食品中金黄色葡萄球菌PCR检测方法的建立

采用PCR技术特异性扩增金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶编码基因(nuc基因),检测模拟样品中金黄色葡萄球菌。结果表明所建立的模拟食品中金黄色葡萄球菌的PCR检测方法,特异性良好,敏感性可达61.76pg/μl。     

1例兔急性乳房炎的诊治

兔乳房炎多发生于分娩后3-15 d的哺乳母兔，其病原菌多为金黄色葡萄球菌和链球菌，大多通过乳头上的小伤口进入机体。笔者所在乡镇兔养殖业虽然不是很发达，呈零星分散养殖（多以家庭养殖为主），但总体养殖量和存栏量均在50000只以上，养兔也是本地农民增收的一种途径。由于家庭养殖技术水平较低，导致兔乳房炎时有发生，给养兔业造成一定的经济损失。2013年，笔者曾诊治过1例兔急性乳房炎并取得较好的疗效，现将具体情况介绍如下。     

高产高效保健野菜--养心菜

养心菜别名救心菜，属蔷薇目景天科，学名景天三七。株高25-40cm，多年生肉质植物，表面蜡质，夏秋开金黄色小花，茎粗壮，叶互生，倒披针形，叶长5-8cm、宽1．5~2em、厚0．1cm，先端渐尖，基部窄楔形，边缘具钝齿，聚伞花序顶生，骨突果放射状排列。     

Study on Expression and Preliminary Immunocompetence of CIC Protein Containing Molecular Adjuvants

To express CTB-IsdBid-Clfais(CIC) protein and evaluate its immunogenicity, CTB (as a molecular adjuvant) could be tandem linked with IsdBid-Clfais gene by the overlapping PCR method, then CTB-IsdBid-Clfais(CIC) was inserted into pET-32a(+) vector to construct recombinant plasmids pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais. The recombinant plasmids pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais were transformed into Escherichia coli (E.coli) BL21 to express the CTB-IsdBid-Clfa(CIC) protein, the CIC expression protein and its immune activity were detected by Western blotting and ELISA,respectively. The results showed that the length of CIC gene were 2 072 bp, and CIC was correctly inserted into the pET-32a(+) plasmids, the pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais recombinant plasmids were successfully constructed. Western blotting result confirmed that the molecular weight of CIC proteins was 95.9 ku, which were correctly expressed by E.coli BL21 with pET-32a (+)-CTB-IsdBid-Clfais plasmids. ELISA results showed that there was no significant difference among the CIC, IsdBid and Clfais protein groups (P>0.05), and there was extremely significant difference between CIC and BSA protein groups (P<0.01). In conclusion, the pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais recombinant plasmids were successfully constructed, CIC proteins were correctly expressed, and were able to react with serum from mice immunized with IsdBid and Clfais,respectively,therefore, CIC proteins had strong immune activity.     

一例犬呼吸道内金黄色葡萄球菌病的诊治

几只犬突然出现了咳嗽,流鼻液,肺部听诊啰音和具有传染性等一系列的症状.无菌分离犬的痰液,进行细菌培养,革兰氏染色,生化试验等鉴定方法确定该致病菌为金黄色葡萄球菌,药敏试验表明该菌对氟苯尼考和头孢类药物等相对敏感.后期通过对犬进行肌内注射治疗和雾化治疗,犬恢复了健康.     

葎草醇提物对小鼠细菌性腹泻的治疗作用

探讨葎草醇提物对金黄色葡萄球菌所致小鼠腹泻的治疗作用。金黄色葡萄球菌灌胃法制作小鼠腹泻模型,通过观察小鼠精神变化、体质量变化、DAI评分以及小肠病理切片变化的情况,评价葎草醇提物对小鼠的抗腹泻作用。高剂量治疗组与模型组相比,对小鼠精神恢复、体质量变化以及小肠绒毛恢复等均有明显的作用,高剂量组的治疗效果接近阳性对照组;高剂量治疗组和阳性对照组相对模型组体质量下降趋势明显降低,差异显著(P0.05);与空白组相比,模型组DAI评分明显增加,差异显著(P0.05)相对于模型组,高剂量组DAI、阳性治疗组DAI的评分明显降低,与空白组相比差异不显著(P0.05),治疗效果显著,而中、低剂组DAI评分结果与空白组相比差异显著(P0.05),治疗效果不明显。病理组织学观察,空白组小鼠小肠绒毛排列整齐,各层次结构清晰,绒毛间质无水肿、无小血管扩张充血,而模型组小鼠小肠绒毛排列紊乱,大部分绒毛脱落,绒毛表面有炎性渗出,绒毛间质水肿,小血管扩张、充盈。高剂量组和阳性对照组与模型组相比症状明显改变,小肠绒毛排列整齐,绒毛表面炎性渗出大部分消失,绒毛间质无明显水肿、无小血管扩张、充血,小肠结构与正常组织大致相同,治疗效果明显。葎草醇提物对小鼠腹泻有明显的治疗效果,可为细菌性腹泻的治疗提供理论依据。     

