在毕赤酵母中利用口蹄疫病毒(FMDV)2A实现dTomato和串联MagaininⅡ基因的共表达

抗菌肽(antibacterial peptides)是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的多肽,是天然免疫的重要组成部分.为了提高抗菌肽的表达量以及很方便地检测抗菌肽的表达情况,本研究利用口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV) 2A将荧光蛋白dTomato基因和3个串联的MagaininⅡ基因融合到一个开放阅读框中(open reading frame,ORE),融合的基因被置于pPIC9K载体醇氧化酶基因(AOX1)启动子的下游,构建分泌型重组酵母表达载体pPIC9K-dTomato -2A-3M,将线性化的重组酵母表达载体通过电击法转入毕赤酵母(Pichia pastoris )GS115中,经G418筛选和PCR鉴定得到阳性转化子,然后将其转至摇瓶,在30℃、0.5％甲醇的条件下进行诱导表达,连续诱导3d.SDS-PAGE电泳图谱显示,在31 kD(dTomato)和9.5kD(3M)处有蛋白条带出现,在荧光显微镜下观察酵母表达上清发出红色荧光,对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌试验结果表明,重组抗菌肽串联的MagaininⅡ具有明显的抑菌效果.结果表明,由2A连接的融合基因(荧光蛋白dTomato和串联的MagaininⅡ)在毕赤酵母中成功的进行了表达,FMDV 2A在其C端剪切多聚蛋白,得到dTomato和串联的MagaininⅡ两个独立而有活性的蛋白,为小分子抗菌肽的表达提供一个高效的检测方法.     

家兔氨基酸营养研究进展

[目的]探究家兔氨基酸需要量以及理想的氨基酸模式。[方法]综述家兔氨基酸需要量的研究进展。[结果]目前关于家兔氨基酸需要量的研究较少,研究结果也很不一致。[结论]对家禽氨基酸需要的认识已从总氨基酸需要向可利用氨基酸需要,理想氨基酸模式的方向发展,但对于家兔的理想氨基酸模式尚未见报道。我国要加强家兔氨基酸需要量的研究。     

几种培养液对水螅种群增长影响探究

通过对水螅的培养来探究了几种培养液对水螅种群增长的影响。结果表明:自来水作为培养液,水螅种群密度及种群瞬时增长率最大,其次为白开水和矿泉水,蒸馏水组水螅种群密度和种群瞬时增长率最小。故自来水最适合作为水螅培养液,其次为白开水和矿泉水,蒸馏水不适合作为水螅培养液。     

不同投喂频率及饲料搭配对台湾鳗鳅仔鱼生长速度、存活率的影响

为了研究不同投喂频率及饲料搭配对台湾鳗鳅仔鱼生长速度、存活率的影响,研究设置1～5次/d的不同投喂频率试验和用6种不同饲料搭配组合(人工饲料组、人工饲料+破壁酵母组、人工饲料+EM菌乳液组、去壳丰年虾虾卵组、虾卵+破壁酵母组、虾卵+EM菌乳液组)投喂的生长试验,试验期为20 d,对试验鱼初始体长、终末体长、终末体重和存活率进行测定。结果表明:台湾鳗鳅仔鱼的生长随着投喂频率的增加而增加,而存活率则随着投喂频率的增加先升高后降低,其中投喂频率为2次/d的存活率最高,为62.0%,投喂频率为5次/d的存活率最低,为40.0%。人工饲料组的台湾鳗鳅仔鱼的生长速度、存活率最低,终末体长、体重分别为0.81 cm、0.004 g,存活率只有40.0%;去壳丰年虾虾卵+EM菌乳液组的生长速度、存活率最佳,终末体长、体重分别为1.3 cm、0.011 g,存活率高达60.0%。说明采用去壳丰年虾虾卵、人工饲料、EM菌乳液组合,按照3,4次/d投喂,台湾鳗鳅生长速度和存活率最佳。     

