山东省沙地葡萄茎痘相关病毒的检测

为明确沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)在山东省发生的情况,2006-2007年在葡萄主栽区和葡萄品种资源圃进行了田间调查、样品采集和病原检测。应用GRSPaV外壳蛋白基因表达获得的多克隆抗体,经间接酶联免疫吸附试验(PTA-ELISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测,在2a采集的298个样品中,125个样品为阳性反应,阳性率41.95%。125个阳性样品涉及43个品种,品种被侵染率74.14%。研究对检测的样品用RT-PCR法验证,有3对引物均扩增出了预期片段,分别为解旋酶基因340bp片段、外壳蛋白(CP)基因842bp片段和RNA聚合酶(RdRp)基因499bp片段。     

应用RT-PCR对新城疫病毒分离株毒力的快速鉴定

根据新城疫病毒 (NDV)强、弱毒株在 F蛋白裂解位点氨基酸组成和序列上的差异 ,参照有关文献 ,设计了 3对引物 (A B,A C,A D)。引物 A B能从 L a Sota、B1 、 系和强毒 F4 8E8的含毒尿囊液中扩增出 36 2 bp的核酸片段 ,引物 A C仅能从强毒 F4 8E8的含毒尿囊液中扩增出 2 5 4 bp的片段 ,引物 A D仅能从 L a Sota、B1 、 系的含毒尿囊液中扩增出 2 5 4 bp片段。 3对引物均不能从 IB、IBD、AI的含毒尿囊液和正常鸡胚尿囊液中扩增出特异片段。从发病鸡群中分离的 3株 NDV毒株均被 A C引物扩出 ,它们的鸡胚平均死亡时间 (MDT)分别为 5 1.8、5 3.2、5 2 .6 h,1日龄雏鸡脑内接种指数 (ICPI)为 1.6 5、1.6 3、1.6 0 ,证明是 NDV强毒。利用 RT- PCR对 NDV人工感染鸡最早可于攻毒后第 2天从病鸡气管中检测到 NDV,其次为泄殖腔和脾、肾。利用 RT- PCR对 NDV毒力的鉴定结果与传统生物学试验的测定结果完全吻合 ,但前者可在 2 4 h内直接对组织匀浆进行诊断 ,具有快速、简便和敏感的特点     

羊草乙醛脱氢酶（ALDH）基因片段的克隆及表达分析

[研究目的]克隆羊草的乙醛脱氢酶ALDH基因片段,研究该基因在不同条件下的表达情况。[方法]采用RT-PCR技术克隆羊草的ALDH基因片段,并对其核苷酸和氨基酸序列进行分析,采用RealTimeRT-PCR方法研究该基因的表达。[结果]获得了羊草的ALDH基因片段,长度为675bp,编码225aa。核苷酸序列比较表明,与水稻ALDH1a序列(AB037421)同源性为86%,与玉米RF2C(AF348413)同源性为85%。BLASTp分析,该序列与水稻、玉米、拟南芥的乙醛脱氢酶一致性分别高达87%、86%、60%,含有醛脱氢酶基因家族的保守结构域。RealTimeRT-PCR数据表明,在诱导条件下该基因的表达量呈先升高后降低的趋势。总体上来说,该基因对盐的响应要高于干旱和冷冻。[结论]成功获得了羊草ALDH基因片段,并研究了该基因的表达情况,为进一步克隆羊草ALDH全长基因奠定了基础。     

Prediction of watermelon quality based on vibration spectrum

Judging watermelon quality based on its apparent properties such as size or skin color is difficult. A non-destructive method is employed here, based on vibrational response spectrum, to determine the quality indices of watermelon (Charleston gray). The responses of samples to vibration excitation were recorded by laser Doppler vibrometry (LDV). The phase shift between input and output signals were extracted over a wide frequency range. The total soluble solids (TSS), titratable acidity (TA) and TSS/TA ratio also measured as watermelon quality characters. Stepwise multiple linear regression (SMLR) as well as partial least square regression (PLS) was applied to extracted vibration spectrums to construct prediction models of watermelon quality. The results showed that performance of SMLR models were better than PLS. The determination coefficients (R²) of SMLR validation models were 0.9976, 0.9985 and 0.9542 for TSS, TA and TSS/TA respectively. It is likely that reduction of cell wall materials to soluble solids during ripening process changes viscoelastic properties of watermelon reflected by vibrational response. This study demonstrated the feasibility of mentioned method for predicting the quality of watermelons in an industrial grading system.     

