copies/μL,且特异性和重复性很好。综上,本试验建立的Taq Man real-time PCR检测方法可用于CSFV野毒株和疫苗株的鉴别诊断及病原定量分析。     

兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

根椐Gen Bank公布的兔多杀性巴氏杆菌16S r RNA和支气管败血波氏杆菌fim N基因序列,设计两对引物,在建立两种细菌单项PCR检测方法的基础上,优化双重PCR反应条件,建立了两种细菌的双重PCR检测方法,用这两对引物对同一样品中的兔多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌核酸为模板进行双重PCR扩增,结果可同时扩增兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌的258bp和449bp的特异性片段,而对其他4种兔病原菌的扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,对兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌的最低核酸检出限分别均为1pg。通过对78份临床病料检测,将建立的双重PCR技术和单项PCR方法进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌的同时检测和鉴别诊断。     

未来中国农牧行业之变革

<正>我国农业正经历粮食安全与食品安全双重危机,也同时经历经营主体、经营体制的双重变革。1我国农业之困境和变革目前中国农业面临着两大困局和三个变革:困局一,粮食安全;困局二,食品安全。为了解决这两大问题,我们国家农业也面临着三个变革:第一,农村土地的加速流转,截止至2014年6月份,中国承包土地的流转已达到3.8亿亩,流转率达到28.8%。第二,随着新的土地流转政策的实施,未来农业的经营主体也会改变,而不是当前一些老龄化的农民。第三,商业模式的变革,很多企业在进行互联网     

松材线虫纤维素酶的免疫学分析

制备松材线虫特定纤维素酶的多克隆抗体(Anti-BXC60),通过SDS-PAGE、纤维索酶酶染分析、免疫印迹以及ELISA方法考察该抗血清的特异性.进一步利用抗松材线虫全蛋白抗体(Anti-BX)和Anti-BXC60抗体,建立线虫分泌性蛋白在PVDF膜上双重染色的方法.双重染色分析的结果表明:松材线虫主要通过分泌孔向体外分泌大量的分泌蛋白,而纤维素酶的分泌方式与其他植物线虫相似,是通过口针向外分泌.     

利用QuantStudioTM 3D数字PCR分析转基因玉米MON863含量

QuantStudioTM 3D数字PCR (QuantStudioTM 3D digital PCR,3D-dPCR)是一种基于超高密度亲疏水微孔芯片实现数字PCR分液原理的新型核酸绝对定量平台,在转基因生物定量领域具有极大的应用前景.本研究基于3D-dPCR平台,以转基因玉米(Zea mays)MON863混合样品为例,建立基于单重和双重数字PCR体系的转基因生物(genetically modified organisms,GMOs)含量分析方法.与传统qRT-PCR比较发现,在缺乏样品纯度、纯合度信息的情况下,数字PCR能够较好地排除这些因素的影响,测定准确的量值.研究结果表明,QuantStudioTM 3D数字PCR是一种适用于转基因生物含量分析的精确定量方法,还可反映转基因玉米种子的基因型.本研究基于3D-dPCR建立的转基因玉米MON863单重和双重定量方法为转基因检测提供了新的方法和参考.     

大水体“热水鱼”的捕捞与运输方法

<正>随着大水体渔业的发展,轮捕轮放技术已被广泛应用于大水体渔业生产;全年捕捞、均衡上市已成为提高大水体养殖效益的重要措施之一。"热水鱼"(高温季节起捕上市的各种淡水鱼)的大规模捕捞及长途运输给水产品的捕捞和运输提出了很多新的要求。一、大水体"热水鱼"的捕捞在春季、夏季、秋季起捕"热水鱼",不能像冬捕那样,对整个水体采用"赶、拦、刺、张"联合渔法进行捕捞。由于温度高,鱼类活动量大、分布广,反应敏捷、应激反应大,不仅赶鱼效果差,而且鱼群被大量围困在一起,     

治畜病“四不就”

一、见热就退烧发热是畜体抵抗疾病的生理保护反应,一定程度的发热可提高细胞吞噬致病微生物的能力,有利于机体的保护。二、见病就抗菌在治疗疾病时,见病就用抗菌药,滥用抗菌药常会引发双重感染,并能造成病菌的抗药性。三、见泻就止痢腹泻是畜体排除腹内毒素及病菌的一种保护反应,但如果腹泻时间过长或过多时,则应急速服补液药品,并应用抗菌药物止泻。     

Visual Foxpro课程教学方法的探讨与实现

对Visual Foxpro课程教学方法进行了探讨,提出了一些切实可行的教学方法,对教学过程中章节、知识点的学习给出了具体的实施方法.为"Visual Foxpro数据库与程序设计"课程教学提供有益的思路和建议,激发学生的学习兴趣,降低学生记忆的难度,增强学生自主学习的信心,从而使学生能够真正地掌握知识,并提高运用所学知识解决实际问题的能力.     

论农民工的双重生活与市民化

从涂尔干的社会团结理论出发分析中国农民工特有的双重生活,接着提出农民工市民化过程中遭遇的几个文化方面的阻碍,并尝试用马克思关于人的全面发展的观点对农民工市民化的可能性提出一些看法和建议。     

养殖成本增加 原奶价格被压低 奶农泣血杀牛

<正>近日,陕西传来了奶农杀牛的惨剧。《羊城晚报》报道,受养殖成本不断上升,原奶价格不断被压低的双重影响,陕西省很多奶农选择了把奶牛当肉牛卖给了屠宰场。《中国产经新闻》