芒果苷抗DHAV-1致鸭胚肝细胞炎性损伤的研究

【目的】 探究芒果苷（mangiferin，Man）对鸭甲型肝炎病毒1型（Duck hepatitis A virus-1，DHAV-1）致鸭胚肝细胞（DEHCs）炎性损伤的影响。【方法】 从14日龄SPF级麻鸭鸭胚肝脏组织分离原代DEHCs，用含不同浓度芒果苷（0、5、10、20、40、80和160 μmol/L）的培养液培养48 h后，通过CCK-8法检测其安全浓度范围；用安全浓度的芒果苷培养DEHCs 12、24和48 h后，检测培养液上清中乳酸脱氢酶（LDH）的活力，判定芒果苷对DEHCs的毒性作用。将DEHCs分为对照组（Mock）、模型组（Model）、芒果苷组（Man10、Man20和Man40）和利巴韦林组（Rib），每组3个重复，所有组细胞血清饥饿培养12 h后，Mock组加入含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基，Model、Man10、Man20、Man40和Rib组用DHAV-1（MOI=1.0）攻毒2 h后，Model组更换为含10% FBS的DMEM培养基，Man10、Man20、Man40培养基中分别添加10、20和40 μmol/L芒果苷，Rib组添加1 μmol/L利巴韦林。48 h后收集各组细胞，用比色法检测丙二醛（MDA）含量及过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、总一氧化氮合酶（T-NOS）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性；免疫荧光（IF）法检测DHAV-1在各组DEHCs中的分布情况；Western blotting法检测NLRP3/Pro-Caspase1/IL-1β通路蛋白的表达情况。提取2日龄SPF麻鸭的新鲜全血，分离鸭外周血单个核细胞（duPBMCs），duPBMCs分组及处理同DEHCs，ELISA法检测各组duPBMCs上清液中白介素8（IL-8）和IL-1β的含量。【结果】 与0 μmol/L芒果苷组相比，80和160 μmol/L芒果苷组细胞的增殖能力显著降低（P<0.05），因此5~40 μmol/L芒果苷为处理DEHCs的安全给药浓度。20和40 μmol/L芒果苷处理48 h细胞上清液中LDH活力显著低于处理12和24 h （P<0.05），20和40 μmol/L芒果苷处理12和24 h细胞上清液中LDH活力显著高于5和10 μmol/L芒果苷处理（P<0.05），各浓度芒果苷处理48 h细胞上清液中LDH活力均差异不显著（P>0.05），故48 h为最适处理时间。与Mock组相比，Model组DEHCs中CAT、T-AOC、SOD和GSH-Px活性均显著降低（P<0.05），DEHCs中MDA含量、T-NOS活性、DHAV-1拷贝数、DHAV-1阳性率、NLRP3表达量及duPBMCs中IL-8、IL-1β分泌量均显著升高（P<0.05）。与Model组相比，Man10、Man20和Man40组DEHCs中CAT、T-AOC、SOD和GSH-Px活性均显著提高（P<0.05），DEHCs中MDA含量、T-NOS活性、DHAV-1拷贝数、DHAV-1阳性率、NLRP3表达量及duPBMCs中IL-8、IL-1β分泌量均显著降低（P<0.05）。【结论】 芒果苷可通过增加抗氧化能力、降低DHAV-1的复制水平、抑制NLRP3通路的激活、降低促炎细胞因子的释放抗DHAV-1感染DEHCs造成的炎性损伤。     

肌肽对H9N2亚型猪流感病毒致小鼠肺病理损伤的影响

探讨肌肽(carnosine)对人工感染H9N2亚型猪流感病毒(H9N2-SIV)小鼠肺部组织病理损伤变化的影响。选用6~8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠150只,随机分为对照组、感染组和肌肽干预组,每组50只,分别鼻腔接种正常鸡胚尿囊液、含H9N2-SIV的鸡胚尿囊液和肌肽+含H9N2-SIV的鸡胚尿囊液。试验第2、4、6、8和14天,每组分别处死8只小鼠,观察肺组织的病理变化、测定肺系数及肺湿/干质量比。结果显示,肌肽可减轻H9N2-SIV造成的小鼠临床症状,降低死亡率;肌肽干预组在试验第6天和第8天明显降低肺组织肺湿/干质量比(P0.05);在试验第4、6、8天明显降低肺系数值(P0.05),并减轻肺部淤血、出血、水肿、炎性细胞浸润等肺部病理变化。可见:肌肽可降低肺组织肺湿/干质量比及肺系数值并减轻肺部病理变化,从而减轻小鼠肺部损伤的程度、降低死亡率。     

玉米孢囊线虫孵化特性及不同品种玉米对其抗性研究

玉米孢囊线虫病是我国玉米的新病害，对我国玉米生产存在潜在风险。通过生物学测定和盆栽试验，研究广西玉米孢囊线虫(Heterodera zeae)群体孵化特性、侵染规律和发育进程以及广西主栽玉米品种对该线虫群体的抗性。结果表明，玉米孢囊线虫在25℃～33℃均可孵化，33℃为最佳孵化温度；20℃和35℃条件下孢囊线虫的孵化率仅为4.6 %；15℃和40℃条件孢囊不孵化。30℃条件下，玉米孢囊线虫15～18 d完成1个生活史。广西主栽的16个玉米品种中仅有庆农13和万川973表现为高抗。     

陕西某羊场莎能奶山羊球虫分离鉴定及感染情况

对陕西省某羊场莎能奶山羊的球虫感染情况进行调查研究，应用球虫卵囊富集技术，结合形态学方法对采自该场2～12月龄的49份（≤2月龄22份；3～5月龄13份；6～12月龄14份）奶山羊新鲜粪便样品进行球虫卵囊分离，显微镜检测和OPG（Oocysts per gram）统计。结果显示，莎能奶山羊球虫总感染率为98.0%（48/49），OPG统计发现，3～5月龄羔羊球虫平均OPG最高，为2 442个/g。最高OPG存在于2月龄羔羊样品中，为15 083个/g，且该羊只出现严重腹泻症状。对富集分离到的球虫卵囊进行孢子化和种类鉴定，共鉴定出7种山羊艾美耳球虫。进一步对随机提取的277个孢子化球虫卵囊进行优势虫种统计分析，其中雅氏艾美耳球虫（Eimeiria ninakohlyakimovae）、阿氏艾美耳球虫（E.arloingi）和柯氏艾美耳球虫（E.christenseni）占比最高，依次为17.3%（48/277）、15.9%（44/277）和15.2%（42/277），是该羊场莎能奶山羊球虫的优势虫种。综上所述，初步明确该羊场莎能奶山羊不仅普遍存在球虫感染，而且存在多种球虫混合感染和致病力较强的优势虫种。