微酸性电生功能水在奶牛场的消毒效果研究

微酸性电生功能水（Slightly Acidic Electrolyzed Functional Water,SAEFW）是在无隔膜电解槽内将一定比例的低浓度氯化钠和稀盐酸电解生成。其pH介于4.5-6.5之间,有效氯以HClO形态存在,杀菌力强,作用后可迅速分解且无化学污染。本研究在自行设计的微酸性电生功能水装置的基础上,对SAEFW在奶牛场奶牛乳头药浴、挤奶杯、人员和毛巾等环节消毒效果进行了研究。结果表明,随着有效氯浓度的增加,SAEFW杀菌率逐渐提高,当有效氯为40mg/L时,杀菌率达到91.21%,与乳浴常用消毒剂“滴宝”的杀菌率91.97%相当;结果还表明奶牛乳房药浴必须有一定的停留时间。用低浓度有效氯20mg/L的SAEFW直接冲洗乳房皮肤,除菌率达93.59%,不低于用有效氯40mg/L的SAEFW和“滴宝”浸泡药浴效果,且综合了清水冲洗和乳房药浴两个步骤,简化了生产程序。SAEFW在挤奶杯、污染毛巾和挤奶员手消毒方面均有明显效果,优于相同有效氯的NaClO的杀菌率。SAEFW杀菌作用受有机物等环境因素影响,连续乳房药浴和挤奶杯消毒最好制备有效氯浓度稍高的SAEFW,或在事先充分清洗基础上再行消毒。本试验结果为SAEFW在奶牛场的消毒应用提供了一定的参考。     

设施农业工程图学多模块分段融合教学模式设计

介绍了设施农业工程设计类课程体系特点、设施农业工程图学课程开设情况,分析目前设施农业工程图学教学模式在教学环境与要求、设计要求方面对整个课程体系的发展及学生知识体系的建立产生的不利影响,提出多模块分段融合教学模式的课程教学改革方案,并阐述多模块分段融合教学的设计思路、设计方法及设计内容,实现每一模块紧紧结合每门专业课程的各章节,贯穿于设计类课程体系始终,与相应的专业课同步一体化教学,改善设计主体各组成结构的教学应用环境,夯实了设计基础,提高了设计发展空间,作用辐射整个专业课程体系,使设施农业工程图学发挥更大作用,更好地适应专业课程体系的发展。     

环保酵素对麻豌豆芽苗菜生长发育的影响

试验研究了在麻豌豆芽苗菜生长的不同时期,施用环保酵素对其生长状况及品质的影响。采用三因素多水平方式研究浸种时间、酵素稀释倍数、施肥方式对麻豌豆芽苗菜发芽率、根长、芽长、鲜重、叶片数、叶面积以及叶绿素、蛋白质、可溶糖含量的影响。试验结果表明,在种子萌发阶段,12 h浸种、50 倍酵素稀释液对麻豌豆萌发的促进效果最佳;在生长阶段,以50倍酵素稀释液施用对麻豌豆生长促进效果最佳,20倍、100倍时次之;施肥方式方面,喷施和灌溉混合施肥的促进作用最佳,喷施和灌溉两种方式分别施用的促进作用次之。研究证明了环保酵素的施用有助于促进芽苗菜生长、提高其产量及品质,为麻豌豆的生产实践提供理论依据,也为蔬菜废弃物综合利用开辟新途径。     

猪链球菌山东分离株随机扩增DNA(RAPD)分析的研究

通过优化反应条件和筛选随机引物,应用100条随机引物对山东省临床病例中分离的20株猪链球菌做随机扩增多态性DNA(RAPD)分型研究。结果有23条引物呈现良好的多态性和稳定性,可产生稳定、复杂的指纹图谱。采用SPSS12．0软件分析了不同菌株间的遗传距离,20株的遗传距离为0．041-0．727,平均距离为0．293,其中第9株和第12株的遗传距离最大,据此绘制出菌株间的亲缘关系树状图,20株猪链球菌可被分为四个聚类群。研究结果表叫,RAPD指纹图基因分型法具有分型率高、分辨力强、简捷快速等优点,不需要已知核酸系列,使各类疾病的分子流行病学调查及病原分离鉴定的比较理想的方法之一,应用前景广阔。     

PRRSV GP5和PCV2 ORF2双基因共表达重组腺病毒的构建及鉴定

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因和猪圆环病毒2(PCV2)ORF2双基因共表达重组腺病毒.将扩增的PRRSV GP5基因和PCV2 ORF2基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒.Pme Ⅰ酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经Pac Ⅰ酶切后转染293 A细胞进行包装,获得重组腺病毒.PCR鉴定表明重组腺病毒含有GP5和ORF2基因,western blot检测结果表明GP5基因和ORF2基因在293 A细胞内获得表达.     

猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达

为研究猪细小病毒PPV-SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能,自行设计引物,通过PCR扩增的方法,获得VP2全基因,克隆到pMD18-T载体中进行测序,然后亚克隆到pET30a(+)表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,标记为pET30a-VP2。将阳性重组质粒转化进RosettaTM宿主菌中,通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定最佳诱导条件为:IPTG终浓度1.0 mmol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3~4 h。经SDS-PAGE和Western-blotting分析表明该重组蛋白相对分子量约为68 ku,具有良好的免疫学活性。     

猪繁殖与呼吸综合征继发关节型链球菌病的诊治

<正> 2006年7月下旬,河南省某规模化猪场怀孕母猪发病,出现无名高热,流产,食欲减退,耳部等发绀症状,个别病猪腿部肿胀,行走困难,其发病率较高,耐药性较强,不易控制,特来我系畜禽诊断中心求诊。经临床检查和实验室诊断,确诊为猪繁殖与呼吸综合征继发链球菌病感染。现将诊疗情况报告如下:1 流行病学此猪场发病猪较多,体温有的可升高到40℃～41℃左右,耳部前期发红,后期变蓝色,皮肤也发红,不愿站立,厌食,不爱饮水。严重的呼吸困难,咳嗽,有的病猪腿部肿胀,驱赶猪群时常常掉队,仅在喂食时勉强爬起,发病前曾用每50千克饲料添加支原净6.5克,阿莫西林20克,黄芪多糖10克,金霉素150克预防用药。发病后用附红净、磺胺嘧啶等药治疗效果不理想。     

大肠杆菌菌毛抗原K99与耐热肠毒素STⅠ融合基因的克隆与核苷酸序列测定

采用PCR技术，从大肠杆菌K99中扩增出0．54kb的K99菌毛抗原基因，然后将其克隆到pUCm—T载体上，用Bgl Ⅱ鉴定K99插入的方向并测序。选择目的基因片段插入方向正确的重组质粒经BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后，通过T4连接酶与同样经BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切合成的耐热肠毒素ST Ⅰ核苷酸序列连接，通过PCR方法鉴定分析和核苷酸序列测序分析，证明插入的K99-ST Ⅰ融合基因片段具有正确的核苷酸序列。     

PRRSV HN25株ORF5基因的克隆和重组腺病毒的构建

克隆PRRSV HN25株ORF5基因,测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp,编码200个氨基酸,与国内外VR-2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99.0%,63.8%和91.4%,而推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%,58.8%和90.5%。构建含ORF5基因的重组腺病毒穿梭质粒,PmeI酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacI酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。通过PCR鉴定重组腺病毒含有ORF5基因,Western blot检测的结果表明PRRSV ORF5基因在293A细胞内获得表达。     

一例猪瘟与猪蓝耳病混合感染的诊断

2007年3月份,山东潍坊某猪场断奶1~2周的仔猪发病,发病率和死亡率都较高,原因不明,特来山东省滨州畜牧兽医研究院兽医技术诊断中心确诊。根据流行病学调查、剖检变化、RT-PCR试验等,初步诊断为猪瘟病毒与猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染。1临床症状仔猪断奶后10 d左右发病,主要表现为体温41~42℃,面部肿胀,眼睛无神,两耳、眼部、鼻部呈暗紫色;伏卧昏睡,精神萎靡,全身无力,运动失调;眼结膜潮红,后期苍白。病初减食或不食,饲喂时缓慢走近食槽,食数口后,即退回卧下。病猪逐渐消瘦,被毛粗糙,起立采食或饮水时频频咳嗽,并伴有呼吸困难症状,部分…