农业机械化与黑龙江省农业发展实证分析

从各国农业发展经验看,农业机械化对各国农业的发展具有重要的促进作用,而黑龙江省是我国的农业大省,有必要对其农业机械化与农业发展关系进行研究。为此,运用多元线性回归模型,分析了阻碍农业机械化的影响因素:农村剩余劳动力转移缓慢,农户分散经营,投入少。同时,提出了具体措施来提高黑龙江省农业机械化水平:促进农村剩余劳动力的转移,加大政府对农业机械的投入,建立农业机械化服务体系,以此促进农业机械作用的发挥从而推进黑龙江省农业的发展。     

马铃薯品种(系)的灰色多维综合隶属度评估

为全面客观地分析品种的综合表现,克服以往育种中仅以产量为主,其它性状凭主观判断来选择品种的局限性,我们用灰色多维综合隶属度评估方法对马铃薯品比试验结果进行综合分析评估.结果表明:99-2-2、S-80和中心23为优良品种,细皮红、凉薯97和对照米拉为较好品种,合作88、大西洋和中心24为一般品种.     

不同日龄仔猪骨髓组织抗菌肽Protegrin-1mRNA的表达

分别于出生当天、3、14、23和28日龄随机屠宰杜×长×大三元杂交公猪4头，采集股骨骨髓组织。用一优化的RT—PCR方法，以18S rRNA作内标，定量分析不同日龄仔猪骨髓组织抗菌肽Protegrin-1（PG-1）mRNA表达的差异。结果表明，不同日龄仔猪骨髓组织PG-1mRNA相对丰度有明显的差异。出生时最低，随着日龄的增加，其表达显著增加。     

猪TGFβ1基因及其受体组织表达特性的研究

以妊娠母猪为研究材料,采用RT-PCR半定量方法对猪转化生长因子β1(TGFβ1)及其3种受体组织表达特点进行研究。结果表明:TGFβ1在11种组织中的表达量,由高到低依次为肾上腺、下丘脑、肌肉、卵巢、脾、大脑、肾、子宫、肺、肝和心脏。3种受体的表达,总体上来说在子宫中相对较高。TGFβ1及其受体在肾上腺和子宫等组织中有相对较高的表达量,提示其在繁殖过程中可能发挥作用。     

检测绵羊源爱知病毒D型荧光RT-PCR方法的建立和应用

绵羊源爱知病毒D型(ovine Aichivirus D)是在国内绵羊中新发现的病毒,本研究根据绵羊源Aichivirus D 3D基因序列设计检测引物,通过反应体系和条件优化,成功建立了检测绵羊源Aichivirus D的TB Green染料法荧光RT-PCR方法,该方法特异性和稳定性良好,灵敏度高。对2020年4月―2021年5月采集自四川6个场253份绵羊粪便样本(健康羊的133份,腹泻羊的120份)进行检测,结果该病毒的平均检出率为8.7％,场阳性率为66.7％。其中,腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(17.5%)显著高于非腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(0.75%,P<0.001)。表明绵羊源Aichivirus D可能是引起以上地区绵羊腹泻的病原。从绵羊源Aichivirus D的阳性样本中成功克隆出大小为1 422 bp的13个完整的绵羊源Aichivirus D 3D基因,其核苷酸相似性为99.4％～100.0％。遗传演化分析发现这13株绵羊源Aichivirus D 3D基因与本实验室前期研究上传的绵羊源Aichivirus D 3D基因共同聚为单独的一个大支。本研究为绵羊源Aichivirus D的分子检测提供了一种新的方法和基础流行病学数据。