小鼠卵母细胞体外成熟过程中wee 1和cdc 25基因的表达

已知 wee 1基因产物是成熟促进因子 ( maturation promoting factor,MPF)活性的负调节者〔7〕,而 cdc2 5基因产物是 MPF活性的正调节者〔2〕。后来在小鼠和人类的体细胞发现了cdc2 5的等效基因和 wee1基因〔3～ 6〕。但哺乳动物卵母细胞长期被阻滞在第一次成熟分裂的前期 ,是否因 MPF的活性受到 wee1基因产物的抑制 ,而促性腺激素等解除这种抑制是否由 cdc2 5基因表达所引起 ,目前尚未见报道。本试验目的在于研究小白鼠卵母细胞成熟过程中 wee1、cdc2 5基因的表达规律 ,为揭示哺乳动物卵母细胞成熟过程中分子生物学调控机理提供科学资料…     

25%凯润乳油对香蕉黑星病的田间防效研究

[目的]为在生产上合理施用25%凯润乳油提供科学依据。[方法]以巴西2号为供试香蕉品种,研究25%凯润乳油不同浓度处理对香蕉黑星病的田间防治效果。[结果]随着施药时间的延长,平均病指下降,防效提高,香蕉生长正常,未发生药害。25%凯润乳油1 000、1 500和2 000倍液对香蕉叶片黑星病的防效均显著好于25%敌力脱乳油,25%凯润乳油不同浓度处理间防效差异不显著。[结论]25%凯润乳油最佳施用浓度为1 500～2 000倍,最佳施药量为750 L/hm2。     

Regulatory effects of Rock2 on cell cycle checkpoint Cdc25A

AIM: To investigate the regulatory effects of Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase 2(Rock2) on the cell cycle checkpoint cell division cycle 25A(Cdc25A). METHODS: The protein expression levels of Rock2 and Cdc25A in 51 pairs of hepatocellular carcinoma and the adjacent tissues were detected by Western blotting. shRock2 plasmids were constructed, selected and stably transfected into hepatocellular carcinoma Huh-7 and HepG2 cells. The protein expression of Cdc25A in the cells was determined by Western blotting. Based on the Rock2 interfering sequences, we designed the primers and changed the 4 indicated bases via site-specific mutagenesis. The Rock2-mutant plasmid was verified by sequencing and was transfected into stable Rock2-knockdown cells. The protein expression of Cdc25A was detected by Western blotting, and the cell proliferation was measured by MTT assay. The protein levels of checkpoint kinase(Chk)1/Chk2 were also detected in stable Rock2-knockdown cells. The interaction between Rock2 and Cdc25A was measured by co-immunoprecipitation, and the co-localization of Rock2 and Cdc25A was detected by confocal laser scanning microscopy. RESULTS: Rock2 and Cdc25A were apparently up-regulated in hepatocellular carcinoma,with a significantly positive correlation. The protein expression of Cdc25A was significantly down-regulated in stable Rock2-knockdown cells. The expression of Chk1 and Chk2 was not changed following knockdown of Rock2. The co-immunoprecipitation results verified that Rock2 bound to Cdc25A. The results of confocal laser scanning microscopy showed that Rock2 and Cdc25A were co-localized in hepatocellular carcinoma cells. CONCLUSION: Rock2 positively regulates the cell cycle checkpoint Cdc25A, which is independent of Chk1/Chk2 and this may provide a new target gene for treatment of hepatocellular carcinoma.     

分子标记辅助改良培矮64S稻瘟病抗性

为提高我国大面积应用的两系光温敏不育系培矮64S的稻瘟抗性,本研究通过杂交转育与分子标记选择相结合的途径,利用RM3330与RM262为标记,将Pi25与Pi-d(t)基因成功聚合于培矮64S中,经抗性、不育性、综合农艺性状评价,获得了5个基因型纯合且农艺性状稳定的F8代抗性改良候选不育系。抗性鉴定结果显示,抗性改良候选不育系及其抗性组合的叶瘟病情指数平均降幅为18.78%和23.24%,穗颈瘟病情指数平均降幅为18.58%和58.45%,抗性提高幅度极显著。育性观测结果表明抗性改良候选不育系不育度都在99.5%以上,柱头外露降低5.64%,包颈粒率降低8.55%。经济性状调查结果显示不育系除穗粒数下降、有效穗增加外,其余经济性状变化不明显;试配的杂交组合平均理论产量和实际产量比对照提高16.22%和6.89%,增产极显著。这些结果表明,通过Pi25与Pi-d(t)基因的导入显著提高了培矮64S稻瘟病抗性,获得了实用的光温敏不育系新材料。     

