一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立

建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。     

反向遗传技术在传染性法氏囊病病毒研究中的应用

传染性法氏囊病是鸡的最严重疾病之一,其病原是鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV),IBDV基因组为两片段双链RNA,变异株和超强毒株的出现,给传统的疫苗免疫带来了新的挑战,因此,加强对IBDV的基础研究是控制该病的关键.RNA的结构不稳定成为阻碍RNA病毒研究的主要障碍,近年来兴起的反向遗传技术将RNA病毒的基因组转化为cDNA,从而使RNA病毒的基因操作成为可能,也使RNA病毒的研究获得了快速的发展.文章就传染性法氏囊病病毒反向遗传操作研究的意义、方法、概况及相关分子生物学进行了全面综述.     

灵芝和菌糠降低鸡蛋胆固醇的试验研究

选取48周龄海兰褐商品蛋鸡120羽,随机分成3组,试验期为4周,对照组Ⅰ组喂基础日粮,试验Ⅱ组添加2.5g/kg灵芝,试验Ⅲ组添加2.5g/kg菌糠,在一致的背景下,探讨灵芝、菌糠对鸡蛋胆固醇的影响。结果表明:Ⅱ、Ⅲ组可降低蛋鸡血液甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,增高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;3组之间料蛋比差异显著,Ⅱ、Ⅲ组料蛋比分别比对照组低6.4%(P<0.05)、11.0%(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ组平均产蛋率分别比对照组提高5.38%(P<0.05)和3.29%(P<0.05)。试验4周,Ⅱ、Ⅲ组鸡蛋胆固醇含量分别降低15.3%(P<0.05)和10.4%(P<0.05),且两组间差异显著(P<0.05),研究表明灵芝及菌糠均能提高蛋鸡生产性能,降低鸡蛋胆固醇含量。相比之下,灵芝是降低鸡蛋胆固醇较为理想的添加剂。     

膜孔灌肥液自由入渗硝态氮运移特性试验研究

以KNO3为入渗溶液,模拟研究了硝态氮在膜孔灌肥液自由入渗条件下的运移过程.结果表明,在湿润蜂运移的范围内,沿着膜孔水平方向和垂直方向,硝态氮前锋运移速率受土壤含水量的影响较大,并随着土壤含水量的增加而增加;硝态氮前锋运移速率与运移距离有很好的相关性,并随着运移距离的增加呈幂函数衰减变化.硝态氮前锋浓度随着运移距离的增加而升高,其变化趋势呈指数曲线关系,且在湿润锋(土壤干湿交界)面上达到最大值;硝态氮前锋浓度随土壤含水量的增加呈幂函数递减,两者的相关系数也达到了极显著水平.     

沙漠地区风沙活动特征——以中国科学院风沙观测场为例

运用中国科学院风沙科学观测场的实测资料,对腾格里沙漠风沙环境特征进行初步分析,内容包括起沙风、风沙活动强度、风沙流结构和沙漠边界层的风速廓线.该地区的起沙风以6～8 m/s为主,占总起沙风的71.63%,其次为8～10 m/s,占19.24%,两者之和占90.87%;大风日数为4天;风向以W-N组风向为主;占全年的53.14%.年输沙势为36.56VU,风能属于低风能环境,单一主风向和单风态风环境.风沙流主要集中在地表的0.1 m,占总输沙量的95.46%.观测场近地层厚度大于50 m.     

仲丁威三种测定方法的比较

本文采用反相高效液相色谱法和改进的气相色谱法对仲丁威含量进行了测定,并与ＣＩＰＡＣ采用的正相高效液相色谱法测定了进行了比较。结果表明,反相液相色谱法与正相液相色谱法等效,气相色谱法经改进后降低了仲丁威的热分解,三种方法对仲丁威原药及乳油含量的测定结果的相对误差在允许的范围之内。     

套式反转录—聚合酶链反应检测恙螨及鼠肺内肾综合征出血热病毒RNA

选择覆盖肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）膜蛋白（ＭＰ）基因的保守区核苷酸序列合成２对引物,采用异硫氰酸胍一步抽提ＲＮＡ,建立了ＲＴ－ＰＣＲ检测鼠体恙螨及游离恙螨体内ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ的方法,扩增产物经凝胶电泳及斑点印迹杂交证实具有特异性。结果显示,ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠体恙螨５０只组、１０只组、游离螨５０只组,ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠肺１０００ｍｇ、５００ｍｇ组经ＲＴ－ＰＣＲ检测为阳性;ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠体恙螨５只组,ＨＦＲＳＶ抗原阴性鼠体恙螨５０只和１０只组,游离螨１０只和５只组,鼠肺ＨＦＲＳＶ抗原阳性１００ｍｇ组均未见有明显扩增带。进一步用套式反转录－聚合酶链反应（ＮｅｓｔｅｄＲＴ－ＰＣＲ）检测,在ＲＴ－ＰＣＲ未测出ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ的各组中均检测有ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ。结果表明ＮｅｓｔｅｄＲＴ－ＰＣＲ具有高特异、高敏感的特点,可用于检测恙螨体内微量ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ,为确认恙螨作为ＨＦＲＳＶ的传播媒介提供了分子生物学证据。     

Comparative Study of Nutrient Deficiencies on Growth and Photochemistry of Tobacco

Abstract

Element deficiencies, such as molybdenum (Mo), iron (Fe), calcium (Ca), lead to disturbances of morphological and physiological processes of tobacco (Nicotiana tabacum L.). On exposure to nutrient solution without Mo, leaf morphology was significantly affected, whereas photosynthetic processes conserved their normal activities. The decreased Mo, Fe, and Ca concentrations in tobacco were associated with loss of pigments and photosynthetic disturbances. In Ca‐deficient plants a reduction in the rate constant of energy trapping by PSII centers and a physical dissociation of LHC from PSII core, were observed. The poisonous action of Fe and Ca deficiencies focused mainly in the decreased proportion of active chlorophyll associated with the reaction center (RC) of PSII (decreased F _v /F ₀) and in the declined total number of electrons that have gone through the RCs (decreased Area/F _m  ? F ₀). In parallel, the non‐photochemical quenching coefficient was significantly enhanced in Fe and Ca‐deficient plants, but remained unchanged in Mo‐deficient plants. It is obvious that nutrient deficiency may trigger some protective mechanisms in order to PSII could maintain its activity under that type of stress.     

运输对荣昌猪生理生化指标的影响

获取荣昌猪对运输的耐受能力,以此研究针对运输的保健药品和保健措施。选择40日龄的荣昌仔猪12头,在最低气温15℃下运输2h(100km)。从前腔静脉采集运输前及运输停止后30min、运输停止后第1天、3天、7天试验组及空白对照组荣昌仔猪的血液,进行主要血液生理生化指标检测。同时,检测试验组及空白对照组荣昌仔猪在运输前及运输停止后30min、运输停止后第1天、第3天、第7天的临床三大生理指标(呼吸、脉搏、体温)。采用F检验统计分析运输前后差异显著性,比较运输对组内各组影响的差异性。结果表明,荣昌仔猪在经过运输后,尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶等大部分生理生化指标都有上升,与运输前比较差异极显著(P<0.01),运输前各荣昌仔猪之间的生理生化指标无显著差异(P>0.05),荣昌猪对运输的抵抗能力较差,需要在运输前后做好抗应激措施。