不同因素对牛卵母细胞胞质内精子注射效果的影响

采用胞质内精子注射法（ICSI）构建牛显微受精胚胎,探讨卵母细胞成熟培养时间、精子状态及精子操作液中聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浓度对牛卵母细胞胞质内显微受精（ICSI）卵体外发育的影响。结果显示：成熟培养20 h、24 h和28 h的卵母细胞用于ICSI时,ICSI卵的形态完整率分别为94.6%（175/185）、97.2%（173/178）和96.4%（189/196）（P〉0.05）;成熟培养24 h和28 h的卵母细胞,其ICSI卵的卵裂率（73.4%和70.9%）和囊胚发育率（31.8%和29.6%）显著高于成熟培养20 h的卵母细胞（61.1%和20.6%）（P〈0.05）。对成熟培养24 h的卵母细胞注射获能精子时,ICSI卵的卵裂率和囊胚发育率（72.7%和31.4%）高于未获能精子组（69.4%和29.3%）和不运动精子组（71.5%和30.4%）,但无统计学差异（P〉0.05）。采用含5%,10%和15%PVP的精子操作液处理获能精子后对成熟培养24 h的卵母细胞进行ICSI操作,PVP浓度为5%和10%时,ICSI卵的卵裂率（73.2%和66.9%）和囊胚发育率（32.7%和29.7%）差异不显著（P〉0.05）,但二者均显著高于15%PVP浓度组的卵裂率和囊胚发育率（51.0%和16.3%）（P〈0.01）。结论认为,选用获能精子,并使用含5%PVP的精子操作液进行处理,对成熟培养24 h的牛卵母细胞进行ICSI操作,有利于ICSI卵的体外发育。     

显微注射胚胎干细胞对长爪沙鼠胚胎发育的影响

将不同数量的成系的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)显微注射注入长爪沙鼠(Merionesunguiculatus)的不同胚期的胚胎中,研究其对胚胎发育的影响,以期初步探索嵌合胚胎制作的条件。试验结果表明,显微注射2～5、6～10和11～15个ES细胞数量之间对早囊/囊胚期胚胎的成活率和孵化率的影响均不显著,但显微注射11～15个ES细胞的成活率和孵化率较低,分别为82.14%和64.29%;显微注射2～5个ES细胞的成活率和孵化率均较高,分别为90.90%和78.79%。显微注射11～15个ES细胞和未经显微注射的胚胎成活率分别为95.12%和82.14%,差异极显著(P<0.01);孵化率分别为90.48%和64.29%,差异极显著(P<0.01)。不经显微注射的桑椹/囊胚、经显微注射的8～16-细胞期胚胎和早囊/囊胚,其成活率分别为94.92%、91.53%和87.50%,差异均不显著(P>0.05);从孵化率来看,未经显微注射的桑椹/囊胚和经显微注射的8～16-细胞期胚胎其孵化率分别为89.83%和61.02%,差异极显著(P<0.01)。     

云南杉木G木素分布的研究

用先进的ＵＶ显微分光光度计研究了云南省西畴和彝良两产区杉木Ｇ木素分布。结果表明：１．两产区杉木纵生管胞次生壁吸收峰值为５６０ｎｍ。２．杉木早晚材纵向管胞次生壁层Ｇ木素浓度西畴低于彝良产区；轴向管胞胞间层Ｇ木素浓度彝良低于西畴产区。３．两产区杉木一年轮内，纵向管胞次生壁Ｇ木素浓度峰值，从早材至晚材的变化，西畴产杉木是逐渐降低的，符合正常材变化规律；彝良产杉木有波动，呈波形变化，说明构造不正常。４．两     

民族药地胆草的生药学鉴定

采用原植物、性状、显微、薄层鉴别方法对民族药地胆草进行系统的生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据.结果表明:通过原植物、性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别能够很好的鉴定原植物.     

流动注射法测土壤全氮全磷

流动注射分析 (简称ＦＩＡ)是 1 975年以来迅速发展起来的溶液自动分析及处理技术 ,它具有分析速度快 ,精度好 ,设备操作简单 ,节省试剂与试样及适应性广等一系列优点[1 ] 。为工农业化学分析开拓了一个崭新的前景。我中心化验室从北京农林科学院引进流动注射分析仪开展植株Ｎ、Ｐ含量分析的技术 ,取得了很好的效果。但在土壤Ｎ、Ｐ含量分析方面 ,还有待探索。本人在查阅有关资料和反复试验的基础上 ,找出一套土壤氮、磷联合消化 ,流动注射法测定土壤全氮全磷含量的的配套方法。运用此法测定土壤全Ｎ、全Ｐ ,节省了许多工序 ,待测液直接上机…     

视频显微扫描技术在稻米垩白研究中的应用

利用视频显微扫描技术，结合计算机图形分析，精确考察了垩白分布不同的4个DH株系及其双亲的垩白大小，构建了单粒稻米垩白大小的检测体系；同时还对6个早稻品系的透明度和垩白大小的测定进行了比较，初步探讨了视频显微技术在稻米垩白分析中的应用。     

绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用

研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用,确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量,并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DM AP法的激活效果进行了比较。结果表明,绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用,最佳注射剂量为每个绵羊卵母细胞注入2~4 pL浓度5~6 m g/mL的绵羊精子提取物;绵羊精子提取物的孤雌激活效果与离子霉素联合6-DM AP法的激活效果差异不显著。     

杂交稻种子特性的显微观察

根据机器视觉检测杂交水稻种子质量的要求,针对较困难的微裂、穗萌等特征特性,通过显微观察分析了种子裂颖、穗发芽、带菌及柱头残迹夹持的微观形态,以期为视觉检测时提取关键特征提供依据.     

血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立

目的:建立可表达血清淀粉样P成分(SAP)转基因小鼠模型,以研究SAP基因的功能。方法:采用基因重组技术将SAP基因插入到pCMV-Tag5A真核表达载体上。经BciVI限制性内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳回收2.7 kb目的片断,受精卵原核显微注射法将其注入雄原核,制备转基因小鼠。采用PCR法在基因水平筛选SAP转基因小鼠阳性小鼠;免疫沉淀法结合免疫印迹法在蛋白水平检测SAP基因在PCR阳性转基因小鼠中的表达情况。结果:成功构建了pCMV-Tag5A/mSAP真核表达载体。经显微注射法将2.7 kb线性目的基因片断注射入受精卵雄原核,移植入代孕母鼠,所生127只小鼠,其中PCR鉴定获得10只转基因阳性小鼠。免疫沉淀法和免疫印记法随机检测83#♂founder、7#♀founder与C57 BL/6J小鼠回交F1代PCR阳性转基因小鼠血清中外源SAP基因蛋白水平的表达,发现均有表达。结论:该研究以C57BL/6J小鼠为研究对象,成功地产生能稳定遗传SAP基因的过表达转基因小鼠模型,它将有利于研究SAP基因在炎症、淀粉样沉淀、自身免疫系统中的作用。     

氨化与微贮稻草显微组织结构的比较

干稻草分别通过氨化和微贮处理后，进行经组织切片观察。结果表明，在氨碱的作用下，纤维素木质素表面之间的结合被破坏，并使部分木质素、矿质、栓质溶解，纤维素和半纤维素表面保护层结构变化，胞壁膨胀，纤维软化。稻草经微贮自理后，纤维素、半纤维素－木聚糖链的木质素聚合物的酯键被酶解，增加了柔软性和膨胀度，表现为胞壁衬质物亲水强，富有可逆性，结构上的复性呈常态。相比之下，干稻草细胞壁中的纤维素、半纤维素和木质素