布鲁菌外膜蛋白基因Omp22克隆测序及生物信息学分析

根据GenBank中的布鲁菌属特异性基因序列Omp22设计1对引物,以牛布鲁菌（Brucella）通辽市分离菌株染色体DNA作为模板,进行PCR扩增。将其定向插入克隆载体PGEM-7Zf,综合利用生物信息学软件（Danman和Vector NTI）、数据库（Prosite和PDB）和网络服务器对外膜蛋白Omp22进行基本性质分析、三维结构预测和功能预测。结果显示,用PCR方法扩增的Omp22基因长度为639bp,编码212个氨基酸,预测其蛋白质的相对分子质量约为22 000,同时用于预测B细胞线性表位的柔韧性和亲水性参数得到综合阐释,生物信息学预测和分析结果可为研究在布氏菌致病及机体免疫应答中外膜蛋白Omp22的结构与功能的关系提供丰富资料。     

流产型布鲁菌Omp10、Omp25蛋白的表达纯化与鉴定

获得高纯度具有生物学活性的重组布鲁菌Omp10、Omp25融合蛋白,并进行抗原性的分析。将用PCR扩增出的布鲁菌Omp10、Omp25基因片段分别克隆到原核表达载体pET-32α中,构建pET-32α-Omp10/Omp25原核表达质粒。将其转入大肠杆菌BL21（DE3）PlysS中,用IPTG诱导表达,经HisTrap HP亲和层析柱分离纯化,分别用Western-blot和间接ELISA检测产物的抗原性。基因测序及酶切鉴定证明pET-32α-Omp10/Omp25原核表达载体构建成功。SDS-PAGE表明,Omp10、Omp25融合蛋白均以包涵体的形式在大肠杆菌中高效表达。经过包涵体的变性、复性及亲和层析纯化,成功获得了大小分别为34 000和44 000的融合蛋白,与预测的相对蛋白分子质量一致。Western和间接ELISA试验证明纯化的Omp10、Omp25融合蛋白能被免疫的牛布鲁菌阳性血清所识别。结果表明,成功获得了布鲁菌Omp10、Omp25融合蛋白,且均具有一定的免疫原性,通过血清学反应证实,Omp10、Omp25蛋白为布鲁菌病临床诊断试剂盒的研制奠定了基础。     

1α，25-二羟维生素D3对大鼠成骨细胞增殖分化及周期的影响

在SD大鼠成骨细胞（Osteoblast,OB）体外培养体系中添加不同浓度1α,25-二羟维生素D3（0、10^-9、10^-8、10^-7mol／L）,作用24、48、72h,测定OB增殖率、碱性磷酸酶（ALP）活性,作用48h流式细胞仪测定0B周期。结果显示,10^-9mol／L 1α,25-二羟维生素D3作用24、48、72h均促进oB增殖（P〈0.05或P〈0.01）,抑制ALP活性（P〈0.01）;10^-8、10^-7mol／L作用24、48h,OB增殖率与对照组差异不显著（P〉0.05）,但24h时ALP活性均明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,48h则抑制了ALP活性并使OB滞留在G2／M期（P〈0.05或P〈0.01）;72h时10^-7mol／L组OB增殖率极显著低于其余各组（P〈0.01）,并使ALP活性升高（P〈0.01）。表明低浓度1α,25-二羟维生素D3能促进OB增殖,抑制其分化;高浓度1α,25-二羟维生素D3能抑制OB增殖,促进其分化,并使细胞滞留在G2／M期。     

Indirect Utilization of Hefeng 25 and Breeding of ‘Hefeng＇ Soybean Varieties

为了研究优秀种质资源的利用方式,以合丰25育成的品种（系）作母本,与不同结英习性的大豆杂交,成功育成7个合丰号大豆品种,合丰40、合丰42、合丰43、合丰55、合丰56、舍农60、舍农62,这些品种对合丰号大豆的推广应用起到了重要的作用。同时合丰25的间接利用效果显著。     

饮水添加25-OH-D3对肉仔鸡生产性能的影响

随机设计，饮水添加不同剂量的25-OH—D3研究对肉仔鸡生产性能的影响。结果表明：①饮水添加18μg／kg25--OH—D3，可提高肉鸡采食量，提高肉鸡增重，明显降低料肉比，差异显著（P〈0．05）；②饮水添加18μg/kg25-OH-D3，各项屠宰指标均高于对照组且差异显著（P〈0．05）；③饮水添加18μg／kg 25-OH—D3，可获得最高经济效益。