利用蔬菜大棚养殖南美白对虾的关键技术

正南美白对虾(Litopenaeus vannamei)是世界养殖产量最高的三大优良虾种之一,具有生长迅速和抗逆性强的特点。最近几年整个黑龙港流域都陆续开展了南美白对虾的养殖热潮,养殖模式多种多样,2015~2017年笔者在衡水利用蔬菜大棚进行改造养殖南美白对虾的试验并取得成功,现将利用蔬菜大棚养殖南美白对虾的关键技术总结如下,以供实际生产参考。1养殖周期安排正确地安排养殖周期不但关系到养殖的成功     

利用蔬菜大棚养殖南美白对虾的关键技术

<正>南美白对虾(Litopenaeus vannamei Boone,1931)是世界养殖产量最高的三大优良虾种之一,具有生长迅速和抗逆性强的特点。最近几年在黑龙港流域都陆续开展了南美白对虾的养殖示范,2015-2017年笔者在衡水利用蔬菜大棚进行改造养殖南美白对虾的试验并取得成功,现将利用蔬菜大棚养殖南美白对虾的关键技术总结如下,以供实际生产参考。1养殖周期安排正确地安排养殖周期不但关系到养殖的成功     

家兔氨基酸需要量的研究进展

氨基酸是组成蛋白质的基本单位。在配合家兔日粮时,确定氨基酸在日粮中的最低含量非常重要,因为日粮的蛋白质水平和日粮成本直接受日粮氨基酸水平的影响。     

东江源红壤丘陵区土地利用与覆盖变化研究

采用RS和GIS技术,以红壤丘陵典型案例区东江源为例,利用遥感影像解译,运用土地利用程度综合指数、单一土地利用类型动态度及状态指数等模型,研究了1986～2005年东江源区土地利用变化特征,揭示红壤丘陵区20年来土地利用变化的时空格局.结果表明,研究区土地利用结构基本稳定,土地利用发展平缓,总体相比而言,1995～2005年土地利用类型变化幅度大于1986～1995年的变化幅度;就土地利用类型的转移模式来讲,研究区的林地转为耕地分布最为广泛;状态指数结果表明未来研究区的土地利用变化呈现耕地、水域和建设用地面积增加,其余地类面积减少的趋势.     

不同盐胁迫对高羊茅种子萌发的影响

用不同浓度的NaCl,Na2CO3,Na2SO4 ,NaCl和Na2CO3 的混合液以及NaCl、Na2CO3和Na2SO4的混合液分别处理高羊茅（Festuca arundinacea）种子,研究不同盐分胁迫对高羊茅种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数以及幼苗根长和苗高的影响。结果表明,低浓度盐处理对高羊茅种子的萌发影响不大,高浓度盐处理显著抑制了种子的萌发。随着盐浓度的升高,高羊茅种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数均呈下降趋势,且对幼苗生长和幼根生长的抑制作用加强。高羊茅种子对不同类型盐的耐受性各异,不同盐分对种子萌发的抑制程度为Na2SO4<混合盐(NaCl+Na2CO3+Na2SO4)相似文献   

秸秆和地膜覆盖下春玉米农田腾发特征研究

通过大型称重式蒸渗仪和小型蒸发器测定秸秆和地膜覆盖下不同灌水处理春玉米地的腾发量,并结合气象、春玉米叶面积及产量等数据比较不同覆盖方式和灌水处理的优越性。分析了棵间蒸发量与降雨和灌水的脉冲性关系、降雨对腾发总量和参考作物腾发量的影响,得到各处理下不同生育阶段春玉米棵间蒸发占腾发总量的比例为大?小?大,且秸秆覆盖较地膜覆盖减少无效蒸发的作用强,利用不同处理下腾发总量与叶面积指数所呈现的线性函数关系,可求得春玉米各生育阶段的作物系数和全生育期的水分利用效率。结果表明:河西干旱地区适度调亏对水分利用效率影响不大,地膜覆盖下种植春玉米比秸秆覆盖效果好。