奶牛隐性乳房炎的检测方法

1乳汁病原微生物检查 隐性乳房炎由多种非特定的病原微生物引起,如细菌、真菌、病毒、支原体等。通常主要的病原是链球菌属、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和支原体。链球菌属、金黄色葡萄球菌占病原菌的90%~95%。有些病原菌虽存在于乳房内,但不一定致病。因此,仅仅依据乳汁中有无病原菌进行诊断不可靠,只能根据检出病原菌的种类、数量作出初步的诊断。     

玉叶金花人工栽培技术

玉叶金花（MussaendapubescensAit．f．）中所谓的“玉叶”其实指的是它的萼片变形而来，一朵玉叶金花的花萼有五枚萼片，其中一枚变形为叶片状，有些栽培品种的五片萼片都会变形成为叶片状。它的花小形而且是金黄色，故名“金花”。玉叶金花藤状小灌木。是良好的药用及观赏经济植物。 1 生物学特性     

金黄色葡菌球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响

本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响，为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考。以金黄色葡萄球菌野生株SA113（WT SA113）和SA113 lgt：：ermB脂蛋白表达缺失菌株（SA113Δlgt株）体外感染M1型小鼠骨髓源巨噬细胞，分为3组：空白对照组、WT SA113感染组（MOI：3：1）、SA113Δlgt感染组（MOI：3：1）。采用ELISA法检测M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、趋化因子（RANTES）和白细胞介素10（IL-10）的水平，实时荧光定量PCR检测Toll样受体2（TLR2）、Toll样受体4（TLR4）和含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）基因的表达，免疫荧光法检测脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌作用的影响。结果显示，与空白对照组相比，WT SA113感染组和SA113Δlgt感染组均可显著上调M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、RANTES、IL-10分泌量以及WT SA113感染组TLR2、NLRP3基因表达水平（P<0.05），而TLR4基因表达量显著降低（P<0.05）；与WT SA113感染组相比，SA113Δlgt感染组M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、IL-1β、RANTES、IL-10分泌量以及TLR2（12 h除外）、NLRP3基因表达水平显著降低（P<0.05）。免疫荧光结果显示，M1型巨噬细胞对SA113Δlgt株的吞噬作用显著低于对WT SA113株的吞噬作用（P<0.05）。综上，金黄色葡萄球菌的脂蛋白在M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中主要通过激活TLR2和NLRP3受体，诱导细胞因子TNF-α、IL-1β、RANTES和IL-10的产生和释放。     

基因工程鲎素对金黄色葡萄球菌小鼠感染模型治疗效果

基因工程鲎素体外抑菌活性良好,为进一步评价其在体内抑菌活性和治疗效果,本研究建立了金黄色葡萄球菌小鼠肺部和腹腔感染模型,探讨了基因工程鲎素对2种感染模型小鼠的治疗效果。比较基因工程鲎素治疗前后,不同模型小鼠的存活率、血液以及组织中的细菌载量变化;比较治疗前后小鼠肺部感染动物模型的病理学变化。结果表明,与对照组相比,基因工程鲎素治疗后肺部感染模型小鼠存活率升高40%,腹腔感染模型小鼠存活率升高60%,治疗后腹腔感染小鼠血液中的细菌载量下降10~4倍;病理学分析结果表明,基因工程鲎素治疗后小鼠肺脏的炎症反应较轻,肺部组织结构被破坏程度较轻。综上所述基因工程鲎素对金黄色葡萄球菌感染小鼠的体内治疗效果明显,显著提高了小鼠存活率,抑制了细菌的扩散,减轻了病理炎症变化,初步表明基因工程鲎素具有良好的抗感染药物研发前景。